Le peptide lié au gène de la calcitonine (CGRP) est un neuropeptide de 37 acides aminés présent dans les fibres neuronales avec localisation périvasculaire ainsi que dans les tissus non neuronaux. Les deux formes de CGRP, α- et β-CGRP, partagent plus de 90% d’homologie et partagent des fonctions physiologiques; cependant, l’αCGRP se trouve dans le système nerveux central et périphérique, tandis que le βCGRP se trouve dans le système nerveux entérique ^1,2. Lors de l’activation des nocicepteurs et de l’exocytose dépendante du calcium, le CGRP est libéré par les neurones, induisant une inflammation neurogène stérile impliquant une vasodilatation artérielle et une extravasation des protéines plasmatiques 3,4,5,6,7. À partir de là, le CGRP apparaît dans les vaisseaux postcapillaires et peut être un biomarqueur de maladies qui provoquent une activation nociceptive afférente, telles que la migraine 8,9,10,11. Il convient de noter que le CGRP a également été impliqué dans la COVID-19 en raison de son rôle dans l’angiogenèse et la modulation immunitaire, et peut prédire une évolution défavorable de la maladie^12,13. Ainsi, un protocole pour la quantification précise du CGRP dans le plasma humain pourrait avoir une grande valeur.

La plus grande attention a peut-être été accordée au rôle du CGRP dans la migraine. Sur la base d’études précliniques et cliniques, le CGRP a été proposé comme biomarqueur possible de la migraine et comme cible pour le traitement 3,4,5,6,7,8,9,10. Certaines études ont révélé une élévation du CGRP dans les cohortes souffrant de migraine épisodique par rapport aux participants témoins^10,14,15. Le succès des inhibiteurs du CGRP dans les essais cliniques pour le traitement de la migraine semble impliquer un CGRP élevé comme facteur causal des migraines. Cependant, tous les chercheurs n’ont pas corroboré ces résultats^16,17,18,19. De plus, le rôle du CGRP dans les symptômes de migraine autres que les maux de tête n’a pas encore été élucidé; les travaux actuels ont été motivés par le désir de comprendre le rôle du CGRP dans les symptômes vestibulaires de la migraine.

L’incohérence des données des essais immunologiques du CGRP dans la littérature pourrait être due à plusieurs raisons. Premièrement, la demi-vie du CGRP dans le système vasculaire périphérique est de 6,9 min 20, en raison de l’activité des sérines protéases 21, des enzymes dégradant l’insuline et autres métalloprotéases 22, des endopeptidases neutres 23 et de l’enzyme de conversion de l’endothéline-1 ²⁴. Deuxièmement, les détails techniques variables des immunoessais utilisés pour quantifier le CGRP ne sont pas entièrement décrits dans ces études. Enfin, le manque de standardisation de la méthodologie des immunoessais complique encore plus le tableau.

Cet article décrit un protocole ELISA (Modified Enzyme-linked immunosorbent assay) qui permet la purification et la quantification précise des α et βCGRP dans le plasma humain. Les anticorps du kit ne sont pas réactifs avec l’amyline, la calcitonine ou la substance P. Ce protocole a subi les expériences de validation nécessaires, telles que le pic et la récupération et la linéarité de la dilution, dont les données sont présentées ici. Un tel protocole ELISA du CGRP qui a fait l’objet d’une validation n’a pas encore été entièrement décrit dans la littérature. Ce protocole peut être utilisé pour quantifier le CGRP dans le plasma humain dans le contexte de la migraine ainsi que cardiologique^2,25, dermatologique²⁶, obstétrical 27, rhumatologique^28,29, musculo-squelettique 30,31, endocrinien 32,33, et les maladies virales ^12,13 dans lesquelles le CGRP a été impliqué.