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Generación de Clones de células de cáncer para visualizar que contiene la repetición telomérica ARN TERRA de un telómero solo en las células vivas
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Generation of Cancer Cell Clones to Visualize Telomeric Repeat-containing RNA TERRA Expressed from a Single Telomere in Living Cells
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Generación de Clones de células de cáncer para visualizar que contiene la repetición telomérica ARN TERRA de un telómero solo en las células vivas

DOI:
10.3791/58790-v

•

09:13 min

•

January 17, 2019

•

, , ,
1Laboratory of Cell Biology and Molecular Genetics, Department of Cellular, Computational and Integrative Biology – CIBIO,University of Trento, 2Department of Life Sciences,University of Trieste

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:37Selection of Neomycin Resistant Clones
  • 03:41Screening of Neomycin Resistant Clones
  • 05:34Elimination of the Neomycin Resistance Gene from the MS2 Cassette Integrated at Subtelomere 15q
  • 06:06Visualization of TERRA-MS2 Transcripts in Living Cells
  • 06:49Results: Cancer Cell Clones with MS2 Sequence Tag Created and Imaged
  • 08:17Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aquí, presentamos un protocolo para generar clones de células de cáncer que contiene una etiqueta de secuencia de MS2 en un sola subteloméricas. Este enfoque, basándose en el sistema MS2-GFP, permite la visualización de los transcritos endógenos de telomeric repetición que contiene ARN (TERRA) de un telómero solo en las células vivas.

Tags

Keywords: Cancer Cell ClonesTelomeric Repeat-containing RNA (TERRA)Yeast Telomeric Noncoding RNATelomereCell VisualizationSingle TelomereCell CultureCRISPR-Cas9Cell CloningCell FreezingFluorescence Microscopy

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