O ensaio tunel
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Visão Geral
Uma das marcas da apoptose é a fragmentação do DNA nuclear por núcleos. Essas enzimas são ativadas por caspases, a família de proteínas que executam o programa de morte celular. O ensaio TUNEL é um método que aproveita esse recurso para detectar células apoptóticas. Neste ensaio, uma enzima chamada terminal deoxynucleotidyl transferase catalisa a adição de nucleotídeos dUTP às extremidades livres de DNA fragmentado. Usando dUTPs que são rotulados com etiquetas químicas que podem produzir fluorescência ou cor, as células apoptóticas podem ser identificadas especificamente.
O vídeo de JoVE sobre o ensaio TUNEL começa discutindo como essa técnica pode ser usada para detectar células apoptóticas. Em seguida, passamos por um protocolo geral para a realização de ensaios TUNEL em seções de tecido e visualização dos resultados usando microscopia de fluorescência. Finalmente, várias aplicações do ensaio à pesquisa atual serão abordadas.
