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2 in 1: purificazione di affinità per l'analisi parallela di proteina-proteina e proteina-metabolita complessi in un unico passaggio
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Capítulos
- 00:04Título
- 00:47Preparation of Plant Cell Material
- 01:55Tandem Affinity Purification (TAP)
- 04:59Metabolite and Protein Extraction
- 06:15Results: Simultaneous Characterization of Protein-Protein and Protein-Metabolite Interactions Employing a Single-Step Tandem Affinity Purification Coupled with Mass Spectrometry
- 07:23Conclusion
Interazioni proteina-proteina e proteina-metabolita sono cruciali per tutte le funzioni cellulari. Qui, descriviamo un protocollo che permette l'analisi parallela di queste interazioni con una proteina di scelta. Il nostro protocollo è stato ottimizzato per colture di cellule vegetali e combina purificazione di affinità con proteina basati sulla spettrometria di massa e rilevamento di metabolita.
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Keywords:
Affinity PurificationProtein-protein ComplexesProtein-metabolite ComplexesParallel AnalysisBasic ResearchMedicalPharmaceuticalBiotechnologicalSmall Molecular LigandsIn Vivo ConditionsInteracting MoleculesPSBL Arabidopsis ThalianaCell CultureMSMO MediumLogarithmic Growth PhaseMixer MillLysis BufferIgG Sepharose Beads
