Nylig har etterspørselen etter kronisk implanterbare mansjettelektroder for stimulering av perifere nerver vokst, da studier i økende grad viser den prekliniske nytten av denne teknikken for behandling av mange inflammatoriske^{sykdommer 1,2,3} og nevrologiske^{lidelser 4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15}. Kronisk VNS, for eksempel, har vist seg å forbedre neokortikale plastisitet i en rekke læringssammenhenger, forbedre motor rehabilitering^4,5,6,7,8, utryddelse læring^{10,11,12,13,14}, og sensorisk diskriminering¹⁵. Kommersielt tilgjengelige perifere nervemansjetlektroder er ofte forbundet med utvidede tider for ordreoppfyllelse og relativt høye kostnader, noe som kan begrense tilgjengeligheten. Alternativt forblir protokoller for “in-house” fabrikasjon av kronisk implanterbare mansjettelektroder begrenset, og gnageranatomi presenterer spesielle utfordringer på grunn av deres lille størrelse. Nåværende protokoller for å konstruere mansjettelektroder for kroniske gnagereksperimenter krever ofte bruk av komplekst utstyr og teknikker, samt omfattende opplært personell. I denne protokollen demonstrerer vi en forenklet tilnærming til mansjettelektrodefabrikasjon basert på tidligere publiserte og mye brukte^{metoder 16,,17}. Vi validerer funksjonaliteten til våre kronisk implanterte elektroder hos rotter ved å demonstrere at på tidspunktet for mansjettimplantasjon rundt venstre cervical vagus nerve, stimulering brukt på mansjettelektrodene vellykket produsert en opphør av pust og fall i SpO2. Stimulering av afferent lungereseptor vagalfibre er kjent for å engasjere Hering-Breuer refleks, der hemming av flere respiratoriske kjerner i hjernestammen resulterer i undertrykkelse inspirasjon¹⁸. Dermed gir opphør av pusten i samsvar med Hering-Breuer-refleksen, og den resulterende nedgangen i SpO2, en enkel test for riktig elektrodeimplantasjon og mansjettfunksjon hos bedøvede rotter. For å validere den langsiktige funksjonaliteten til kronisk implanterte mansjettelektroder ble refleksresponser målt på implantasjonstiden og sammenlignet med svarene som ble oppnådd hos de samme dyrene seks uker etter implantasjon. En annen gruppe rotter ble implantert med VNS mansjettelektroder etter atferdstrening på en spakpressende oppgave. I disse rotter, VNS sammen med riktig oppgave ytelse produsert omorganisering av kortikale motor kartet, i samsvar med tidligere publiserte studier^19,20,21,22. På tidspunktet for motorkortikale kartlegging under anestesi, som skjedde 5-10 uker etter implantasjon av enheten, validerte vi ytterligere mansjettfunksjonen hos VNS-behandlede dyr ved å bekrefte at VNS vellykket induserte en opphør av pusten og en større enn 5% nedgang i SpO₂.

De nylig publiserte protokollene fra Childs et al.¹⁷ og Rios et al.¹⁶ gir et godt validert utgangspunkt for en forenklet mansjettelektrodefabrikasjon tilnærming, da denne populære metoden har blitt benyttet av flere laboratorier som utfører kroniske VNS-studier hos gnagere^1,2,^{3,,4,5,6,7,8,9,10,11}. Den opprinnelige metoden innebærer flere høypresisjonstrinn for å manipulere de fine mikroledningene slik at mansjettelektrodefabrikasjon tar over en time å fullføre, og omfattende opplæring for å utføre pålitelig. Den forenklede tilnærmingen som er beskrevet her krever betydelig færre materialer og verktøy og kan fullføres på under en time av minimalt opplært personell.