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Medição da sinalização do receptor acoplado à proteína G via ligação GTP marcada com rádio
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1The Solomon H. Snyder Department of Neuroscience,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Neurology and neurosurgery,Johns Hopkins University School of Medicine, 3Departments of Pharmacology and Molecular Sciences,Johns Hopkins University School of Medicine, 4Department of Psychiatry and Behavioral Sciences,Johns Hopkins University School of Medicine
Capítulos
- 00:05Título
- 00:37Expression of Recombinant HA-MOR1, Cell Fractionation, and Membrane Collection
- 03:55[35S]GTPγS Binding
- 06:05Membrane Filtration
- 06:59Liquid Scintillation Counting
- 07:57Results: Characterization of G-protein-coupled Receptors by Monitoring Radio-labled GTP Binding
- 09:01Conclusion
A ligação de trifosfato de guanosina (GTP) é um dos primeiros eventos na ativação do receptor acoplado com proteína G (GPCR). Este protocolo descreve como caracterizar farmacologicamente as interacções específicas de GPCR-ligando, monitorizando a ligação do análogo de GTP radio-marcado, [ 35 S] guanosina-5'-O- (3-tio) trifosfato ([35S] GTPγS), em Resposta a um ligando de interesse.
