For nylig er efterspørgslen efter kronisk implantable manchetlektroder til stimulering af perifere nerver vokset, da undersøgelser i stigende grad viser den prækliniske nytte af denne teknik til behandling af talrige inflammatoriske^{sygdomme 1,,2,,3} og neurologiske lidelser^{4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15}. Kronisk VNS, for eksempel, har vist sig at forbedre neocortisk plasticitet i en række forskellige læringssammenhænge, forbedre motor rehabilitering^4,,5,,6,7,,8, udryddelse^{læring 10,11,12,13,14}, og sensorisk diskrimination¹⁵. Kommercielt tilgængelige perifere nerve manchet elektroder er ofte forbundet med længere tider for ordreopfyldelse og relativt høje omkostninger, som kan begrænse deres tilgængelighed. Alternativt, protokoller for “in-house” fremstilling af kronisk implantable manchetlektroder fortsat begrænset, og gnaver anatomi præsenterer særlige udfordringer på grund af deres lille størrelse. Nuværende protokoller til konstruktion af manchetlektroder til kroniske gnavere eksperimenter kræver ofte brug af komplekse udstyr og teknikker, samt ekstensivt uddannet personale. I denne protokol demonstrerer vi en forenklet tilgang til manchetelektrodefabrikation baseret på tidligere offentliggjorte og udbredte metoder^16,17. Vi validerer funktionaliteten af vores kronisk implanterede elektroder hos rotter ved at påvise, at på tidspunktet for manchetimplantatation omkring venstre cervikale vagusnerven, stimulation anvendes på manchetlektroder med succes produceret et ophør af vejrtrækning og fald i SpO2. Stimulering af afferente lungereceptor vagusfibre er kendt for at engagere Hering-Breuer refleks, hvor hæmning af flere respiratoriske kerner i hjernestammen resulterer i undertrykkelse inspiration¹⁸. Således ophør af vejrtrækning i overensstemmelse med Hering-Breuer refleks, og den deraf følgende fald i SpO2, giver en enkel test for korrekt elektrode implantation og manchet funktion i bedøvet rotter. For at validere den langsigtede funktionalitet af kronisk implanterede manchetlektroder blev refleksresponser målt på implantationstidstidstidstidserne og sammenlignet med de responser, der blev opnået hos de samme dyr seks uger efter implantationen. En anden gruppe rotter blev implanteret med VNS manchetlektroder efter adfærdstræning på en løftestang presserende opgave. I disse rotter, VNS parret med korrekt opgave ydeevne produceret reorganisering af kortikale motor kort, i overensstemmelse med tidligere offentliggjorte^{undersøgelser 19,20,21,22}. På tidspunktet for motorkortikisk kortlægning under anæstesi, som fandt sted 5-10 uger efter enhed implantation, vi yderligere valideret manchet funktion i VNS-behandlede dyr ved at bekræfte, at VNS held induceret et ophør af vejrtrækning og en større end 5% fald i SpO₂.

De nyligt offentliggjorte protokoller fra Childs et al.¹⁷ og Rios et al.¹⁶ giver et velvalideret udgangspunkt for en forenklet manchetelektrodefabrikationsmetode, da denne populære metode er blevet udnyttet af flere laboratorier, der gennemfører kroniske VNS-studier hos gnavere^1,2,3,4,,5, 6^{,7,,88,9,10,11}. Den oprindelige metode indebærer flere højpræcisionstrin til at manipulere de fine mikrowirer, således at manchetlektrodefabrikation tager over en time at gennemføre, og omfattende træning til at udføre pålideligt. Den forenklede tilgang, der er beskrevet her, kræver betydeligt færre materialer og værktøjer og kan gennemføres på under en time af minimalt uddannet personale.