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大規模な gRNA ライブラリ生産 DNA の任意のソースからの普遍的なプロトコル
JoVE Journal
Genética
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JoVE Journal Genética
A Universal Protocol for Large-scale gRNA Library Production from any DNA Source
DOI:

10:32 min

December 06, 2017

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Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:48Digestion of DNA with MNase and Separation of DNA Fragments by PAGE
  • 03:05Isolation of DNA Fragments from PAGE Gels and Linker Generation
  • 04:26End Repair of Gel-purified Fragments and Linker Ligation
  • 05:32Size Selection and Assembly of Vector-insert Construct
  • 06:18Electroporation of TG1 Electrocompetent E. coli Cells
  • 08:38Results: a gRNA Library can be Generated from and Target DNA
  • 09:56Conclusion

Summary

Tadução automática

大規模な gRNA ライブラリを生成するためのメソッドは、シンプルで効率的かつコスト効果の高いはずです。ターゲット DNA の酵素の消化力に基づく gRNA ライブラリの生産のためのプロトコルについて述べる。このメソッド CORALINA (制御のヌクレアーゼ活性を通じて包括的な gRNA ライブラリを生成) は高価なカスタム オリゴヌクレオチド合成に代わるものを提示します。

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