新生児マウス骨髄単離と骨髄由来マクロファージの調製

骨髄は、自家再生可能でさまざまな細胞系譜に分化できる造血幹細胞集団と間葉系幹細胞集団の両方を囲んでいます。骨髄の造血幹細胞は、骨髄系およびリンパ系^1を生じさせます。間葉系幹細胞は、骨芽細胞(骨)、脂肪細胞(脂肪)、または軟骨細胞(軟骨)を産生します²。これらの細胞は、遺伝子治療^3,4を含む細胞生物学および組織工学の分野で複数の用途があります。骨髄に存在する前駆細胞は、系統特異的な成長因子の存在下で特定の細胞型に分化します。エリスロポエチンは赤血球前駆細胞の増殖を促進し、顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)は好中球コロニーの成長を刺激し、トロンボポエチンは血小板の産生を調節するなど、系統特異的な成長因子のいくつかの例として挙げられます⁵。細胞表面抗原標識FACSおよび磁気活性化セルソーティング(MACS)は、特定の骨髄由来細胞タイプの単離および精製のための確立された方法です⁶。

新生児研究は、新生児の死亡原因の解明や早産時の合併症への対処に向けて進んでいますが、直接的な治療法の開発は依然としてアンメットメディカルニーズです。スミスとデイビスは、「小児患者は依然として治療的孤児である」と述べています⁷。新生児の臨床試験で同意を得るには、サンプルが少ないこと、結果の生涯にわたる影響、倫理的問題など、いくつかの課題^{があります8。}したがって、翻訳関連性を達成するために、新生児に特化した in vivo および in vitro 研究モデルに対する高い需要があります。解剖学的レベルと組織レベル、妊娠期間の短さ、および同腹児数の間に類似性があるため、げっ歯類は最も研究されている哺乳類のモデルシステムです。

ここでは、7-9日齢のマウスの子犬から骨髄を分離するための詳細で、非常に実現可能で、再現性のある手順と、マクロファージに分化する能力について説明します。しかし、異なる分化シグナルを用いることで、さまざまな細胞系譜を達成することができます。また、細胞表面マーカーの存在と、骨髄由来マクロファージ(BMDM)に期待される in vitro 食作用の存在も示しています。