JoVE Journal > Environment
Summary
Abstract
Introduction
Protocol
Resultados
Discussion
Declarações
Acknowledgements
Materials
Referências
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
Ambiente

Aspergillus flavus büyüme ve transgenik Mısır ifade α-amilaz inhibitörü Lablab purpureus L. gelen aflatoksin üretim inhibisyonu

Published: February 15, 2019
doi:
10.3791/59169
, , , ,
1Southern Regional Research Center,USDA-ARS, Food and Feed Safety Research Unit, 2Department of Plant Pathology,University of Arkansas

Summary

Aspergillus flavus büyüme ve aflatoksin üretim mısır çekirdekleri antifungal bir protein ifade içinde analiz etmek için bir iletişim kuralı mevcut burada.  A. flavus GFP ifade etmek zor kullanarak biz izlenen enfeksiyon ve gerçek zamanlı olarak olgun çekirdekleri içinde mantar yayılmasını. Tahlil hızlı, güvenilir ve tekrarlanabilir.

Abstract

Aflatoksin kontaminasyonu gıda ve yem bitkileri dünya çapında büyük bir sorun olduğunu. Mısır ve diğer petrol zengin bitkileri yanı sıra insan ve hayvan sağlığı için ciddi tehdit poz fıstık gibi kırpma değeri önemli ölçüde azaltmak güçlü kanserojen aflatoksin, mantar Aspergillus flavus (A. flavus) tarafından üretilen vardır. Geleneksel ıslah, direnç ilişkili protein ve RNA müdahale (RNAi) transgenik ifadesi de dahil olmak üzere farklı yaklaşımlar-ana bilgisayar kaynaklı gene kritik A. flavus susturmak dayalı gen hedefleri, değerlendirilir artırmak için aflatoksin direnç duyarlı bitkileri. Son çalışmalar α-amilaz A. flavus patogenez ve aflatoksin üretim, bu gen/enzim düşündüren önemli bir rol A. flavus büyüme ve aflatoksin üretim azaltmak için potansiyel bir hedeftir göstermiştir. Bu bağlamda çalışmada Mısır A. flavuskarşı bir Lablab purpureus L. α-amilaz inhibitörü benzeri protein (AILP) kapaklı ifade (altında bünye CaMV 35S organizatörü kontrolünü) değerlendirmek için yapılmıştır. AILP hangi A. flavus α-amilaz enziminin bir rekabetçi inhibitörü ve lektin-arcelin-α-amilaz inhibitörü protein ailesine ortak fasulye ait bir 36-kDa proteindir. İn vitro çalışmalar mevcut iş önce AILP rolünde inhibisyon A. flavus α-amilaz aktivitesi ve mantar büyüme gösterdi. Mantar büyüme ve olgun çekirdekleri aflatoksin üretim A. flavus GFP ifade etmek zor kullanarak gerçek zamanlı olarak takip. Bu çekirdek tahlil (KSA) eleme kurmak basit ve güvenilir ve tekrarlanabilir veri enfeksiyon ve sayısal yaymak ölçüde Pangenez ve transgenik hatları değerlendirme için sağlar. Floresans GFP zorlanma mantar için yakından ilişkili büyüme ve uzatma tarafından aflatoksin değerleri için iyi ilişkili.  Bu ön bilgi aflatoksin direncini artırmak için Mısır gibi ticari açıdan önemli bir ürün uygulamak için mevcut iş amacı oldu. Bizim sonuçları hangi, sırayla, aflatoksin düzeyleri %62-%88 azalma tercüme AILP ifade transgenik mısır çekirdekleri A. flavus büyüme % 35-%72 azalma gösterir.

Introduction

Mikotoksin kirlenme mantar Azomonas, Aspergillus Fusarium, Penicilliumve Alternaria tarafından gıda büyük bir sorundur ve yem bitkileri yetiştirilen dünya çapında1,2,3. Bu pitopatojenik mantarlar arasında Aspergillus kırpma değeri ve insan ve hayvan sağlığı en fazla olumsuz etkiye sahiptir. Aspergillus flavus (A. flavus) Mısır, pamuk ve fıstık gibi petrol zengin bitkileri bozar ve güçlü kanserojen, aflatoksin yanı sıra çok sayıda toksik ikincil metabolit (SMs) üreten bir fırsatçı bitki patojeni var. Mısır önemli bir besindir ve dünya çapında yetiştirilen bitki besleme ve kirlenme A. flavustarafından son derece duyarlı olduğunu. Aflatoksin kirlenme üzerinde ekonomik etkisini kaybeder ve Mısır düşük değeri olarak 686.6 milyon dolar/yıl ABD2 öngörülen değişiklikler ile küresel iklim olabilir, aflatoksin etkisi Mısır ile daha büyük ekonomik kayıplara neden olabilir tahmini olarak 1.68 Milyar dolar/çevre gelecek2yılda yüksek. İnsan ve hayvan aflatoksin olumsuz ekonomik ve sağlık etkileri göz önüne alındığında, Mısır denetiminde öncesi hasat aflatoksin gıda aflatoksin kirlenmesini önlemek ve yem ürünleri için en etkili yolu olabilir.

Saat4önemli miktarda gerektiren öncelikle üreme yoluyla, yoğun son birkaç on yıl içinde kullanılan Mısır aflatoksin direniş için büyük öncesi hasat denetim yaklaşımdır. Son zamanlarda, biyolojik büyük ölçekli alan uygulamaları5,6‘ aflatoksin azaltma içinde bazı başarı elde etti. Biyolojik yanı sıra, uygulama ‘Ana bilgisayar indüklenen Gene susturmak’ RNAi aracılığıyla (HIGS) gibi son teknoloji moleküler araçlarından ve direnç ilişkili proteinlerin transgenik ifade A. flavus büyüme ve aflatoksin azaltılması bazı başarı olmuştur üretim ise küçük ölçekli laboratuvar ve alan çalışmaları. Bu yaklaşımların Şu anda gelecekteki manipülasyon için yeni potansiyel A. flavus gen hedefler belirlenmesi ek olarak optimize edilmiş.

Doğrudan transgenik kontrol stratejilerinin potansiyel hedefleri olarak mikotoksin üretimi söz konusu genlerin yanı sıra mantar amylases erken aşamalarında başarılı patogenez ve mikotoksin üretimi korumak kritik bir rol oynamaktadır gösterilmiştir Ana bilgisayar bitki enfeksiyonu. Pythium pleroticum (zencefil köksap rot nedensel Ajan), birkaç örnekler nerede patojenitesi ve α-amilaz ifade ve aktivite arasında pozitif korelasyon gözlendi Fusarium solani (karnabahar solgunluk nedensel Ajan), 7,8. α-amilaz etkinliği gen nakavt veya devirme yaklaşımlar ile inhibisyonu mantar büyüme ve toksin üretimi olumsuz yönde etkiler. Bir α-amilaz nakavt mutant A. flavus ve nişasta substrat veya degermed mısır çekirdekleri9tarihinde yetiştirilen aflatoksin üretmek bulamadı. Benzer şekilde, Fusarium verticillioides içinde bir α-amilaz nakavt zorlanma fumonisin B1 (mikotoksin) Mısır çekirdekleri10enfeksiyon sırasında üretmek başarısız oldu. Daha yeni bir çalışmada, Gilbert ve ark. (2018) bir RNAi tabanlı yıkmak A. flavus α-amilaz ifade HIGS aracılığıyla A. flavus büyüme ve aflatoksin üretim sırasında Mısır çekirdek enfeksiyon11 azaltılacağını gösterdi .

α-amilaz faaliyet belirli inhibitörleri de aşağı-Yönetmeliğin α-amilaz ifade elde gibi benzer sonuçlar doğurmuştur. 14-kDa tripsin-α-amilaz inhibitörü Mısır satırlarından A. flavus12‘ ye dayanıklı malzemelerin yalıtım ve mantar direnç bir α-amilaz inhibitörü olan rolüne ilk rapor geldi. Daha fazla Fakhoury ve Woloshuk bir 36-kDa α-amilaz inhibitörü benzeri protein (AILP) tanımlaması liderliğindeki tarafından bitki türlerinin birkaç yüz sümbül fasulye, Lablab purpureus L.13taneleri tarama. Lektin-arcelin-α-amilaz inhibitörü ailesine ait AILP andıran lektinlerinin peptit dizisi ortak fasulye14,15bildirdi. Saf AILP memeli tripsin ve daha fazla tüp bebek karakterizasyonu A. flavus büyüme ve conidial çimlenme13önemli inhibisyonu gösterdi doğru inhibitör herhangi bir faaliyet göstermez. Sunulan raporları burada açıkça gösterir α-amilaz hedef patojenler veya nişasta seferberlik (α-amilaz faaliyetleri ile) bağlı çözünür şekerler edinimi sırasında bir enerji kaynağı olarak zararlıları sınırlamak için denetim yaklaşımlar olarak hizmet edebilir onların Ana tesisleri ile patojenik etkileşim.

Alfa-amilaz A. flavus patojenitesi9,10,11ve olarak güçlü bir anti-A. flavus Ajan (α-amilaz inhibisyon/antigrowth)13AILP önemini göz önüne alındığında kritik olduğu bilinmektedir, transgenik mısır bitkileri Lablab AILP ifade oluşturulan gen bünye CaMV 35S organizatörü altında. Mısır bu α-amilaz inhibitörü Contegra ifade A. flavus patogenez ve aflatoksin üretim Mısır çekirdek enfeksiyon sırasında karşı etkili olup olmadığını araştırmak için hedefi oldu. Bizim sonuçlar önemli ölçüde AILP ifade transgenik mısır çekirdekleri A. flavus büyüme ve aflatoksin üretim çekirdek enfeksiyon sırasında azaltılmış gösterilmektedir.

Protocol

1. plazmid yapıları ve Mısır dönüştürme PCR yükseltmek Lablab AILP 5′-TATCTAGAACTAGTGATTACCATGGCTCC-3 ‘ve 5′-ATACTGCAGGATTGCATGCAGAGTAGTACTG-3’ primerler kullanılarak ekleme. PCR koşullar bir ilk denatürasyon adım 30 98 ° C’de yer denatürasyon 10 98 ° C’de tarafından takip s (adım 1), s (adım 2), 30 55 ° C’de tavlama s (adım 3), 20 72 ° C uzama s (adım 4), adım 2 ile adım 4 31 döngüleri , ve son bir uzama adım 5 dk. değiştirilmiş pCAMBIA 1300 PCR üründe vektör Xba<…

Representative Results

Mısır dönüştürme ve Transgenik bitkilerin moleküler tarama Mısır Hi-II satırlarının olgunlaşmamış embriyo Lablab purpureus AILP gen CaMV 35S kontrol altında ifade son bitki hedef vektör içeren Agrobacterium tumefaciens EHA101 zorlanma kullanılarak dönüştürülen organizatörü. Beş bağımsız olarak dönüştürülmüş Mısır satır T6 nesil sonraki ?…

Discussion

Verim kayıp patojenler ve zararlıları nedeniyle tarımsal ürün içinde küresel bir sorun20olduğunu. Şu anda, uygulama sentetik mantar ilaçları ve böcek ilaçları kontrol bitki patojenleri ve zararlıları için baskın anlamına gelir, ama bu biochemicals gıda ve yem içinde kalan toksisitesi insan ve hayvan sağlık21için ciddi bir tehdit oluşturabilir. Gıda ve yem kırpma olarak Mısır ekonomik önemi göz önüne alındığında, azalma veya aflatoksin k…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

David Meints, Arkansas Üniversitesi geliştirilmesi ve transgenik Mısır sırasında erken nesiller analiz onun yardım için teşekkür ederiz. Bu eser USDA-ARS CRIS proje 6054-42000-025-00D mali destek aldı. Ticari adlar veya ticari ürünler bu makalede söz yalnızca belirli bilgileri sağlamak amacıyla ve tavsiye veya bize Tarım Bakanlığı tarafından onaylandığı anlamına gelmez. USDA-ARS eşit istihdam fırsatı (EEO) ilkesi fırsat eşitliği için tüm kişilerin görev ve Ajans’ın personel politikaları, uygulamalar ve işlemler her yönüyle ayrımcılığı yasaklar.

Materials

Agar Caisson
Amazing Marine Goop Eclectic Products
C1000 Touch CFX96 Real-Time System Bio-Rad
Corning Falcon Tissue Culture Dishes, 60 mm Fisher Scientific 08-772F
Eppendorf 5424 Microcentrifuge Fisher Scientific
Erlenmeyer flask with stopper, 50 mL Ace Glass 6999-10
Ethanol
FluoroQuant Afla Romer Labs COKFA1010
Fluted Qualitative Filter Paper Circles, 15 cm Fisher Scientific 09-790-14E
Force Air Oven VWR
FQ-Reader Romer Labs EQFFM3010
Geno/Grinder 2010 OPS Diagnostics SP 2010-115
Innova 44 Incubator Shaker Brunswick Scientific
iScript cDNA Synthesis Kit Bio-Rad 1708890
liquid Nitrogen
Low Form Griffin Beakers, 100 mL DKW Life Sciences 14000-100
Methanol
Methylene Chloride
Nexttec 1-step DNA Isolation Kit for Plants Nexttec 47N
Nikon Eclipse E600 microscope with Nikon DS-Qi1 camera Nikon
Nikon SMZ25 stereomicroscope with C-HGFI Episcopic Illuminator and Andor Zyla 4.2 sCMOS camera Nikon
Nunc Square BioAssay Dishes ThermoFisher Scientific 240835
Phire Plant Direct PCR Kit ThermoFisher Scientific F130WH
Polycarbonate Vials, 15 ml OPS Diagnostics PCRV 15-100-23
Potato Dextrose Broth
Snap Cap, 22 mm DKW Life Sciences 242612
Sodium Phosphate dibasic heptahydrate Sigma-Aldrich
Sodium Phosphate monobasic Sigma-Aldrich
Spectrum Plant Total RNA Kit Sigma-Aldrich STRN50
Stainless Steel Grinding Balls, 3/8'' OPS Diagnostics GBSS 375-1000-02
Stir Plate
Synergy 4 Fluorometer Biotek
T100 Thermal Cycler Bio-Rad
Triton X-100 Sigma-Aldrich T-9284
V8 juice Campbell's
Whatman Qualitative Grade Plain Sheets, Grade 3 Fisher Scientific 09-820P
Wrist-Action Shaker Burrell Scientific
DOWNLOAD MATERIALS LIST

Referências

  1. Ismaiel, A., Papenbrock, J. Mycotoxins: Producing fungi and mechanisms of phytotoxicity. Agriculture. 5 (3), 492-537 (2015).
  2. Mitchell, N., Bowers, E., Hurburgh, C., Wu, F. Potential economic losses to the USA corn industry from aflatoxin contamination. Food Additives & Contaminants: Part A. 33 (3), 540-550 (2016).
  3. Umesha, S., Manukumar, H. M., Chandrasekhar, B., Shivakumara, P., Shiva Kumar, J., Raghava, S., Avinash, P., Shirin, M., Bharathi, T. R., Rajini, S. B., Nandhini, M., Vinaya Rani, G., Shobha, M., Prakash, H. S. Aflatoxins and food pathogens: Impact of biologically active aflatoxins and their control strategies. Journal of the Science of Food and Agriculture. , (2016).
  4. Brown, R. L., Menkir, A., Chen, Z. Y., Bhatnagar, D., Yu, J., Yao, H., Cleveland, T. E. Breeding aflatoxin-resistant maize lines using recent advances in technologies – a review. Food Additives & Contaminants – Part A Chemistry, Analysis, Control, Exposure & Risk Assessment. 30 (8), 1382-1391 (2013).
  5. Abbas, H., Accinelli, C., Shier, W. T. Biological control of aflatoxin contamination in U.S. crops and the use of bioplastic formulations of Aspergillus flavus biocontrol strains to optimize application strategies. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 65, 7081-7087 (2017).
  6. Udomkun, P., Wiredu, A. N., Nagle, M., Müller, J., Vanlauwe, B., Bandyopadhyay, R. Innovative technologies to manage aflatoxins in foods and feeds and the profitability of application – A review. Food Control. 76, 127-138 (2017).
  7. Dohroo, N. P., Bhardwaj, S. S., Shyram, K. R. Amylase and invertase activity as influenced by Pythium pleroticum causing rhizome rot of ginger. Plant Disease Research. 2, 106-107 (1987).
  8. Singh, R., Saxena, V. S., Singh, R. Pectinolytic, cellulolytic, amylase and protease production by three isolates of Fusarium solani variable in their virulence. Indian Journal of Mycology and Plant Pathology. 19, 22-29 (1989).
  9. Fakhoury, A. M., Woloshuk, C. P. Amy1, the α-amylase gene of Aspergillus flavus: Involvement in aflatoxin biosynthesis in maize kernels. Phytopathology. 89 (10), 908-914 (1999).
  10. Bluhm, B. H., Woloshuk, C. P. Amylopectin induces Fumonisin B1 production by Fusarium verticillioides during colonization of maize kernels. Molecular Plant-Microbe Interactions. 18 (12), 1333-1339 (2005).
  11. Gilbert, M. K., Majumdar, R., Rajasekaran, K., Chen, Z. Y., Wei, Q., Sickler, C. M., Lebar, M. D., Cary, J. W., Frame, B. R., Wang, K. RNA interference-based silencing of the a-amylase (amy1) gene in Aspergillus flavus decreases fungal growth and aflatoxin production in maize kernels. Planta. 247 (6), 1465-1473 (2018).
  12. Chen, Z. Y., Brown, R. L., Russin, J. S., Lax, A. R., Cleveland, T. E. A corn trypsin inhibitor with antifungal activity inhibits Aspergillus flavus α-amylase. Phytopathology. 89 (18944733), 902-907 (1999).
  13. Fakhoury, A. M., Woloshuk, C. P. Inhibition of growth of Aspergillus flavus and fungal α-amylases by a lectin-like protein from Lablab purpureus. Molecular Plant-Microbe Interactions. 14 (8), 955-961 (2001).
  14. Mirkov, T. E., Wahlstrom, J. M., Hagiwara, K., Finardi-Filho, F., Kjemtrup, S., Chrispeels, M. J. Evolutionary relationships among proteins in the phytohemagglutinin-arcelin-a-amylase inhibitor family of the common bean and its relatives. Plant Molecular Biology. 26 (4), 1103-1113 (1994).
  15. Kim, Y. H., Woloshuk, C. P., Cho, E. H., Bae, J. M., Song, Y. S., Huh, G. H. Cloning and functional expression of the gene encoding an inhibitor against Aspergillus flavus a-amylase, a novel seed lectin from Lablab purpureus (Dolichos lablab). Plant Cell Reports. 26 (4), 395-405 (2007).
  16. Frame, B., Main, M., Schick, R., Wang, K., Thorpe, T. A., Yeung, E. C. Ch. 22. Plant Embryo Culture. 710, 327-341 (2011).
  17. Rajasekaran, K., Sickler, C. M., Brown, R. L., Cary, J. W., Bhatnagar, D. Evaluation of resistance to aflatoxin contamination in kernels of maize genotypes using a GFP-expressing Aspergillus flavus strain. World Mycotoxin Journal. 6 (2), 151-158 (2013).
  18. Rajasekaran, K., Sayler, R. J., Sickler, C. M., Majumdar, R., Jaynes, J. M., Cary, J. W. Control of Aspergillus flavus growth and aflatoxin production in transgenic maize kernels expressing a tachyplesin-derived synthetic peptide, AGM182. Plant Science. , 150-156 (2018).
  19. Shu, X., Livingston, D. P., Franks, R. G., Boston, R. S., Woloshuk, C. P., Payne, G. A. Tissue-specific gene expression in maize seeds during colonization by Aspergillus flavus and Fusarium verticillioides. Molecular Plant Pathology. 16 (4), 662-674 (2015).
  20. Savary, S., Ficke, A., Aubertot, J. -. N., Hollier, C. Crop losses due to diseases and their implications for global food production losses and food security. Food Security. 4, 519-537 (2012).
  21. Damalas, C. A., Eleftherohorinos, I. G. Pesticide exposure, safety issues, and risk assessment indicators. International Journal of Environmental Research and Public Health. 8 (5), 1402-1419 (2011).
  22. Kowalska, A., Walkiewicz, K., Kozieł, P., Muc-Wierzgoń, M. Aflatoxins: Characterisitcs and impact on human health. Postępy Higieny i Medycyny Doświadczalnej (Online). 71, 315-327 (2017).
  23. Rajasekaran, K., Cary, J. W., Cotty, P. J., Cleveland, T. E. Development of a GFP-expressing Aspergillus flavus strain to study fungal invasion, colonization, and resistance in cottonseed. Mycopathologia. 165 (2), 89-97 (2008).
  24. Punt, P., Dingemanse, M. A., Kuyvenhoven, A., Soede, R. D., Pouwels, P. H., van den Hondel, C. A. Functional elements in the promoter region of the Aspergillus nidulans gpdA gene encoding glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Gene. 93 (1), 101-109 (1990).
  25. Lee, L. W., Chiou, C. H., Klomparens, K. L., Cary, J. W., Linz, J. E. Subcellular localization of aflatoxin biosynthetic enzymes Nor-1, Ver-1, and OmtA in time-dependent fractionated colonies of Aspergillus parasiticus. Archives of Microbiology. 181 (3), 204-214 (2004).
  26. Bhatnagar, D., Cary, J. W., Ehrlich, K., Yu, J., Cleveland, T. E. Understanding the genetics of regulation of aflatoxin production and Aspergillus flavus development. Mycopathologia. 162, 155-166 (2006).
  27. Williams, W. P., Krakowsky, M. D., Scully, B. T., Brown, R. L., Menkir, A., Warburton, M. L., Windham, G. L. Identifying and developing maize germplasm with resistance to accumulation of aflatoxins. World Mycotoxin Journal. 8 (2), 193-209 (2015).
  28. Broekaert, W. F., van Parijs, J., Leyns, F., Joos, H., Peumans, W. J. A chitin-binding lectin from stinging nettle rhizomes with antifungal properties. Science. 245 (4922), 1100-1102 (1989).
  29. Vanparijs, J., Broekaert, W. F., Goldstein, I. J., Peumans, W. J. Hevein-an antifungal protein from rubber-tree (Hevea brasiliensis) latex. Planta. 183, 258-264 (1991).
  30. Gozia, O., Ciopraga, J., Bentia, T., Lungu, M., Zamfirescu, I., Tudor, R., Roseanu, A., Nitu, F. Antifungal properties of lectin and new chitinases from potato tubers. Comptes Rendus de l’Academie des Sciences – Series III. 316 (8), 788-792 (1993).
  31. Wisessing, A., Choowongkomon, K. Amylase inhibitors in plants: Structures, Functions and Applications. Functional Plant Science and Biotechnology. 6 (1), 31-41 (2012).
  32. Tyagi, B., Trivedi, N., Dubey, A. a-amylase inhibitor: A compelling plant defense mechanism against insect/pests. Environment & Ecology. 32 (3), 995-999 (2014).
  33. Powers, J. R., Culbertson, J. D. In vitro effect of bean amylase inhibitor on insect amylases. Journal of Food Protection. 45, 655-657 (1982).
  34. Gatehouse, A. M. R., Fenton, K. A., Jepson, I., Pavey, D. J. The effects of a-amylase inhibitors on insect storage pests: Inhibition of a-amylase in vitro and effects on development in vivo. Journal of the Science of Food and Agriculture. 37, 727-734 (1986).
  35. Blanco-Labra, A., Chagolla-Lopez, A., Martinez-Gallardo, N., Valdes-Rodriguez, S. Further characterization of the 12-kDa protease a-amylase inhibitor present in maize seeds. Journal of Food Biochemistry. 19, 27-41 (1995).
  36. Abdollahi, A., Buchanan, R. L. Regulation of aflatoxin biosynthesis: Induction of aflatoxin production by various carbohydrates. Journal of Food Science. 46, 633-635 (1981).
  37. Liu, J., Sun, L., Zhang, N., Zhang, J., Guo, J., Li, C., Rajput, S. A., Qi, D. Effects of nutrients in substrates of different grains on aflatoxin B1 production by Aspergillus flavus. BioMed Research International. 2016, (2016).
  38. Uppala, S. S., Bowen, K. L., Woods, F. M. Pre-harvest aflatoxin contamination and soluble sugars of peanut. Peanut Science. 40 (1), 40-51 (2013).

Tags

Aspergillus FlavusAflatoxinMaizeTransgenicα-amylase InhibitorLablab PurpureusKernel Screening AssayGreen Fluorescent ProteinFungal InfectionAntifungal Properties

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
Citar este artigo
Rajasekaran, K., Sayler, R. J., Majumdar, R., Sickler, C. M., Cary, J. W. Inhibition of Aspergillus flavus Growth and Aflatoxin Production in Transgenic Maize Expressing the α-amylase Inhibitor from Lablab purpureus L.. J. Vis. Exp. (144), e59169, doi:10.3791/59169 (2019).
Baixar citação
Reimpressões e Permissões

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image