Dette manuskript beskriver en metode til kontinuerlig video EEG optagelser ved hjælp af flere dybde elektroder i neonatale mus gennemgår hypoxi-iskæmi.
Hypoxi iskæmi er den mest almindelige årsag til neonatale anfald. Dyremodeller er afgørende for at forstå de mekanismer og fysiologi, der ligger til grund for neonatale anfald og hypoxi iskæmi. Dette manuskript beskriver en metode til kontinuerlig videoelektroencefalogram (EEG) overvågning i neonatale mus for at opdage anfald og analysere EEG-baggrund under hypoxi iskæmi. Brug af video og EEG i forbindelse giver mulighed for beskrivelse af beslaglæggelse semiologi og bekræftelse af anfald. Denne metode giver også mulighed for analyse af effektspektrogrammer og EEG baggrundsmønster tendenser i løbet af den eksperimentelle periode. I denne hypoxi iskæmi model, metoden tillader EEG optagelse før skade for at opnå en normativ baseline og under skade og nyttiggørelse. Den samlede overvågningstid er begrænset af manglende evne til at adskille unger fra moderen i mere end fire timer. Selvom vi har brugt en model af hypoxisk-iskæmiske anfald i dette manuskript, kunne denne metode til neonatal video EEG-overvågning anvendes på forskellige sygdoms- og beslaglæggelsesmodeller hos gnavere.
Hypoxisk iskæmisk encefalopati (HIE) er en tilstand, der påvirker 1,5 ud af 1000 nyfødte årligt og er den mest almindelige årsag til neonatale anfald1,2. Spædbørn, der overlever, er i fare for forskellige neurologiske handicap såsom cerebral parese, intellektuel handicap, og epilepsi3,4,5.
Dyremodeller spiller en afgørende rolle i forståelsen og undersøgelsen af patofysiologi af hypoxi iskæmi og neonatale anfald6,7. En modificeret Vannucci model bruges til at fremkalde hypoxi iskæmi (HI) på postnatal dag 10 (p10)7,8. Mus hvalpe i denne alder oversætte neurologisk groft til den fulde sigt menneskelige nyfødte9.
Kontinuerlig videoelektrophalografi (EEG) overvågning, der anvendes sammen med denne skadesmodel, giver mulighed for yderligere forståelse og karakterisering af neonatale hypoxiske iskæmiske anfald. Tidligere undersøgelser har brugt forskellige metoder til analyse af neonatale anfald hos gnavere, herunder videooptagelser, begrænsede EEG-optagelser og telemetri EEG-optagelser10,11,12,13,14,15,16. I det følgende manuskript diskuterer vi i dybden processen med at optage kontinuerlig video EEG i museunger under hypoxi-iskæmi. Denne teknik til kontinuerlig video EEG overvågning i neonatale mus hvalpe kunne anvendes til en række sygdom og beslaglæggelse modeller.
Vi har præsenteret en model for kontinuerlig video-EEG overvågning i neonatale mus under hypoxisk-iskæmiske anfald. Videoanalyse i forbindelse med EEG tillader karakterisering af beslaglæggelse semiologi. Analyse af EEG giver mulighed for udvinding af effektspektrogrammer og baggrund amplitud analyse.
Korrekt og omhyggelig placering af elektroder er afgørende i denne protokol, da skade under elektrodeplacering eller unøjagtig placering kan påvirke resultaterne betydeligt. Vurdering af n…
The authors have nothing to disclose.
Vi anerkender følgende finansieringskilder: NIH NINDS – K08NS101122 (JB), R01NS040337 (JK), R01NS044370 (JK), University of Virginia School of Medicine (JB).
SURGERY | |||
Ball Point Applicator | Metrex Research | 8300-F | i-bond applicator |
Cranioplast (Powder/Resin) | Coltene | H00383 | Perm Reline/Power |
I-Bond | Kulzer GmbH, Germany | ||
LOOK Silk Suture | Surgical Specialities Corporation | SP115 | LOOK SP115 Black Braided Silk Non absorbable surgical suture |
RS-5168 Botvin Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5168 | Forcep for surgery/ligation |
RS-5138 Graefe Forceps | Roboz Surgical Instrument | RS5138 | Forcep for surgery/ligation |
UV light for I-Bond | Blast Lite By First Media | BL778 | UV ligth for I-bond |
Vannas Microdissecting Scissor | Roboz Surgical Instrument | RS5618 | Scissor for ligation |
Vet Bond | 3M Vetbond | 1469SB | Vet Glue |
HYPOXIA | |||
Hypoxidial | Starr Life Science | ||
Oxygen sensor | Medical Products | MiniOxI- oxygen analyzer/sensor for hypoxia rig | |
EEG RECORDING | |||
Female receptacle connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 832-10-024-10-001000 | Ordered from Digikey |
Grass Amplifier | Natus Neurology Incorporated | Grass Product | |
LabChart Pro | ADI Instruments | Software to run the system | |
Male Socket Connector 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 833-43-024-20-001000 | Ordered from Digikey |
Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2274CD | TLC2274 Quad Low‐Noise Rail‐to Rail Operational Amplifier |
Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2272ACDR | TLC2274 Quad Low‐Noise Rail‐to Rail Operational Amplifier |
Stainless Steel wire | A-M Systems | 791400 | 0.005" Bare/0.008" Coated 100 ft |
Ultra-Flexible Wire | McMaster-Carr | 9564T1 | 36 Gauze wire of various color |