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La detección de palmitoilación proteínas en neuronas del hipocampo cultivadas por inmunoprecipitación e Intercambio Acyl-Biotina (ABE)
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Capítulos
- 00:05Título
- 02:08Extraction of Target Protein from Cultured Primary Hippocampal Neurons
- 05:54Acyl-Biotin Exchange: Hydroxylamine (HAM) Cleavage
- 09:17Elution of Biotin-conjugated Target Protein and SDS-PAGE
- 10:46Western Blotting and Detection of Palmitoylation of Target Protein
- 12:16Results: Detecting Palmitoylation of a Neuronal Protein
- 16:07Conclusion
La adición de palmitato reversible a las proteínas es un importante regulador de tráfico intracelular de proteínas. Esto es de particular interés en las neuronas donde muchas proteínas sinápticas se palmitoilada. Nosotros utilizamos un método simple bioquímico para detectar proteínas palmitoiladas en las neuronas cultivadas, que pueden ser adaptados para múltiples tipos de células y tejidos.
