Électroencéphalogramme vidéo continu pendant l’hypoxie-ischémie chez les souris néonatales
Summary
Ce manuscrit décrit une méthode d’enregistrement EEG vidéo continu utilisant plusieurs électrodes de profondeur chez des souris néonatales subissant une hypoxie-ischémie.
Abstract
L’hypoxie ischémique est la cause la plus fréquente de crises néonatales. Les modèles animaux sont essentiels pour comprendre les mécanismes et la physiologie sous-jacents aux crises néonatales et à l’ischémie de l’hypoxie. Ce manuscrit décrit une méthode de surveillance continue de l’électroencéphalogramme vidéo (EEG) chez des souris néonatales pour détecter les crises et analyser le fond de l’EEG pendant l’ischémie d’hypoxie. L’utilisation de la vidéo et de l’EEG en conjonction permet de décrire la sémiologie des crises et de confirmer les crises. Cette méthode permet également d’analyser les spectrogrammes de puissance et les tendances des modèles de fond EEG au cours de la période expérimentale. Dans ce modèle d’ischémie d’hypoxie, la méthode permet l’enregistrement EEG avant la blessure pour obtenir une base de référence normative et pendant la blessure et la récupération. Le temps total de surveillance est limité par l’incapacité de séparer les petits de la mère pendant plus de quatre heures. Bien que nous ayons utilisé un modèle de crises hypoxiques-ischémiques dans ce manuscrit, cette méthode de surveillance EEG vidéo néonatale pourrait être appliquée à divers modèles de maladies et de crises chez les rongeurs.
Introduction
L’encéphalopathie hypoxique ischémique (EIS) est une affection qui touche 1,5 nouveau-né sur 1000 chaque année et est la cause la plus fréquente de crises néonatales1,2. Les nourrissons qui survivent sont à risque de diverses déficiences neurologiques telles que la paralysie cérébrale, la déficience intellectuelle et l’épilepsie3,4,5.
Les modèles animaux jouent un rôle essentiel dans la compréhension et l’étude de la physiopathologie de l’ischémie de l’hypoxie et des crises néonatales6,7. Un modèle de Vannucci modifié est utilisé pour induire une hypoxie ischémie (HI) le jour postnatal 10 (p10)7,8. Les chiots souris de cet âge se traduisent neurologiquement approximativement par le terme complet de nouveau-né humain9.
La surveillance par électroencéphalographie vidéo continue (EEG) utilisée conjointement avec ce modèle de blessure permet de mieux comprendre et caractériser les crises ischémiques hypoxiques néonatales. Des études antérieures ont utilisé diverses méthodes pour analyser les crises néonatales chez les rongeurs, y compris les enregistrements vidéo, les enregistrements EEG limités et les enregistrements EEG de télémétrie10,11,12,13,14,15,16. Dans le manuscrit suivant, nous discutons en profondeur du processus d’enregistrement de l’EEG vidéo en continu chez les chiots souris pendant l’hypoxie-ischémie. Cette technique de surveillance EEG vidéo continue chez les mouse pupitres néonatales pourrait être appliquée à une variété de modèles de maladies et de convulsions.
Protocol
Representative Results
Discussion
Nous avons présenté un modèle de surveillance vidéo-EEG continue chez des souris néonatales lors de crises hypoxiques-ischémiques. L’analyse vidéo en conjonction avec l’EEG permet de caractériser la sémiologie des crises. L’analyse de l’EEG permet l’extraction de spectrogrammes de puissance et l’analyse d’amplitude de fond.
Le placement correct et soigneux des électrodes est crucial dans ce protocole, car une blessure lors du placement de l’électrode ou un placement …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous reconnaissons les sources de financement suivantes : NIH NINDS – K08NS101122 (JB), R01NS040337 (JK), R01NS044370 (JK), University of Virginia School of Medicine (JB).
Materials
| SURGERY | |||
| Ball Point Applicator | Metrex Research | 8300-F | i-bond applicator |
| Cranioplast (Powder/Resin) | Coltene | H00383 | Perm Reline/Power |
| I-Bond | Kulzer GmbH, Germany | ||
| LOOK Silk Suture | Surgical Specialities Corporation | SP115 | LOOK SP115 Black Braided Silk Non absorbable surgical suture |
| RS-5168 Botvin Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5168 | Forcep for surgery/ligation |
| RS-5138 Graefe Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5138 | Forcep for surgery/ligation |
| UV light for I-Bond | Blast Lite By First Media | BL778 | UV ligth for I-bond |
| Vannas Microdissecting Scissor | Roboz Surgical Instrument | RS5618 | Scissor for ligation |
| Vet Bond | 3M Vetbond | 1469SB | Vet Glue |
| HYPOXIA | |||
| Hypoxidial | Starr Life Science | ||
| Oxygen sensor | Medical Products | MiniOxI- oxygen analyzer/sensor for hypoxia rig | |
| EEG RECORDING | |||
| Female receptacle connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 832-10-024-10-001000 | Ordered from Digikey |
| Grass Amplifier | Natus Neurology Incorporated | Grass Product | |
| LabChart Pro | ADI Instruments | Software to run the system | |
| Male Socket Connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 833-43-024-20-001000 | Ordered from Digikey |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2274CD | TLC2274 Quad Low‐Noise Rail‐to Rail Operational Amplifier |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2272ACDR | TLC2274 Quad Low‐Noise Rail‐to Rail Operational Amplifier |
| Stainless Steel wire | A-M Systems | 791400 | 0.005" Bare/0.008" Coated 100 ft |
| Ultra-Flexible Wire | McMaster-Carr | 9564T1 | 36 Gauze wire of various color |
Referências
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