小鼠肝外胆管有机体的产生

胆管病变是一种不治之症, 影响位于肝内和肝外胆管 (Ehbd)^的胆道细胞1。一些胆管疾病, 如原发性硬化性胆管炎、胆管癌、胆道闭锁和胆总管囊肿, 主要影响乙二苯醚。由于临床前模型有限, 胆管病治疗的发展受到限制。此外, 以前的研究侧重于分类的胆管疾病: 肝脏、肝内和乙二苯醚。然而, 内和乙二苯醚具有明显的胚胎起源, 因此, 应被视为不同的分子病理。肝内胆管从肝内导管板和肝室的颅骨部分发展, 整个 EHBDs 从肝室2的尾部发育.他们还依靠不同的祖细胞隔间进行成人稳态, 包括 ehbd^2,3中肝内胆管和胆道周围的海灵管。使用动物模型进行临床前研究受到费用的限制, 出于伦理原因, 应尽量减少。因此, 在体外模型中, 还原性、重现性、时间和成本效益是非常可取的。

以前对胆管病变的大多数研究都使用了正常的小鼠或大鼠癌症模型, 或来自乙二苯并 4^、5、6、7的人胆管癌细胞系.然而, 这些都是转化细胞的模型, 并不重述正常的胆管细胞生物学在稳态或处于健康状态。最近在发展的有机型培养模型的进展, 使三维结构的发展, 从不同的组织类型, 包括肝胆组织, 虽然不是正常的小鼠 ehbd^{8,9, 10个}。这些 “器官样” 结构旨在模仿原代组织, 生长在一个人工生态位, 支持器官特异性干细胞^的自我更新, 11。

“有机体” 是一个宽泛的术语, 通常描述从干细胞中获得的三维组织模型。有机体可以从胚胎干细胞和诱导多能干细胞所代表的重新编程的多能干细胞中产生。它们也可以从器官特异性的成人干细胞¹²中产生。在以往的研究中, 已经提出了一些胆管细胞有机体模型。因此, 从人类多能干细胞中提取的有机生物已被报道为^7、9、13, 并提供了一个宝贵的、时间高效的工具, 可以同时生成不同的细胞类型。然而, 这些多能干细胞衍生的有机体并不能完全反映原发性成人 EHBD 胆管细胞的结构和功能。

还提出了从人9和猫¹⁰肝的成虫干细胞中提取的有机体。猫科车型并不普遍, 用于研究目的的工具设备有限。此外, 这些肝源性成人干细胞衍生的有机体不模拟肝外胆管细胞, 而是肝内胆管细胞。

人类正常 Ehbd¹⁴和小鼠 ehbd 胆管癌15报告了 EHBD 有机体的产生。然而, 获得人类 EHBD 组织的机会极为有限, 从胆管癌的遗传小鼠模型¹⁵中获得的有机物质并不代表体内的健康胆管细胞生物学, 而是来自基因修饰细胞。

为了解决多能干细胞和肝脏衍生的胆管细胞组织模型的局限性以及临床前模型所需的对人体组织的访问有限的问题, 我们开发了一个小鼠 EHBD 有机体模型 (图 1a)。这份手稿描述了一种从成人组织中提取的小鼠 ehbd 衍生的有机体技术的发展。这些名为 Ehbdo 的 EHBD 有机体将是研究 Ehbd 胆管局稳态和疾病过程 (如胆管病变) 机制的重要体外工具。