干细胞因其在再生医学中的潜力而引起人们的极大兴趣^1，2。许多动物，特别是那些长寿的动物，在成年组织中维持干细胞。这些常驻干细胞具有维持组织稳态的功能，并用于物理损伤或疾病后的修复^3，4。成体动物中的大多数干细胞是静止的，一种相对休眠的状态，其特征在于细胞周期停滞和生长信号传导失活⁵。作为对外在线索的反应，干细胞从静止中退出，进入细胞周期并开始产生特定于其组织类型的子后代。例如，为了建立有效的免疫应答，抗原呈递细胞诱导静止的幼稚T细胞进入细胞周期并克隆扩增⁶.作为对骨骼肌损伤的反应，肌肉卫星干细胞进入细胞周期并产生子成肌细胞以取代受损的肌原纤维^5，7。虽然很明显，静止的干细胞对外在信号有反应，但在许多情况下，外在线索的性质以及线索诱导的干细胞活化的机制仍然不清楚。更好地了解静止干细胞如何响应外在线索并进入细胞周期将有助于在临床上开发更好的干细胞疗法并增加科学知识。

几十年来，模式生物一直被用来揭示在发育和成年期调节干细胞增殖的基因和细胞信号通路。在 果蝇中，神经干细胞（NSC），称为神经母细胞（NBs），在整个发育过程中分裂，产生所有神经元和神经胶质细胞，最终整合，形成大脑功能所需的神经回路^8，9。像其他干细胞一样，NBs不对称地分裂以进行自我更新，并且在某些情况下，对称地扩展干细胞库。在胚胎发生期间指定NBs，并且大多数在接近结束时进入静止状态，这与母体营养储存的减少相吻合（图1）。胚胎发生完成后，幼虫孵化并开始进食。作为对动物喂养的反应，NBs从静止中重新激活并恢复细胞分裂^{10，11，12，13，14，15，16}。由于 果蝇 CNS相对简单，并且由于NBs在规定时间进入和退出静止，因此使用 果蝇 来研究静止，进入和退出的调节被证明是理想的。

图1：CB NBs（中枢脑神经母细胞，红色）和MB NBs（蘑菇体神经母细胞，蓝色）在发育过程中的相对增殖。 在胚胎发生结束时，大多数NBs（红线）停止增殖并进入静止状态。静止一直持续到刚孵化的幼虫吃完第一顿完整的食物。该方法的时间焦点以红色圆圈表示（1，静止和2，重新激活）。MB NBs（蓝色）是在整个发育过程中连续分裂的中枢脑NBs的一个子集（每个大脑半球4个）。 请点击此处查看此图的大图。

作为对动物喂养的反应，PI3激酶和TOR生长信号通路在NBs及其神经胶质和气管生态位^{10，11，15，16}中变得活跃。当膳食营养素被撤回或当PI3激酶水平降低时，NBs无法重新激活，神经胶质细胞和气管的生长也减少了^{10，11，15，16}。目前的模型假设NB再激活与脂肪体的幼虫生长耦合，其释放系统信号以响应动物喂养^12，17，18。这种信号仍然难以捉摸，可能促进果蝇胰岛素样肽（Dilps）在大脑中的表达和释放，从而导致NBs及其神经胶质和气管生态位中PI3激酶的下游激活。为了更好地了解系统线索的性质，我们开发了一种在培养的大脑外植体中重新激活静止NBs的方法。使用这种方法，可以在没有整个动物全身线索的情况下测定NBs的再激活。外源因子可以重新供应到培养基中，并且基于掺入胸苷类似物EdU的NB再活化测定。使用这种方法，我们确定外源性胰岛素足以重新激活大脑外植体中的静止NBs。未来的工作将旨在确定其他因素，当添加回去时，这些因素会积极或消极地调节大脑外植体中的NB静止。