Aislamiento y la transferencia adoptiva de sal alta tratan células dendríticas presentadoras de antígenos

Exceso de sal dietético es un factor de riesgo para la hipertensión. ^{1 , 2} la Asociación Americana del corazón recomienda un máximo de 2.300 miligramos (mg) de ingesta de sodio (Na⁺) por día, sin embargo; menos del 10% de la población de Estados Unidos observa esta recomendación. ^{3 , 4} reducciones moderadas en la ingesta de Na⁺ bajan la presión arterial y reducen los nuevos casos anuales de enfermedad coronaria y accidente cerebrovascular en los Estados Unidos en un 20%. ⁵ un gran problema con el consumo excesivo de sal es que 50% de la población hipertensa presenta sensibilidad a la sal, definida como un aumento de 10 mmHg en la presión arterial tras Na^{Na+ carga o una caída similar en la presión arterial +} la diuresis y restricción. ⁶ sensibilidad a la sal también se produce en el 25% de los individuos normotensos y es un predictor independiente de muerte y eventos cardiovasculares. ^{7 , 8} mecanismos de detección de sal en la hipertensión con el riñón han sido bien estudiados; sin embargo, estudios recientes sugieren que las células inmunes pueden sentir Na⁺. ^{9 , 10}

La evidencia reciente sugiere que cambios en extra renal Na⁺ manipulación pueden causar acumulación de Na⁺ en el intersticio y promover la inflamación. ^{11 , 12} nuestro laboratorio y otros han demostrado que las células del sistema inmunitario tanto innato y adaptativo contribuyen a la exacerbación de la hipertensión arterial. ^{9 , 13 , 14 , 15} varios estímulos de hipertensos, como la angiotensina II, norepinefrina y causa sal macrófagos, monocitos y linfocitos T que infiltran el riñón y vasculatura y promover la retención de Na⁺ , vasoconstricción, hipertensión elevación y daño de órganos. ^{9 , 16 , 17 , 18 , 19 , 20} en estudios anteriores, encontramos que los DCs acumulan isolevuglandin (IsoLG)-proteína aductos en respuesta a diversos estímulos de hipertensos incluyendo angiotensina II e DOCA sal hipertensión. ¹⁴ IsoLGs son altamente reactivos productos de peroxidación lipídica que rápidamente y covalente aducción a lisinas en proteínas y su acumulación se asocia con la activación de la DC. ¹⁴ recientemente hemos establecido que elevado Na⁺ es un estímulo potente para la proteína IsoLG aducción formación murine DCs.⁹ Na⁺ entrar DCs es mediada por transportadores sensible amilorida. Na⁺ entonces se intercambia para el calcio (Ca^{2 +}) vía el /Ca^{2 +} intercambiador de Na⁺. CA^{2 +} activa la proteína quinasa C (PKC) que activa la NADPH oxidasa lleva a mayor superóxido (O₂^{· –}) y proteína IsoLG aducción formación. ⁹ transferencia adoptiva de hipertensión de primos de DCs sal expuestos en respuesta a una dosis sub-presor de la angiotensina II. ⁹

Identificación de CD11c⁺ DCs de tejidos ha sido previamente limitada a la inmunohistoquímica y RT-PCR y aislamiento de DCs se ha limitado a ordenar por citometría de flujo de la célula. Aunque flujo citometría celular clasificación es un método eficaz para el aislamiento de las células inmunes, es costoso, desperdiciador de tiempo y conduce a una baja producción de células viables. Por lo tanto, nos hemos optimizado un protocolo paso a paso para la digestión de tejido, estimulación in vitro y transferencia adoptiva de CD11c⁺ DCs para el estudio de la hipertensión.