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Mesure de la signalisation des récepteurs couplés à la protéine G via liaison GTP radiomarquée
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1The Solomon H. Snyder Department of Neuroscience,Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Neurology and neurosurgery,Johns Hopkins University School of Medicine, 3Departments of Pharmacology and Molecular Sciences,Johns Hopkins University School of Medicine, 4Department of Psychiatry and Behavioral Sciences,Johns Hopkins University School of Medicine
Capítulos
- 00:05Título
- 00:37Expression of Recombinant HA-MOR1, Cell Fractionation, and Membrane Collection
- 03:55[35S]GTPγS Binding
- 06:05Membrane Filtration
- 06:59Liquid Scintillation Counting
- 07:57Results: Characterization of G-protein-coupled Receptors by Monitoring Radio-labled GTP Binding
- 09:01Conclusion
La liaison à la guanosine triphosphate (GTP) est l'un des premiers événements dans l'activation du récepteur couplé aux protéines G (GPCR). Ce protocole décrit comment caractériser pharmacologiquement des interactions spécifiques de GPCR-ligand en surveillant la liaison de l'analogue GTP radio-marqué, [ 35 S] guanosine-5'-O- (3-thio) triphosphate ([ 35 S] GTPγS), en Réponse à un ligand d'intérêt.
