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腫瘍細胞におけるマイクロRNAレベル、機能、および関連する標的遺伝子を評価するためのインビトロプロトコル
JoVE Journal
Genética
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JoVE Journal Genética
An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells
DOI:

09:45 min

May 21, 2019

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Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:06MicroRNA (miRNA) Mimic Transfection
  • 02:03Sulforhodamine B (SRB) Assay
  • 03:20Generation of a Dose-response Curve
  • 04:35Verification of the Direct Target Gene of a miRNA of Interest
  • 06:37Luciferase Assay
  • 07:52Results: miRNA-107 Negatively Regulates Proliferation of PANC-1 Cells
  • 08:53Conclusion

Summary

Tadução automática

このプロトコルは、プローブベースのリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、スルフォルホダミンB(SRB)アッセイ、3'未翻訳領域(3'UTR)クローニング、および目的のmiRNAの標的遺伝子を検証し、miRNAの機能を理解するためにルシフェラーゼアッセイを使用します。

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