This content is Free Access.
Capítulos
- 00:05Título
- 00:48Digestion of DNA with MNase and Separation of DNA Fragments by PAGE
- 03:05Isolation of DNA Fragments from PAGE Gels and Linker Generation
- 04:26End Repair of Gel-purified Fragments and Linker Ligation
- 05:32Size Selection and Assembly of Vector-insert Construct
- 06:18Electroporation of TG1 Electrocompetent E. coli Cells
- 08:38Results: a gRNA Library can be Generated from and Target DNA
- 09:56Conclusion
बड़े पैमाने पर gRNA पुस्तकालयों पैदा करने के लिए तरीके सरल, कुशल और लागत प्रभावी होना चाहिए । हम लक्ष्य डीएनए के एंजाइमी पाचन पर आधारित gRNA पुस्तकालयों के उत्पादन के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन । इस विधि, CORALINA (नियंत्रित nuclease गतिविधि के माध्यम से व्यापक gRNA पुस्तकालय पीढ़ी) महंगा कस्टम oligonucleotide संश्लेषण के लिए एक विकल्प प्रस्तुत करता है ।
