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Medição simultânea de peróxido de hidrogénio superóxido e produção de NADH por desidrogenases mitocondriais contendo Flavin
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JoVE Journal Bioquímica
Simultaneous Measurement of Superoxide/Hydrogen Peroxide and NADH Production by Flavin-containing Mitochondrial Dehydrogenases

Medição simultânea de peróxido de hidrogénio superóxido e produção de NADH por desidrogenases mitocondriais contendo Flavin

DOI:
10.3791/56975-v

•

08:57 min

•

February 24, 2018

•

, , ,
1Department of Biochemistry,Memorial University of Newfoundland

Capítulos

  • 00:00Título
  • 00:17Introduction
  • 01:50Setting Up the Assay
  • 05:44Results: Simultaneous tracking of changes in NADH and superoxide/hydrogen peroxide fluorescence
  • 07:32Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

As mitocôndrias contêm várias enzimas dependentes de flavina que podem produzir espécies reativas de oxigênio (ROS). Liberação de sites individuais nas mitocôndrias monitoramento ROS é um desafio devido às reações colaterais indesejados. Apresentamos um método fácil e barato para avaliação direta do nativas taxas para liberação ROS usando flavoenzymes purificado e microplacas fluorometry.

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Keywords: Mitochondrial DehydrogenasesSuperoxide/hydrogen PeroxideNADH ProductionFlavin-containing EnzymesPyruvate DehydrogenaseAlpha-ketoglutarate DehydrogenaseMicroplate FluorometryReactive Oxygen SpeciesAntioxidantsInhibitorsSimultaneous Measurement

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