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Identification of Novel CK2 Kinase Substrates Using a Versatile Biochemical Approach
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Identificazione dei substrati di chinasi CK2 romanzo utilizzando un approccio biochimico Versatile

DOI:
10.3791/59037-v

•

11:11 min

•

February 21, 2019

•

, ,
1Department of Biochemistry and Molecular Biology,Drexel University College of Medicine

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:35Preparation of the Tissue Samples
  • 01:20Kinase Assay: Thiophosphorylation and Alkylation
  • 02:34Preparation of the Desalting Columns
  • 03:40Removal of PNBM
  • 04:42Immunoprecipitation: Part I
  • 05:32Protein A/G Agarose Bead Preparation
  • 06:39Immunoprecipitation: Part II
  • 08:19Analysis/Validation of Results
  • 09:06Results: Analysis and Identification of Novel CK2 Kinase Substrates
  • 10:48Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

L'obiettivo del presente protocollo è di etichettare, arricchire e identificare i substrati della chinasi di proteina CK2 da un campione biologico complesso come un lysate delle cellule o del tessuto omogeneizzato. Questo metodo sfrutta gli aspetti unici di CK2 biologia per questo scopo.

Tags

Keywords: CK2Kinase SubstratesBiochemical ApproachEndogenous SubstratesCell LysateGTPgammaSPNBMSephadex G-25Affinity Purification

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