Australske økosystemer opprettholde menneskelig liv gjennom levering av tjenester, inkludert mat og fiber blant mange andre dynamiske interaksjoner¹. Ironisk nok er det menneskelig aktivitet som fungerer som den dominerende føreren av økosystemet avbrudd gjennom biologisk mangfold endring². Habitat fragmentering, kjent som prosessen med å dele store sammenhengende habitater i små flekker av land, isolert fra hverandre, er den store menneskeskapte biologisk mangfold endring truende australske økosystemer². Habitat fragmentering endrer strukturen og mangfoldet av arter sammensetning i et gitt område, og dermed redusere arealet av habitat nødvendig for disse artene å opprettholde levedyktig populasjoner². Resultatet av dette er økt konkurranse mellom arter for ressurser, inkludert mat, drivstoff, fiber, og vann³. Ødeleggelsen av australske økosystemer gjennom endring av biologisk mangfold er å ha katastrofale konsekvenser for mange australske arter¹.

Australias mest ikoniske marsupial arter, den Koala (Phascolarctos cinereus), avhenger av australske økosystemer gjenværende sunt for deres overlevelse⁴. Innføringen av den europeiske bosetningen førte til en rask nedgang i australske populasjoner av koalabjørner, da de ble slaktet for deres skinnene i jakten på profitt i en stor eksport handel⁵. Denne praksisen ble forbudt på 1980-tallet og bestander av koalabjørner var da i stand til å stabilisere⁵. Men eksponentiell vekst av den menneskelige befolkning har resultert i denne arten konkurrerer om mye av deres habitat, og deres overlevelse er igjen under trussel⁶. Ifølge International Union for Conservation of Nature (IUCN), er alle populasjoner av australske koalabjørner oppført som sårbare for utryddelse med en synkende befolknings trend⁷. Denne oppføringen er tilskrevet usikkerheten rundt relevante befolknings parametre og markert variasjon i befolknings trender for denne arten⁷. Som den mest ikoniske og endemisk dyr, koalabjørner i stor grad nytte den australske økonomien gjennom turisme (NSW Office of Environment and Heritage 2018). Et anslag tyder på at Koala relatert turisme har generert ca 9 000 arbeidsplasser og bidrar mellom $1,1 og $2 500 000 000 til økonomien (NSW Office of Environment og Heritage 2018). Fjerning av en Art har potensial til å bli katastrofale, og kan sees i jevn nedgang på Native Australian Wildlife⁶. I tillegg vil Australia økonomien føler konsekvenser hvis populasjoner av australske koalabjørner fortsetter å avta på den hastigheten de er⁶.

Det er antydet at utbredelsen av død og sykdom som svar på habitat fragmentering er et resultat av kronisk stress⁸. Allerede har tjuefire marsupial arter blitt erklært utryddet i Australia på grunn av habitat fragmentering, med koalabjørner etter en lignende trend⁸. Kompleksiteten av habitat fragmentering og biologiske systemer er synergi, men kan pakkes ut gjennom analyse av stress respons⁶. Generelt aktiverer enhver forstyrrelse i et dyr naturlige omgivelser en kompleks kaskade av neurohormonal hendelser, kjent som en “fight or flight” respons^9,10. Dette svaret på stress er en prosess som begynner i hjernen der hypothalamus-hypofysen-adrenal (HPA) aksen er aktivert¹¹. En del av hjernen kalles hypothalamus utgivelser corticotrophin-lanserer Hormone (CRH), som deretter signaliserer fremre hypofysen til å løslate adrenocorticotrophic Hormone (ACTH)¹¹. Dette i sin tur stimulerer glukokortikoid sekresjon fra binyrene forlengede. Kroppen sirkulerer glukokortikoider gjennom blodet, som viderekobling lagring av glukose fra glykogen og mobiliserer glukose fra lagret glykogen¹¹. Dette kaskade av neurohormonal hendelser er responsen som brukes av dyret til å håndtere uforutsigbare stimuli¹¹. Imidlertid, når glukokortikoider slippes og være opphøyet for en lengre periode av tid, det dyr er betraktet som å bli erfaring kronisk anstrengelse^12,13. Denne prosessen innebærer viderekobling energi bort fra andre fysisk kroppsfunksjoner, som det er nødvendig for pågående glukokortikoid produksjon¹³. Som et resultat, kronisk stress kan forby vekst, reproduksjon og immunitet, alle er viktige fitness egenskaper som kreves for overlevelse¹⁴.

Måler en dyrene ‘ glukokortikoid produksjon er en vanlig indikatoren anvendt å avgjøre hvorvidt eller ikke det dyr er erfaring fysiologisk trykk¹⁵. For å gjøre dette, kan glukokortikoider måles i blodplasma, serum, spytt, urin eller avføring¹⁶. Imidlertid tyder tyder på at håret er en mye mer effektiv indikator på kronisk stress, i motsetning til de nevnte¹⁶. Dette er fordi håret er antatt å innlemme blod-borne hormoner i sin vekstfase; Det er relativt stabilt; og eventuelle kortisol oppdaget i håret reflekterer fysiologisk stress oppleves over perioden av hårvekst, som kan være uker gjennom til måneder¹⁶. Videre bør enhver samling av kortisol være ikke-invasiv for å minimere stress forbundet med fangst og håndtering¹⁶. Men noe stress opplevde i løpet av denne hendelsen ville ikke påvirke glukokortikoid nivåer i håret¹⁶. Det har vært mange studier som utforsker ferdighet av å bruke håret til å måle langsiktige stress i en rekke dyr, og inkluderer studier på reinsdyr, grizzly bjørner, rhesus aper, muskoxen, og brune bjørner^{17,18, 19} andre priser ^{, 20} priser og ^{, 21}. Hair kortisol er vanligvis ekstrahert ved først å vaske prøven for å sikre svette og sebum-avledet kortisol avsatt på overflaten av håret er ikke co-ekstrahert med kortisol og deretter pulverizing prøven i en perle-visp²². Etter vask må prøven tørkes for å sikre fullstendig fordampning²². Til slutt, ved hjelp av et løsemiddel, kan prøven trekkes ut og rekonstituert å lette analysen av kortisol²². Den vanligste løsemiddel som brukes til å trekke ut kortisol fra pels er metanol^21,23; Det er imidlertid noen studier som bruker etanol og isopropanol i sine kortisol utvinning teknikker. For eksempel, en studie som brukte etanol var vellykket for utpakking av kortisol fra humant fostervann væske²⁴. I tillegg en studie som brukte isopropanol var vellykket for utpakking av kortisol fra menneskehår og negler^25,26. Av denne grunn, denne studien testet alle tre løsningsmidler (metanol, etanol, og isopropanol) for å finne ut hvilke som var mest vellykket for ekstraksjon av kortisol fra prøver av Koala pels.

Det primære målet med denne studien var å bruke dagens teknikker for å validere en optimal hormon utvinning teknikk som skal brukes som en ikke-invasiv måling av kortisol fra Koala pels. Dette ble oppnådd ved å teste tre avsugs løsemidler (metanol, etanol og isopropanol). Vi hypotetisk gjennomsnitt at metanol vil være den optimale løsemiddel som brukes for utpakking av kortisol fra Koala pels fordi det er den anbefalte løsningsmiddel for ekstraksjon av Arbor analysen kortisol kits²⁷.