Uma Introdução à Transfecção

Transfecção é o processo de inserção de material genético, como DNA e RNA duplo encalhado, em células de mamíferos. A inserção do DNA em uma célula permite a expressão, ou produção, de proteínas usando as próprias máquinas das células, enquanto a inserção do RNA em uma célula é usada para reduzir a produção de uma proteína específica, parando a tradução. Enquanto o local de ação para o RNA transfeinado é o citoplasma, o DNA deve ser transportado para o núcleo para transfecção eficaz. Lá, o DNA pode ser transitoriamente expresso por um curto período de tempo, ou ser incorporado ao DNA genômico, onde a mudança é transmitida de célula para célula à medida que se divide.

Este vídeo descreve o básico por trás das transfecções mediadas químicas e introduz alguns dos reagentes mais usados, incluindo lipídios carregados, polímeros e fosfato de cálcio. Cada passo é descrito a partir da preparação das células para transfecção através da análise da eficiência da transfecção. Além disso, a seção de aplicações deste artigo em vídeo descreve o uso de eletroporação e uma transfecção biolística como métodos alternativos para introduzir ácido nucleico em células mamíferas. Ele também descreve um uso avançado de transfecção onde a co-transfecção de RNA e DNA interferem são introduzidas como uma maneira de regular uma proteína natural e, ao mesmo tempo, produzir uma variante mutante dela dentro da mesma célula.