Journal
/
/
דור מצע לEndonucleases של מערכות CRISPR / קאש
JoVE Journal
Biologia
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
Substrate Generation for Endonucleases of CRISPR/Cas Systems
DOI:

11:53 min

September 08, 2012

, , , ,

Capítulos

  • 00:05Título
  • 01:37CRISPR/Cas System Overview
  • 02:29Generation of Long Pre-crRNA Substrates via PCR
  • 04:14Generation of Intermediate Pre-cdRNA Substrates via Annealing of DNA Oligonucleotides
  • 06:10Generation of Short Cas RNA Substrates via Custom RNA Oligonucleotide Synthesis
  • 06:41In vitro T7 RNA Polymerase Transcription
  • 08:04Cas6 Endonuclease Assay
  • 09:08Results: Representative Cas6 Endonuclease Assay
  • 11:10Conclusion

Summary

Tadução automática

חסינות CRISPR / קאש מערכות לתווך אדפטיבית בחיידקי חיידקים קדומים. חלבוני CAS רבים הציעו לפעול כendoribonucleases פועל על מבשרי crRNA של משתנה אורך. כאן אנו מדגימים שלוש גישות שונות כדי להפיק את המצעים מראש crRNA לניתוח פעילות ביוכימית endonuclease קאש.

Vídeos Relacionados

Read Article