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Detecção e visualização de complexos de proteína induzidos por dano do DNA em culturas de células de suspensão usando o Ensaio de Ligação de Proximidade
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Detection and Visualization of DNA Damage-induced Protein Complexes in Suspension Cell Cultures Using the Proximity Ligation Assay
DOI:

13:10 min

June 09, 2017

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Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:02Treatment of Cells and Induction of DNA Damage
  • 03:21Cytocentrifugation, Fixation, and Permeabilization
  • 05:35Blocking and Primary Antibody Incubation
  • 07:19PLA Probes, Ligation, and Amplification
  • 09:04Mounting and Imaging
  • 10:34Results: The PLA Assay Detects Direct Protein-protein Interactions in Suspension Cell Cultures
  • 12:03Conclusion

Summary

Tadução automática

Aqui, é demonstrado como o Ensaio de Ligação à Proximidade in situ (PLA) pode ser usado para detectar e visualizar as interações proteínas-proteínas diretas entre ATM e p53 em culturas de células suspensas expostas ao estresse genotóxico.

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