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2在 1: 一步亲和纯化为蛋白质蛋白质和蛋白质代谢物的平行的分析

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

2 in 1: One-step Affinity Purification for the Parallel Analysis of Protein-Protein and Protein-Metabolite Complexes

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2在 1: 一步亲和纯化为蛋白质蛋白质和蛋白质代谢物的平行的分析

DOI:

10.3791/57720-v

•

08:23 min

•

August 06, 2018

•

Marcin Luzarowski*¹, Izabela Wojciechowska*¹, Aleksandra Skirycz

¹Max Planck Institute of Molecular Plant Physiology

Capítulos

00:04Título
00:47Preparation of Plant Cell Material
01:55Tandem Affinity Purification (TAP)
04:59Metabolite and Protein Extraction
06:15Results: Simultaneous Characterization of Protein-Protein and Protein-Metabolite Interactions Employing a Single-Step Tandem Affinity Purification Coupled with Mass Spectrometry
07:23Conclusion

Summary

Tadução automática

蛋白质和蛋白质代谢物相互作用对所有细胞功能都至关重要。在这里, 我们描述了一个协议, 允许并行分析这些交互与蛋白质的选择。我们的协议优化了植物细胞培养, 并结合亲和纯化与质谱为基础的蛋白质和代谢物检测。

Tags

Keywords: Affinity Purification Protein-protein Complexes Protein-metabolite Complexes Parallel Analysis Basic Research Medical Pharmaceutical Biotechnological Small Molecular Ligands In Vivo Conditions Interacting Molecules PSBL Arabidopsis Thaliana Cell Culture MSMO Medium Logarithmic Growth Phase Mixer Mill Lysis Buffer IgG Sepharose Beads

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