בביולוגיה מולקולרית, קשירה מתייחסת לצירוף של שני שברי DNA באמצעות היווצרות של קשר זרחן. אנזים המכונה ליגאז מזרז את תגובת קשירה. בתא, רצועות לתקן הפסקות גדיל יחיד וכפול המתרחשות במהלך שכפול DNA. במעבדה, קשירת DNA משמשת במהלך שיבוט מולקולרי כדי להצטרף לרסיסי DNA של תוספות עם וקטורים – מולקולות DNA נשאיות שישכפלו שברי מטרה באורגניזמים מארחים.
וידאו זה מספק מבוא לקשירת DNA. העיקרון הבסיסי של קשירה מתואר, כמו גם הליך שלב אחר שלב להגדרת תגובת קשירה כללית. היבטים קריטיים של תגובות קשירה נדונים, כגון כיצד אורך של overhang קצה דביק משפיע על טמפרטורת התגובה וכיצד היחס של הוספת DNA לווקטור צריך להיות מותאם כדי למנוע קשירה עצמית. כלים מולקולריים המסייעים עם קשירות כמו שבר Klenow ו פוספטאז אלקליין שרימפס (SAP) מוזכרים, ויישומים , כגון קשירת קרבה ותוספת של קישורים לרסיסים לרצף מוצגים גם.
Procedimento
קשירה יכולה להיות מוגדרת כפעולת הצטרפות, וביולוגיה המונח מתייחס לתגובה אנזימטית המצטרפת לשני ביומולקולות עם קשר קוולנטי. וידאו זה מתאר את היישום של קשירת DNA במחקר ביולוגיה מולקולרית. בתא, רצועות DNA הן אנזימים המזהים וחותמים הפסקות בדנ”א על ידי זירוז היווצרות קשרים פוספוד…