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- 00:00Visão Geral
- 01:04Principles Behind Patch Clamping
- 03:20Patch Clamp Configurations
- 04:43Preparing Micropipettes and Forming a Seal
- 06:05Whole-cell Patch Clamp Procedure
- 07:15Applications
- 09:11Summary
패치 클램프 전기 생리학
English
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Visão Geral
뉴런 세포막은 세포 안팎으로 충전의 움직임을 제어하는 이온 채널로 채워지므로 뉴런 발사를 조절합니다. 이러한 채널의 생물학적 특성을 조사하기 위한 매우 유용한 기술 중 하나를 패치 클램프 레코딩이라고 합니다. 이 방법에서 신경 과학자들은 세포에 광택 유리 마이크로 파이프를 배치하고 흡입을 적용하여 높은 저항 씰을 형성합니다. 이 프로세스는 하나 이상의 이온 채널을 포함하는 멤브레인의 작은 “패치”를 격리합니다. 마이크로피펫 내의 전극을 사용하여 연구원은 채널 활동 분석에 중요한 멤브레인의 전기적 특성을 “클램핑”하거나 제어할 수 있습니다. 전극은 또한 멤브레인을 가로지르는 전압의 변화, 또는 멤브레인을 통한 이온의 흐름을 기록할 수 있게 합니다.
이 비디오는 패치 클램프 전기 생리학의 원리, 필요한 장비에 대한 소개 및 전체 셀, 셀 부착, 천공, 내부 아웃 및 외부 패치를 포함한 다양한 패치 구성에 대한 설명으로 시작됩니다. 다음으로, 일반적인 전세포 패치 클램프 실험의 주요 단계가 설명되어 있으며, 이 단계는 전류 전압(IV) 곡선이 생성됩니다. 마지막으로, 패치 클램프 레코딩의 적용은 이온 채널, 세포 흥분성 및 신경 활성 화합물의 생체 학적 특성이 오늘날 신경 생리학 실험실에서 평가되는 방법을 보여주기 위해 제공됩니다.
Procedimento
패치 클램프 레코딩은 뉴런 활성화를 제어하는 이온 채널의 생체 물리학적 특성을 조사하는 데 매우 유용한 기술이다. 절차는 하나 이상의 이온 채널을 포함하는 막의 작은 “패치”를 격리하기 위해 세포에 대한 유리 마이크로 파이프를 누르는 것을 포함한다. 실험 용 설정은 과학자들이 세포막 전반에 걸쳐 전압을 정밀하게 제어하여 패치 된 영역의 전기 환경을 “클램핑”할 수 있게…
Declarações
No conflicts of interest declared.
Transcrição
Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Patch Clamp Electrophysiology. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
