Journal
/
Biologia
/
Floresan Proteaz Koruma Kullanma Membran Protein topolojisini belirlenmesi (FPP)
JoVE Journal
Biologia
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Biologia
Determining Membrane Protein Topology Using Fluorescence Protease Protection (FPP)
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Floresan Proteaz Koruma Kullanma Membran Protein topolojisini belirlenmesi (FPP)

DOI:
10.3791/52509-v

•

08:14 min

•

April 20, 2015

•

, ,
1Department of Physiology and Biophysics,Chicago Medical School

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:42Transfection of Cells and Cell Culture
  • 03:02Establishing Optimal Conditions for Plasma Membrane Permeabilization
  • 04:59Protease Treatment of Fluorescent Proteins and Image Analysis
  • 05:56Results: Analysis of Protein Topology Using FPP
  • 07:48Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Here, we present a protocol to determine the orientation and topology of integral membrane proteins in living cells. This simple protocol relies on selective protease sensitivity of chimeras between the protein of interest and GFP.

Tags

Membrane Protein TopologyFluorescence Protease Protection (FPP)GFP TaggingDigitonin PermeabilizationProtease DegradationSubcellular OrganellesProtein Orientation

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/52509?article_type=v

Proteaz Aktivitesi belirleme Proteaz Floresan Algılama Kit kullanın
check_url/pt/52509?article_type=v

Lipidik Mesophases kullanarak Yapı Tayini için Membran Proteinleri Kristalize
check_url/pt/52509?article_type=v

Sıvı Faz Kurtarma Moleküler Ağırlık Tabanlı Fraksiyonu GELFREE 8100 Fraksiyonu Sisteminin Kullanılması
check_url/pt/52509?article_type=v

Zaman atlamalı Görüntüleme siRNA Transfeksiyon sonra Mitoz
check_url/pt/52509?article_type=v

Helios Gen Tabancası kullanarak Soğan Hücrelerde Protein-Protein Etkileşimi Bimoleküler Floresan tamamlama (BiFC) Testi
check_url/pt/52509?article_type=v

Ağ Geçidi Uyumlu Bimoleküler Floresan tamamlama (BiFC) kullanarak Bitki Protein Etkileşimleri Tespiti
check_url/pt/52509?article_type=v

Bir uygulama<em> In vitro</emDPS Protein Stres Arabuluculuk Özellikleri gözünüzde canlandırın için> DNA Koruma Testi
check_url/pt/52509?article_type=v

The Cell-based L-Glutathione Protection Assays to Study Endocytosis and Recycling of Plasma Membrane Proteins
check_url/pt/52509?article_type=v

Membran proteinlerinin Yeşil floresan proteini temelli Ekspresyon elemesinde<em> Escherichia coli</em
check_url/pt/52509?article_type=v

Luciferase tamamlayıcı Imaging tahlil Nicotiana benthamiana yaprakları Protein-protein etkileşim Dynamics geçici belirlenmesi için

Read Article