Förutsatt att här är ett protokoll som specificerar steg för att upprätta en djurmodell av kronisk post-ischemia Pain (CPIP). Detta är en väl erkänd modell imitera mänskliga komplexa regionala smärtsyndrom typ-I. Mekaniska och termiska hypersensitivitet utvärderas ytterligare, liksom capsaicin-inducerad nociftäckande beteenden som observerats i CPIP råtta modell.
Komplext regionalt smärtsyndrom typ-I (CRPS-I) är en neurologisk sjukdom som orsakar svår smärta bland patienter och förblir en olösta sjukdomstillstånd. Men de bakomliggande mekanismerna för CRPS-jag har ännu inte avslöjats. Det är känt att ischemia/reperfusion är en av de ledande faktorerna som orsakar CRPS-I. Med hjälp av långvarig ischemi och reperfusion av bakbenen, råtta kronisk post-ischemi Pain (cpip) modell har upprättats för att efterlikna CRPS-I. Den CPIP-modellen har blivit en välkänd djurmodell för att studera mekanismerna för CRPS-I. Detta protokoll beskriver de detaljerade förfaranden som är involverade i inrättandet av råtta modell av CPIP, inklusive anestesi, följt av ischemia/reperfusion av bakbenen. Egenskaperna hos råtta CPIP-modellen utvärderas ytterligare genom mätning av den mekaniska och termiska hypersensitivitet i bakbenen samt de nociferade svaren på akut kapsaicin injektion. Den råtta CPIP modellen uppvisar flera CRPS-I-liknande manifestationer, inklusive bakben ödem och hyperemi i det tidiga stadiet efter etableringen, ihållande termisk och mekanisk överkänslighet, och ökad nociffasade svar på akut capsaicin injektion. Dessa kännetecken gör det ett passande djur modellerar för mer ytterligare utredning av mekanismerna som är involverade i CRPS-I.
Komplexa regionala smärtsyndrom (CRPS) reprents komplexa och kroniska smärtsymptom till följd av frakturer, trauma, kirurgi, ischemi eller nervskada1,2,3. CRPS klassificeras i 2 underkategorier: CRPS typ-I och typ-II (CRPS-I och CRPS-II)4. Epidemiologiska studier visade att prevalensen av CRPS var cirka 1:20005. CRPS-I, som visar inga uppenbara nervskador, kan resultera i kronisk smärta och dramatiskt påverkar livskvaliteten hos patienterna. Nuvarande tillgängliga behandlingar uppvisar otillräckliga terapeutiska effekter. Därför är CRPS-jag fortfarande ett viktigt och utmanande kliniskt problem som måste åtgärdas.
Inrättande av en preklinisk djurmodell imitera CRPS-jag är avgörande för att utforska mekanismerna bakom CRPS-I. För att ta itu med denna fråga, coderre et al. utformat en råtta modell genom att tillämpa långvarig ischemi och reperfusion till bakbenen till recapitulate CRPS-I6. Det är känt att ischemia/reperfusion skada är bland en av de viktigaste orsakerna till CRPS-I7. Den råtta cpip modellen uppvisar många CRPS-I-liknande symtom, som inkluderar Hind lem ödem och hyperemi i det tidiga skedet efter modell etablering, följt med ihållande termisk och mekanisk överkänslighet6. Med hjälp av denna modell, det föreslås att centrala smärt sensibilisering, perifer TRPA1 kanal aktivering och reaktiva syreradikaler generation, etc. bidra till CRPS-I8,9,10. Vi har nyligen framgångsrikt etablerat CPIP råtta modell och utfört RNA-sekvensering av dorsala root ganglier (DRGs) som innerverar den drabbade Hind Paw11. Vi upptäckte några potentiella mekanismer som möjligen är involverade i att förmedla smärtan överkänsligheter CRPS-I11. Vi identifierade ytterligare övergående receptor potentiell Vanilloid 1 (TRPV1) kanal i DRG nervceller som en viktig bidragande orsak till den mekaniska och termiska hypersensitivitet av CRPS-I12.
I denna studie beskrev vi de detaljerade förfaranden som ingår i inrättandet av råtta modell av CPIP. Vi utvärderade vidare råtta CPIP-modellen genom att mäta de mekaniska och termiska hypersensitiviteten samt dess lyhördhet för akut capsaicin Challenge. Vi föreslår att råtta CPIP-modellen kan vara en tillförlitlig djurmodell för vidare utredning av de mekanismer som deltar i CRPS-I.
Detta protokoll beskriver de detaljerade metoderna för att etablera en råtta CPIP-modell genom att tillämpa ischemia/reperfusion att bakben av råttor. Det innebär en utvärdering av hind lem utseende, ödem, mekanisk/termisk överkänslighet, och akuta nociftäckande beteenden som svar på capsaicin injektion.
Lem ischemia/reperfusion är en vanlig faktor som bidrar till CRPS-i hos patienter12. Detta protokoll beskriver hur man etablerar råtta CPIP-modellen, som ?…
The authors have nothing to disclose.
Detta projekt sponsrades av National Natural Science Foundation i Kina (81873365 och 81603676), Zhejiang Provincial Natural Science fonder för framstående unga akademiker (LR17H270001) och forskningsmedel från Zhejiang Chinese Medical University ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).
1.5 ml Eppendorf tube | Eppendorf | 22431021 | |
DMSO | Sigma-Aldrich | D1435 | |
Capsaicin | APEXBIO | A3278 | |
Digital caliper | Meinaite | NA | |
O-ring | O-Rings West | Nitrile 70 Durometer | 7/32 in. internal diameter |
Plantar Test Apparatus | UGO Basile, Italy | 37370 | |
von Frey filaments | UGO Basile, Italy | NC12775 |