/

/

哺乳动物基因翻译起始复合体形成的 Toeprinting 分析

JoVE Journal
Bioquímica

É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.

JoVE Journal Bioquímica

Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

哺乳动物基因翻译起始复合体形成的 Toeprinting 分析

DOI:

10.3791/57519-v

•

10:37 min

•

May 10, 2018

•

Joseph A. Ross, Nehal Thakor^2,3

¹Department of Chemistry and Biochemistry, Alberta RNA Research and Training Institute,University of Lethbridge, ²Department of Neuroscience and the Canadian Centre for Behavioral Neuroscience (CCBN),University of Lethbridge, ³Arnie Charbonneau Cancer Institute,University of Calgary

Capítulos

00:04Título
00:34Preparation of mRNA
02:59Toeprinting Assay
06:32Sequencing Reactions and Gel Electrophoresis
07:53Results: Importance of IRES Secondary Structure in the Formation of Translation Initiation Complexes on an Uncapped XIAP IRES RNA
09:35Conclusion

Summary

Tadução automática

Toeprinting 的目的是测量体外转录 RNA 的能力, 在各种条件下形成与核糖体的翻译起始配合物。该协议描述了一种 toeprinting 哺乳动物 RNA 的方法, 可用于研究 cap 依赖和 IRES 驱动的翻译。

Tags

Toeprinting Analysis Translation Initiation Complex Mammalian MRNAs IRES RNA Purification Rabbit Reticulocyte Lysate RNase Inhibitor ATP GMP-PNP DTT Spermidine

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

从Cryomilled哺乳动物细胞中的蛋白质复合物亲和捕获

巨囊泡封装微球通过一个水包油乳液的离心制备

定量荧光测量全球本地化翻译

核糖体剖面对芽殖酵母中翻译的全基因组定量

用于分析依赖帽的翻译动力学的体外单分子成像测定

半乳糖凝集素-3 - U1 snRNP复合物在珠子上的剪接活性的补充

测量CD95死亡诱导信号传导复合物的组成和该复合物中Procaspase-8的处理

使用200 KV透射电子显微镜常规收集高分辨率冷冻电镜数据集

用于评估蛋白水解靶向嵌合体（PROTACS）诱导的三元复合物形成的生物物理测定方法的发展和应用

通过将微流体与质量光度法相结合来分析微摩尔浓度下的蛋白质复合物形成

Read Article