This content is Free Access.
Capítulos
- 00:05Título
- 00:48Digestion of DNA with MNase and Separation of DNA Fragments by PAGE
- 03:05Isolation of DNA Fragments from PAGE Gels and Linker Generation
- 04:26End Repair of Gel-purified Fragments and Linker Ligation
- 05:32Size Selection and Assembly of Vector-insert Construct
- 06:18Electroporation of TG1 Electrocompetent E. coli Cells
- 08:38Results: a gRNA Library can be Generated from and Target DNA
- 09:56Conclusion
Методы для создания крупномасштабных gRNA библиотек должна быть простой, эффективной и рентабельной. Мы описываем протокол для производства gRNA библиотек на основе ферментативного пищеварения ДНАО цели. Этот метод, женский (всеобъемлющий gRNA библиотека поколения через контролируемые нуклеиназы деятельности) представляет альтернатива дорогостоящим пользовательских олигонуклеотида синтеза.
