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मानव लिपिड के प्रति संवेदनशील कटियन चैनल TRPC3 के एकल कण क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा संरचनात्मक निर्धारण के लिए अभिव्यक्ति और शुद्धि
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Capítulos
- 00:04Título
- 00:34Infection of HEK293 Mammalian Cells with P2 Baculovirus for Large-scale Protein Expression
- 02:42Purification of hTRPC3 Protein from the Frozen Cell Pellet
- 05:26Results: Structural Determination of hTRPC3
- 07:36Conclusion
इस प्रोटोकॉल क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा आयन चैनल संरचनाओं का निर्धारण करने के लिए इस्तेमाल तकनीक का वर्णन करता है, एक baculovirus प्रणाली कुशलतापूर्वक न्यूनतम प्रयास और विषाक्तता, प्रोटीन निष्कर्षण, शुद्धि के साथ स्तनधारी कोशिकाओं में जीन व्यक्त करने के लिए इस्तेमाल किया सहित, और गुणवत्ता की जांच, नमूना ग्रिड तैयारी और स्क्रीनिंग, साथ ही साथ डेटा संग्रह और प्रसंस्करण ।
