उपंयास वस्तु मांयता और वस्तु स्थान एक बजट पर चूहों में व्यवहार परीक्षण
Summary
यहां हम एक प्रोटोकॉल है जो murine वस्तु स्थान और उपंयास वस्तु मांयता व्यवहार परीक्षण के किफायती स्थापना के लिए व्यापक निर्देश शामिल है प्रदान करते हैं, डिजाइन, लागत सहित, और आवश्यक उपकरणों के निर्माण के साथ ही व्यवहार परीक्षण, डेटा संग्रह, और विश्लेषण का निष्पादन ।
Abstract
Ethologically प्रासंगिक व्यवहार परीक्षण विभिंन शारीरिक या रोग परिवर्तन के संज्ञानात्मक प्रभाव का अध्ययन करने के लिए माउस मॉडलों का उपयोग करता है कि किसी भी अध्ययन के एक महत्वपूर्ण घटक है । वस्तु स्थान कार्य (OLT) और उपंयास वस्तु मांयता कार्य (NORT) सामांयतः दो प्रभावी व्यवहार कार्यों को आमतौर पर समारोह और विशिष्ट मस्तिष्क स्मृति में शामिल क्षेत्रों के सापेक्ष स्वास्थ्य प्रकट किया जाता है । हालांकि इन परीक्षणों के दोनों नवीनता के लिए चूहों के निहित वरीयता शोषण पहले वस्तुओं का सामना करना पड़ा के लिए स्मृति प्रकट करने के लिए, OLT मुख्य रूप से स्थानिक सीखने, जो हिप्पोकैम्पस गतिविधि पर भारी निर्भर करता है मूल्यांकन करता है । NORT, इसके विपरीत, गैर-स्थानिक वस्तु की पहचान है, जो कई मस्तिष्क क्षेत्रों पर निर्भर करता है सीखने का मूल्यांकन करता है । दोनों कार्यों के एक खुले क्षेत्र परीक्षण के क्षेत्र की आवश्यकता, चूहों को समकक्ष आंतरिक मूल्य के साथ वस्तुओं, उचित पर्यावरण cues, और वीडियो रिकॉर्डिंग उपकरण और सॉफ्टवेयर । व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रणालियों, जबकि सुविधाजनक, महंगा हो सकता है । इस पांडुलिपि विवरण के क्षेत्र के निर्माण और OLT और NORT प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक उपकरणों की स्थापना के लिए एक सरल, लागत प्रभावी तरीका है । इसके अलावा, पांडुलिपि एक कुशल परीक्षण प्रोटोकॉल है कि दोनों OLT और NORT और डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण, साथ ही प्रतिनिधि परिणामों के लिए विशिष्ट तरीके प्रदान करता है शामिल वर्णन करता है । इन परीक्षणों के सफल समापन विभिंन माउस मॉडल प्रणालियों की स्मृति समारोह में बहुमूल्य अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकते है और अंतर्निहित तंत्रिका क्षेत्रों है कि इन कार्यों का समर्थन मूल्यांकन ।
Introduction
प्रभावी संज्ञानात्मक परीक्षण को अलग और एक नियंत्रित वातावरण में व्यवहार की जांच द्वारा विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों के तंत्रिका कार्य का आकलन1. मनुष्यों में, विशिष्ट कार्य ऐसे विस्कॉंसिन कार्ड के रूप में सामने समारोह या युग्मित एसोसिएट्स कैंब्रिज Neuropsychological परीक्षण स्वचालित बैटरी की परीक्षा के लिए छंटाई कार्य के रूप में लक्षित मस्तिष्क क्षेत्रों, के प्रदर्शन का आकलन करने के लिए डिजाइन किया गया है ( CANTAB) हिप्पोकैम्पस फ़ंक्शन के लिए2,3. इन परीक्षणों के व्यवहार का आकलन है कि उन क्षेत्रों के तंत्रिका गतिविधि से परिणाम द्वारा मनुष्यों में विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों के कार्यों का अध्ययन करने के लिए डिज़ाइन कर रहे हैं । सबसे अधिक जैव चिकित्सा अनुसंधान के अंत लक्ष्य मानव स्वास्थ्य के सुधार है; हालांकि, स्वास्थ्य या रोग में मस्तिष्क समारोह के कई अध्ययनों नैतिक रूप से मानव प्रतिभागियों के साथ प्रदर्शन नहीं किया जा सकता । अध्ययन के लिए है कि मानव प्रतिभागियों का उपयोग नहीं कर सकते, चूहों जैसे छोटे कुतर अक्सर पसंद के मॉडल हैं । माउस मॉडल का प्रयोग जीन की अभिव्यक्ति के परिवर्तन सहित प्रयोगात्मक जोड़तोड़ पर प्रत्यक्ष नियंत्रण के लिए अनुमति देता है, चोट या optogenetic तकनीक के माध्यम से सर्किट गतिविधि के भी मॉडुलन की प्रेरण । चूहों के व्यवहार का परीक्षण, मानव परीक्षण के लिए इसी तरह, व्यवहार है कि विशिष्ट क्षेत्रों पर निर्भर को मापने के द्वारा मस्तिष्क समारोह पर प्रयोगात्मक चर के प्रभाव का आकलन करना है.
हिप्पोकैम्पस मानव में स्मृति गठन के लिए एक आवश्यक संरचना है और4कुतर । अधिक विशेष रूप से, हिप्पोकैम्पस declarative संबंध प्रतिनिधित्व शामिल स्मृति में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, लेकिन प्रक्रियात्मक स्मृति है, जो4मस्तिष्क के मोटर केंद्रों पर निर्भर नहीं है । हिप्पोकैम्पस स्मृति समारोह तंत्रिका विज्ञान के कई क्षेत्रों में अध्ययन का ध्यान केंद्रित किया गया है क्योंकि यह गड़बड़ी के लिए अति संवेदनशील है । लंबे समय तक तनाव और बरामदगी और स्ट्रोक के लिए उंर बढ़ने से लेकर नकारात्मक perturbations हिप्पोकैम्पस नुकसान के साथ जुड़े रहे है5। इसके विपरीत, सकारात्मक हस्तक्षेप, जैसे सामाजिक संपर्क, भौतिक पर्यावरण संवर्धन, या व्यायाम, हिप्पोकैम्पस समारोह6,7,8में सुधार होगा । हिप्पोकैम्पस स्मृति के उचित परीक्षण के साथ कुतर अध्ययन सेलुलर और स्मृति के आणविक मध्यस्थों में अंतर्दृष्टि प्रकट कर सकते है और साथ ही हिप्पोकैम्पस समारोह पर विभिंन पर्यावरणीय हस्तक्षेप के प्रभाव ।
कुतर में, कई परीक्षणों हिप्पोकैम्पस-निर्भर सीखने और स्मृति9,10,11का अध्ययन करने के लिए विकसित किया गया है । वे मोटे तौर पर कार्य में विभाजित किया जा सकता है कि भावनात्मक प्रसार के साथ एक उत्तेजना की आवश्यकता के लिए व्यवहार में परिवर्तन लाना, और कार्य है कि कुतर वरीयता पर आकर्षित उपंयास उत्तेजनाओं11की जांच । प्रासंगिक डर कंडीशनिंग, उदाहरण के लिए, जोड़े एक अप्रिय उत्तेजना एक पर्यावरणीय संदर्भ के साथ (पैर सदमे) और फिर बाद में डर-प्रेरित ठंड व्यवहार9,11को मापने के संदर्भ के लिए स्मृति परीक्षण । मॉरिस पानी भूलभुलैया और उसके सूखे समकक्ष, बार्ंस भूलभुलैया, नकारात्मक बाहरी सुदृढीकरण का उपयोग करने के लिए स्थानिक सीखना4,11को बढ़ावा देने के । प्रत्येक मामले में, कुतर एक aversive स्थिति से बचने की तलाश, ठंडे पानी में डूबे या एक चमकीले रूप से जलाया मंच पर उजागर किया जा रहा है, क्रमशः । इसके विपरीत में रेडियल एआरएम भूलभुलैया, सकारात्मक सुदृढीकरण पर निर्भर करता है के रूप में जानवरों प्राकृतिक चारा स्थानिक स्मृति के साथ मिलकर व्यवहार का उपयोग छोटे खाद्य पुरस्कार प्राप्त करने के लिए4,11. इन कार्यों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है और हिप्पोकैम्पस स्मृति के बारे में मूलभूत ज्ञान प्राप्त है । हालांकि, नकारात्मक और सकारात्मक बाहरी सुदृढीकरण या सदमे की तरह उत्तेजना उत्प्रेरण इन व्यवहार परीक्षणों जो कुछ मामलों में अवांछनीय हो सकता है के लिए एक भावनात्मक घटक जोड़ें । उदाहरण के लिए, पृष्ठीय और ventral hippocampi विशिष्ट कार्यों के साथ जुड़े रहे हैं, स्थानिक स्मृति बनाम भावनात्मक विनियमन, क्रमशः12. परीक्षण है कि उत्तेजनाओं के लिए एक भावनात्मक प्रतिक्रिया पर निर्भर सटीक स्थानिक स्मृति को प्रतिबिंबित नहीं कर सकते है अगर ventral हिप्पोकैम्पस भावनात्मक विनियमन कार्य भी प्रभावित होते हैं ।
OLT एक सरल और प्रभावी परीक्षण है कि हिप्पोकैम्पस-निर्भर स्थानिक स्मृति13का एक उपाय प्रदान करता है । कार्य अतिरिक्त बाहरी सुदृढीकरण के बिना नवीनता के लिए एक जानवर आंतरिक वरीयता पर निर्भर करता है और इसलिए आम तौर पर अंतर भावनात्मक प्रतिक्रियाओं13के साथ जुड़े जटिलताओं से बचने कर सकते हैं । OLT के लिए वर्तमान प्रोटोकॉल चूहों के लिए प्रस्तुत किया गया है, लेकिन यह भी चूहों में प्रभावी है अगर उपकरणों के आयामों को उचित पैमाने पर कर रहे हैं । प्रोटोकॉल एक खुले क्षेत्र परीक्षण के मैदान के लिए एक माउस acclimating के होते है और फिर यह स्थानिक पर्यावरण cues के संबंध में 2 वस्तुओं की जांच करने की अनुमति । माउस तो क्षेत्र से हटा दिया है, और एक देरी के दौरान (अंतर परीक्षण अंतराल या आईटीआई), वस्तुओं में से एक ले जाया जाता है । आईटीआई के बाद, माउस के क्षेत्र को पुनः शुरू है और स्वतंत्र रूप से पता लगाने की अनुमति दी । सामांय में, चूहों नवीनता पसंद करते हैं, और अगर वे अपने प्रारंभिक प्रदर्शन से वस्तुओं के स्थान याद है, वे और अधिक समय बिताना ले जाया वस्तु की जांच करेंगे । हिप्पोकैम्पस घावों के साथ जानवरों स्थानिक प्रासंगिक सीखने बिगड़ा है और फलस्वरूप उपंयास स्थान14,15में वस्तुओं के लिए कोई प्राथमिकता प्रदर्शित करता है ।
OLT स्वतंत्र रूप से या स्मृति का एक अतिरिक्त परीक्षण है कि कई मस्तिष्क क्षेत्रों से तंत्रिका गतिविधि पर ड्रॉ के साथ संयोजन में इस्तेमाल किया जा सकता है, उपंयास वस्तु मांयता कार्य (NORT) । NORT जब तक कि एक नए स्थान पर ले जाया जा रहा है के बजाय एक वस्तुओं के एक उपंयास वस्तु से बदल दिया है, जब तक परीक्षण चरण, OLT के समान है । के रूप में OLT के साथ मामला है, वस्तुओं की अच्छी स्मृति के साथ चूहों अनायास उपंयास वस्तु की जांच पसंद करेंगे । वस्तु स्थान स्मृति, जो हिप्पोकैम्पस सब्सट्रेट पर काफी निर्भर करता है के विपरीत, वस्तु मान्यता स्मृति मस्तिष्क क्षेत्रों की एक किस्म पर भरोसा करने के लिए प्रकट होता है और हिप्पोकैम्पस की भागीदारी अस्थिर है. कई अध्ययनों से रिपोर्ट है कि हिप्पोकैम्पस घावों या निष्क्रियता को प्रभावित नहीं करते उपंयास वस्तु वरीयता10,13,16,17, जबकि अंय18,19विपरीत लगता है । तथापि, यह अभी भी एक सामांय रूप से इस्तेमाल किया काम है कुतर में जनरल मेमोरी समारोह का मूल्यांकन ।
प्रोटोकॉल यहां प्रस्तुत की शुरुआत में शामिल कदम रूपरेखा बनाती और OLT और NORT, दोनों जिनमें से एक खुले क्षेत्र परीक्षण के मैदान का उपयोग क्रियांवित । व्यावसायिक रूप से उपलब्ध व्यवहार परीक्षण उपकरण विशेष रूप से छोटे प्रयोगशालाओं के लिए लागत-निषेध, हो सकता है । इस प्रोटोकॉल डिजाइन और सरल करने के लिए कम से कम कीमत पर और विशेष उपकरणों के बिना घर में अखाड़े का निर्माण कदम भी शामिल है । इसके अलावा, इस प्रोटोकॉल आदर्श व्यवहार परीक्षण क्षेत्र, क्षेत्र, प्रासंगिक cues, और वीडियो रिकॉर्डिंग प्रणाली है कि OLT और NORT प्रोटोकॉल के कार्यांवयन के लिए मंच सेट सहित के स्थान का ब्यौरा । सफल के लिए प्रतिनिधि परिणाम के रूप में के रूप में अच्छी तरह से दोषपूर्ण अध्ययन प्रस्तुत कर रहे हैं, सभी सामग्री और प्रत्येक अध्ययन के लिए प्रक्रियाओं के अनुकूलन के महत्व पर बल ।
| विवरण | विकल्प | मात्रा |
| भाग एक: ऐक्रेलिक शीट-अपारदर्शी सफेद (०.६३५ cm x ४० cm x ४०.६४ cm) | रूट किए गए किनारों | 2 |
| भाग बी: ऐक्रेलिक शीट-अपारदर्शी सफेद (०.६३५ cm x ४० cm x ४१.९१ cm) | रूट किए गए किनारों | 2 |
| भाग सी: ऐक्रेलिक शीट-अपारदर्शी सफेद (०.६३५ cm x ४१.९१ cm x ४१.९१ cm) | रूट किए गए किनारों | 1 |
| Acryllic सीमेंट (1 pt.) | ना | 1 |
| 16 गेज Hypo Applicator | ना | 1 |
| संयोजन स्क्वायर | ना | 1 |
| HD वेब कैमरा | ना | 1 |
| वीडियो कैप्चर सॉफ्टवेयर | ना | 1 |
| यूएसबी २.० एक्सटेंशन केबल | ना | 1 |
| केबल नाली | ना | 1 |
तालिका 1: सामग्री और व्यवहार परीक्षण के लिए आवश्यक उपकरणों की मद सूची ।
Protocol
Representative Results
Discussion
यह प्रोटोकॉल चूहों में वस्तु स्थान और उपन्यास वस्तु मान्यता व्यवहार परीक्षण आचरण करने के लिए एक लागत प्रभावी विधि प्रदान करता है. ये परीक्षण हिप्पोकैम्पस फ़ंक्शन के मूल्यांकन के साथ ही अन्य cortical क्षेत्रों के फ़ंक्शन को सक्षम करते हैं, जैसे कि आकडे प्रांतस्था, ऑब्जेक्ट मान्यता10में शामिल. OLT और NORT मजबूत भावनात्मक प्रसार है कि मॉरिस पानी भूलभुलैया, प्रासंगिक डर कंडीशनिंग, बार्ंस भूलभुलैया या रेडियल हाथ भूलभुलैया के लिए आवश्यक है के साथ उत्तेजनाओं से बचने का लाभ है । वे भी खाद्य अभाव के लिए आवश्यकता के रूप में रेडियल हाथ भूलभुलैया के लिए आवश्यक से बचने । इसके अलावा, इस प्रोटोकॉल का वर्णन एक साधारण दो दिन परीक्षण प्रक्रिया है कि निष्पादन या विश्लेषण के लिए व्यापक या जटिल उपकरण की आवश्यकता नहीं है । इन कार्यों का एक नुकसान यह है कि वे सीखने या अधिग्रहण के उपायों के लिए अनुमति नहीं है । नवीनता की जांच में एक अंतर प्रशिक्षण के दौरान वस्तुओं के बारे में सीखने गरीब, क्या सीखा या दोनों के लिए गरीब स्मृति के कारण हो सकता है । कुल समय वस्तुओं की जांच खर्च बाहर अंवेषण ड्राइव में किसी भी अंतर्निहित अंतर सत्तारूढ़ के लिए एक महत्वपूर्ण उपाय है, लेकिन सीखने का एक उपाय नहीं है । यदि सीखने के उपाय एक प्रयोगात्मक प्रश्न के लिए महत्वपूर्ण हैं, एक पानी भूलभुलैया, बार्ंस भूलभुलैया, या रेडियल हाथ भूलभुलैया की संभावना बेहतर होगा ।
व्यवहार के क्षेत्र के कस्टम निर्माण के लिए डॉलर के सैकड़ों बचाने और प्रयोगशालाओं की एक विस्तृत विविधता की वित्तीय पहुंच के भीतर वस्तु परीक्षण लाने की क्षमता है । इस प्रोटोकॉल कई बाधाओं को समाप्त और निर्माण की प्रक्रिया को सरल बनाने के लिए घर के मैदान निर्माण और acrylics में कोई विशेष प्रशिक्षण के साथ वैज्ञानिकों के लिए सुलभ है । यह नोट करने के लिए महत्वपूर्ण है कि खरीद रंग एक्रिलिक शीट्स कि चूहों के साथ इसके विपरीत होगा, जैसे काले चूहों के लिए सफेद एक्रिलिक और सफेद चूहों के लिए काला एक्रिलिक, डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण की सुविधा होगी, विशेष रूप से जब वाणिज्यिक उपलब्ध का उपयोग विश्लेषण सॉफ्टवेयर । “मार्ग किनारों” के साथ कटौती करने के लिए आकार शीट आदेश एक मेज देखा (तालिका 1) के लिए की जरूरत समाप्त, और एक्रिलिक सीमेंट का उपयोग ड्रिल और countersink पायलट छेद की जरूरत को हटा । फास्टनरों में पंगा लेना, ड्रिलिंग, और एक्रिलिक काटने अक्सर यह टूट, चिप और अपनी भंगुर प्रकृति के कारण दरार का कारण बनता है । क्योंकि सीमेंट एक विलायक है, यह क्षेत्र में शामिल हो जा रहा है, भंग और किसी भी एक्रिलिक यह मुठभेड़ों नरम हो जाएगा । इस प्रकार, यह एक टुकड़ा अलग से लागू नहीं किया जाना चाहिए के रूप में अगर यह एक पारंपरिक गोंद थे । गोंद के विपरीत, सीमेंट नकारात्मक रिक्त स्थान को भरने या सतहों का पालन नहीं होगा । यह प्राथमिक कारण आदेश “मार्ग किनारों” के रूप में यह एक चिकनी और सपाट बढ़त सुनिश्चित करने के लिए, एक बेहतर बांड का निर्माण होगा । जब सीमेंट सूख जाता है, यह एक टुकड़ा में दो एक्रिलिक शीट्स आपस में जुड़े होगा “विलायक वेल्डिंग” नामक एक प्रक्रिया में । बहुत धातु वेल्डिंग की तरह, समाप्त उत्पाद एक टुकड़ा है, लेकिन वेल्डेड क्षेत्र हमेशा सबसे कमजोर स्थान रहेगा । जैसे, एक बार क्षेत्र उपयोग में हैं, देखभाल करने के लिए सीधे प्रभाव या उन मोड़ों पर अत्यधिक तनाव से बचने के लिए लिया जाना चाहिए ।
इस प्रोटोकॉल भी कैसे अप करने के लिए 4 चूहों (चित्रा 1 और चित्रा 2) के एक साथ परीक्षण के लिए स्थापित करने के लिए 4 क्षेत्रों से पता चलता है. क्षेत्र के अपारदर्शी दीवारों चूहों परीक्षण के दौरान एक दूसरे को देखने से रोकने के लिए, लेकिन अभी भी एक संभावना है कि कमरे में अन्य चूहों होने का कारण बनता है गंध या शोर distractions कि परीक्षण ख़राब कर सकते हैं. आदी होना परीक्षण के रूप में यहां विस्तृत मदद इस चिंता को कम कर सकते हैं, के रूप में चूहों व्यवहार परीक्षण से पहले बहु पशु कमरे की स्थिति को उजागर कर रहे हैं । हालांकि, अगर अंय चूहों या प्रयोगकर्ता शोर अंय चूहों से निपटने के साथ जुड़े से distractions एक मजबूत चिंता का विषय है, एक माउस के साथ एक क्षेत्र इस्तेमाल किया जा सकता है, के रूप में अच्छी तरह से, हालांकि यह OLT और एकाधिक चूहों के साथ NORT पूरा करने के लिए आवश्यक समय में वृद्धि होगी । से अधिक 4 अखाड़ों सैद्धांतिक रूप में अच्छी तरह से इस्तेमाल किया जा सकता है, लेकिन अधिकांश कैमरों अच्छा संकल्प के साथ कि कई अखाड़ों को दिखाने के लिए एक व्यापक पर्याप्त क्षेत्र नहीं है ।
आयाम और यहां प्रदान की दूरी एक ठेठ परीक्षण कमरे में माउस व्यवहार परीक्षण के लिए सामांय दिशानिर्देश है कि 16 x 16 x 16 मीटर3 आयामों में है (आंकड़ा 1b और 1C) । उपयुक्त पर्यावरण cues, arena, और वीडियो रिकॉर्डिंग उपकरण की स्थापना के प्रत्येक वातावरण के लिए अनुकूलित किया जाना चाहिए । Cues बड़े आकार या पैटर्न से मिलकर कर सकते है (आमतौर पर काले और सफेद में) कि चूहों को सक्षम करने के लिए स्थानिक खुद को OLT के दौरान ओरिएंट । एक दूसरे से भर में विभिन्न स्थानों पर cues रखने के बजाय, cues भी परीक्षण क्षेत्र की दीवारों के लिए मुहिम शुरू की जा सकती है । इस प्रोटोकॉल की सिफारिश की एक पर्दा के साथ परीक्षण कक्ष विभाजन के लिए शोधकर्ता और कंप्यूटर व्यवहार परीक्षण के दौरान छिपाने । सभी आदी होना के दौरान, अंतर परीक्षण अंतराल, और सक्रिय परीक्षण, शोधकर्ताओं के लिए खुद को परीक्षण के क्षेत्र से अलग पर्दा बंद कर देना चाहिए । अगर यह प्रैक्टिकल नहीं है तो कंप्यूटर चूहों को ध्यान में रखते हुए रह सकते हैं, लेकिन शोधकर्ता को टास्क के दौरान बाहर का दृश्य अवश्य ही चलना चाहिए । अगर शोधकर्ता मौजूद है, तो चूहे उसे या उसे स्थानिक क्यू के रूप में भरोसा करने की कोशिश कर सकते हैं ।
सभी व्यवहार परीक्षण एक तापमान में पूरा किया जाना चाहिए और आर्द्रता मंद के साथ वातावरण नियंत्रित है, लेकिन लगभग ३१० लक्स और कम से कम बाहरी ध्वनि या ऐसे प्रयोगकर्ता पर इत्र के रूप में मजबूत पर्यावरणीय गंध cues, पर भी रोशनी । प्रत्येक परीक्षण और परीक्षण के दिन के बीच, सभी क्षेत्रों और वस्तुओं पशु सुविधा के साथ साफ किया जाना चाहिए इस तरह के ७०% इथेनॉल या unscent ब्लीच पोंछे के साथ पोंछते के रूप में नसबंदी के तरीकों की सिफारिश की घ्राण cues को कम करने के लिए । यदि रासायनिक कीटाणुनाशक उपयोग किया जाता है, ७०% इथेनॉल के साथ एक अंतिम कुल्ला की सिफारिश की है क्योंकि कई रासायनिक कीटाणुनाशक जानवरों के पैरों को परेशान किया जा सकता है । किसी भी व्यवहार कार्य के साथ के रूप में, परीक्षण से पहले कई दिनों के लिए चूहों हैंडलिंग उन व्यक्तियों जो OLT और NORT प्रदर्शन किया जाएगा और20,22परीक्षण के दौरान तनाव को कम करने के साथ परिचित करने के लिए आवश्यक है । चूहों के रूप में परीक्षण क्षेत्र के आसपास में अपरिचित व्यक्तियों के कारण तीव्र तनाव का अनुभव कर सकते हैं, यह भी सिफारिश की है कि सभी व्यवहार परीक्षण एक ही व्यक्ति (ओं) द्वारा पूरा किया जाना चाहिए. परीक्षण मानकों और इस प्रोटोकॉल में विस्तृत शर्तों 6 से 9 सप्ताह पुराने वयस्क C57Bl/6 चूहों के लिए अनुकूलित किया गया है और इस आयु समूह या पुराने चूहों में ही स्मृति विकलांगता कारण उम्र में चोट के कारण स्मृति हानि खुलासा में सबसे अधिक उपयोगी होगा । यदि उद्देश्य युवा चूहों में स्मृति सुधार के लिए परीक्षण करने के लिए है, एक लंबे समय 1 घंटे से लेकर 1 दिन के लिए अधिक आसान 20 मिनट आईटीआई संस्करण में प्रदर्शन पर छत प्रभाव से बचने के लिए उपयुक्त होगा. दरअसल, आईटीआई 5 मिनट (तत्काल याद के लिए) से कई घंटे या दिनों के लिए (दूरदराज के यादों के लिए), प्रयोग और उपभेदों और चूहों की उंर की विशिष्ट जरूरतों पर निर्भर करता है रेंज कर सकते हैं । महत्वपूर्ण बात, लंबाई की परवाह किए बिना, सभी आईटीआई एक प्रयोग में सत्रों के बीच संगत होना चाहिए । विभिंन उपभेदों और चूहों के व्यवहार और सीखने में अंतर प्रदर्शन के रूप में, प्रत्येक परीक्षण और अंतराल के लिए समय, परीक्षण क्षेत्र व्यवस्था है, और इस्तेमाल किया वस्तुओं चूहों के विशेष तनाव के अनुसार संशोधित किया जा सकता है, उनकी उंर, और विशिष्ट चोट/ रोग हस्तक्षेप मॉडल9,21,23,25का परीक्षण किया जा रहा है ।
जबकि स्थानिक स्मृति OLT में परीक्षण कार्यों की हिप्पोकैम्पस निर्भरता अच्छी तरह से स्थापित कर रहे हैं, NORT या हिप्पोकैम्पस पर भरोसा नहीं कर सकते हैं । NORT से डेटा की व्याख्या के लिए खाते में इस चेतावनी लेना चाहिए । निर्धारित चर, कि हिप्पोकैम्पस शामिल है के लिए, ऑब्जेक्ट मान्यता स्मृति में अभी तक पर सहमत नहीं हैं, लेकिन आईटीआई लंबाई या saliency स्थानिक संकेतों के18शामिल हो सकते हैं । विशेष रूप से, प्रस्तुत प्रोटोकॉल NORT से पहले स्थानिक OLT का उपयोग करता है, जो चूहों NORT में हिप्पोकैम्पस प्रक्रियाओं का उपयोग करने की दिशा में पूर्वाग्रह हो सकता है । इस प्रकार, यह नोट करना महत्वपूर्ण है कि आदेश को उलट दिया जा सकता है, या प्रत्येक कार्य को स्वतंत्र रूप से चलाया जा सकता है, जो कि प्रयोगकर्ता के प्रश्नों और आवश्यकताओं पर निर्भर करता है ।
वस्तु चयन दोनों OLT और NORT22,24का एक महत्वपूर्ण पहलू है । आदर्श वस्तुओं काफी भारी नहीं आसानी से एक माउस से विस्थापित किया जा रहे है और सामग्री के कांच या धातु की तरह बनाया, कि एक चूहे चबाने या खरोंच से नुकसान नहीं कर सकते । लकड़ी, फोम, या नरम प्लास्टिक की वस्तुओं के रूप में वे आसानी से विकृत कर रहे है और गंध मुक्त रखने के लिए मुश्किल है उचित नहीं हैं । इसके अलावा, परीक्षणों में प्रयुक्त वस्तुओं सभी आकार, बनावट, गंध और सामग्री में अपेक्षाकृत समान होना चाहिए । 1 d चित्रा एक उपयुक्त वस्तु है कि इस्तेमाल किया जा सकता का एक उदाहरण देता है । एक लड़की के इस नारंगी प्लास्टिक की मूर्ति रेत से भर जाता है यह पर्याप्त वजन देने के लिए और सफाई रिएजेंट या अंय गंध पैदा करने वाले एजेंटों के रिसाव को रोकने के लिए सील । ऊपर की आकृति होने के कारण चूहे इस वस्तु पर ऊपर या बैठने के लिए नहीं चढ़ पा रहे हैं । OLT या NORT के लिए, इस वस्तु के समान आकार, वजन, सामग्री, रंग और जटिलता, जैसे एक खरगोश की एक समान प्लास्टिक की मूर्ति के रूप में एक और वस्तु के साथ सबसे अच्छा बनती है । यह सुनिश्चित करने के लिए कि वस्तु की जांच वास्तव में नवीनता के लिए प्राथमिकता को दर्शाता है, सभी वस्तुओं को एक ही तनाव, सेक्स में 8 चूहों की एक ंयूनतम के साथ समकक्ष आंतरिक मूल्य के लिए मांय किया जाना चाहिए, और प्रायोगिक समूह की उंर के रूप में प्रोटोकॉल की धारा २.९ में वर्णित है । इसके अतिरिक्त, वस्तुओं के संदर्भ में यादृच्छिक किया जाना चाहिए जो वस्तु है उपंयास या एक ही अध्ययन में चूहों के बीच स्थानांतरित वस्तु आगे सुनिश्चित करने के लिए कि वस्तुओं की अंतर्निहित विशेषताओं वरीयता को प्रभावित नहीं कर रहे हैं । ऑब्जेक्ट प्लेसमेंट भी बहुत OLT और NORT की सफलता या विफलता को प्रभावित कर सकते हैं । वस्तुओं के क्षेत्र में counterbalanced होना चाहिए और नहीं भी दीवारों के पास । एक वस्तु द्वारा भीड़ एक कोने चूहों को छिपाने के लिए एक आकर्षक जगह है और इस जांच के उपायों को पाया जाएगा ।
डेटा संग्रह के लिए एक महत्वपूर्ण शर्त “सक्रिय जांच” को परिभाषित है, जो है जब एक माउस अपनी नाक के साथ एक वस्तु संलग्न वस्तु कोई अधिक से अधिक 2 सेमी दूर बताया । ऑब्जेक्ट के शीर्ष पर चल रहा कोई माउस या ऑब्जेक्ट पिछले देख रहा है सक्रिय जांच के रूप में योग्य नहीं है । इसके अलावा, के बाद से OLT और NORT एक या तो स्थानिक स्थान या वस्तु की वास्तविक सुविधाओं को याद माउस पर निर्भर करते हैं, वहां प्रशिक्षण परीक्षणों के दौरान इन का पर्याप्त अध्ययन किया जाना चाहिए । इस प्रकार, शोधकर्ता एक ंयूनतम जांच समय को परिभाषित करने और किसी भी विषय है कि जांच की है कि आधारभूत स्तर को पूरा नहीं कर बाहर, पारंपरिक रूप से 20 सेकंड21पर सेट करना होगा ।
वस्तु जांच समय के ठहराव के साथ या महंगे विश्लेषण सॉफ्टवेयर के बिना या तो विभिंन तरीकों से पूरा किया जा सकता है । यदि मैनुअल स्कोरिंग प्रयोग किया जाता है, जैसा कि यहां वर्णित है, सबसे व्यापक डेटा संग्रह वीडियो पर समय टिकटों रिकॉर्डिंग जब माउस वस्तु की जांच कर रहा है द्वारा प्राप्त किया जा सकता है । रिकॉर्डिंग शुरू करने और तीन व्यक्तिगत परीक्षणों के दौरान वस्तु जांच के समय बंद निष्पक्ष समय टिकटों का एक स्थाई प्रवेश बनाता है और डेटा की सटीक मैनुअल गणना की सुविधा के रूप में वैकल्पिक तरीकों के लिए विरोध के रूप में एक रोक घड़ी का उपयोग कर किसी माउस द्वारा प्रत्येक ऑब्जेक्ट की जांच करने के कुल समय को संयोजक रूप से रिकॉर्ड करना ।
वाणिज्यिक सॉफ्टवेयर संकुल भी स्कोरिंग वस्तु जांच के लिए उपलब्ध हैं । व्यावसायिक रूप से उपलब्ध सॉफ्टवेयर हाथ स्कोरिंग डेटा से परे डेटा का खजाना प्रदान कर सकते है यहां वर्णित कुल दूरी सहित कूच, समय की राशि के क्षेत्र के कुछ क्षेत्रों में खर्च, और आंदोलन की गति16,23। सॉफ्टवेयर, एक बार ठीक से नपे और मज़बूती से वस्तु जांच का पता लगाने की पुष्टि की, भी मैनुअल स्कोरिंग की तुलना में बहुत तेजी से डेटा उपज सकते हैं । यह तेजी से डेटा उपज मई, लंबे समय में, मानव मैनुअल स्कोरिंग के लिए आवश्यक घंटे की तुलना में शुद्ध बचत उपज । हालांकि, व्यवहार विश्लेषण के लिए सबसे सॉफ्टवेयर संकुल उच्च सामने लागत है कि कई प्रयोगशालाओं और मैनुअल स्कोरिंग के लिए प्रतिबंधित किया जा सकता है अक्सर छात्र शोधकर्ताओं द्वारा पूरा किया जा सकता है, व्यवहार ंयूनतम स्कोरिंग के प्रति घंटा लागत बना । वाणिज्यिक सॉफ्टवेयर भी अक्सर कितने उपयोगकर्ताओं को समवर्ती सॉफ्टवेयर का उपयोग कर सकते है पर प्रतिबंध के साथ आता है, डेटा प्रवाह और समय बचत सीमित । हालांकि इन सॉफ्टवेयर संकुल के लिए कई फायदे हैं, वे OLT और NORT से वस्तुओं की जांच समय की आवश्यक जानकारी इकट्ठा करने के लिए आवश्यक नहीं हैं । स्वयं इस डेटा प्राप्त करने की क्षमता उपंयास वस्तु और अधिक आर्थिक रूप से शोधकर्ताओं की एक व्यापक विविधता के लिए सुलभ कार्य करता है ।
इस प्रोटोकॉल की एक अतिरिक्त सुविधा है कि आदी होना के पहले सत्र मूलतः एक खुले मैदान में एक परीक्षण है, जो गतिविधि और चिंता के स्तर पर डेटा उपज सकता है । गतिविधि का स्तर कुल दूरी कूच या औसत गति का उपयोग कर quantified जा सकता है, यदि ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर उपलब्ध है । इसी तरह, ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर के साथ, चिंता के उपाय क्षेत्र या दूरी के केंद्र में खर्च किए गए समय से प्राप्त किया जा सकता है । इन आंकड़ों को भी एक ग्रिड के साथ क्षेत्र वीडियो ओवरले और क्रॉसिंगों को बढ़ाता द्वारा मैंयुअल रूप से प्राप्त किया जा सकता है । इस खुले क्षेत्र डेटा सकल मोटर घाटे या अत्यधिक चिंता है कि बाद में वस्तु जांच के साथ हस्तक्षेप हो सकता है बाहर शासन मदद कर सकते हैं ।
इस प्रोटोकॉल में प्रयुक्त सांख्यिकीय परीक्षणों के विश्लेषण के पारंपरिक तरीकों के प्रतिनिधि हैं । जब चूहों के 2 समूहों की तुलना, एक दो नमूना, दो पूंछ टी परीक्षण समूहों के बीच स्थानांतरित या उपंयास वस्तु की जांच प्रतिशत समय में अंतर के महत्व का परीक्षण करने के लिए सिफारिश की है. यदि नमूना आकार असमान हैं, असाधारण उच्च परिवर्तनशीलता है, या समूहों के बीच असमान परिवर्तनशीलता दिखाने के लिए, एक गैर-पैरामीट्रिक परीक्षण के बजाय सिफारिश की है, टी परीक्षण के अंतर्निहित मांयताओं के कई के रूप में इन स्थितियों में उल्लंघन किया जाएगा । चूहों के 3 या अधिक समूहों की तुलना करते हैं, ANOVAs समूह ले जाया गया या उपन्यास वस्तु की जांच प्रतिशत समय पर एक महत्वपूर्ण प्रभाव है कि क्या परीक्षण करने के लिए सिफारिश कर रहे हैं. Tukey परीक्षण या Bonferroni-सही pairwise तुलना के रूप में त्रुटि-हॉक परीक्षण, तब लागू किया जा सकता, तो समूहों की प्रत्येक जोड़ी के बीच प्रतिशत जांच समय में अंतर का परीक्षण करने के लिए । OLT के साथ, डेटा का विश्लेषण करने के लिए एक अतिरिक्त तरीका प्रतिशत समय में एक महत्वपूर्ण परिवर्तन प्रशिक्षण से OLT परीक्षणों के लिए स्थानांतरित वस्तु की जांच के लिए परीक्षण है । चूहों के केवल एक समूह के साथ, इस परीक्षण एक जोड़ा, दो पूंछ टी परीक्षण के रूप ले, प्रशिक्षण से स्थानांतरित कर दिया वस्तु के साथ प्रतिशत समय में महत्वपूर्ण परिवर्तन के लिए परीक्षण के लिए प्रत्येक माउस में OLT करने के लिए (ध्यान में रखते हुए कि इन युग्मित विश्लेषण कर रहे है और स्वतंत्र नहीं माप, के बाद से प्रत्येक माउस पैदावार दो डेटा अंक) । चूहों के दो समूहों के साथ, एक दोहराया उपाय दो तरह ANOVA इस्तेमाल किया जाएगा, दोहराया जा रहा है उपाय के साथ परीक्षण (प्रशिक्षण बनाम OLT) और समूह काम दूसरा कारक जा रहा है । परीक्षण के भीतर एक दूसरे के लिए समूहों की तुलना करना चाहिए उपचार समूहों के बीच अंतर के लिए पोस्ट हॉक परीक्षण ।
वैकल्पिक रूप से, यदि OLT या NORT में स्मृति का सबूत है सब है कि परीक्षण किया जा रहा है, एक एक नमूना टी प्रतिशत समय का परीक्षण ५०% की निश्चित मूल्य बनाम एक वस्तु की जांच का इस्तेमाल किया जा सकता है । एक प्रतिशत समय काफी अधिक ५०% से ऑब्जेक्ट के लिए स्मृति का सुझाव देता है । एक प्रतिशत समय काफी नीचे ५०% से बचने का सुझाव (किसी कारण के लिए), और वस्तु विकल्प फिर से मूल्यांकन किया जाना चाहिए । हालांकि, एक नमूना t-परीक्षण प्रकट नहीं कर सकता कि दो या अधिक समूहों को एक-दूसरे से अलग है । उदाहरण के लिए, एक प्रयोग में चूहों के दो समूहों के साथ, यदि समूह एक समय का ६०% खर्च के लिए उपंयास वस्तु के साथ पी = ०.०४९ एक नमूना t-परीक्षण तुलना ५०% के लिए, और समूह बी केवल समय का खर्च ५९% के लिए उपंयास वस्तु के साथ पी = ०.०५१ , समूह A ५०% से काफी अलग है (और समूह B नहीं है) । हालांकि, यह निष्कर्ष निकालना गलत है कि इन दोनों समूहों के एक दूसरे से काफी अलग हैं । एक दो नमूना टी परीक्षण ए और बी की तुलना आसानी से पता चलता है कि इन दो समूहों सांख्यिकीय भेद कर सकते हैं । दो या अधिक समूहों की स्मृति प्रदर्शन की तुलना करने के लिए अंतिम लक्ष्य है, तो उन समूहों सांख्यिकीय एक-दूसरे की तुलना में होना चाहिए, न केवल किसी बाह्य मानक की तुलना । एक समान दिशानिर्देश प्रशिक्षण और OLT के बीच स्थानांतरित ऑब्जेक्ट के साथ बिताए गए समय की तुलना के लिए लागू होता है । इस स्थिति में, एक समूह में प्रशिक्षण और OLT के बीच एक स्थानांतरित ऑब्जेक्ट के साथ प्रतिशत समय में एक महत्वपूर्ण अंतर ढूँढना और दूसरे में नहीं दिखाता है कि ये समूह सांख्यिकीय रूप से भिन्न हैं. समूहों के बाद प्रत्येक परीक्षण के भीतर एक दूसरे के खिलाफ ही नहीं, समूह के भीतर परीक्षण भर की तुलना में होना चाहिए ।
यह ध्यान में रखना है कि किसी भी व्यक्ति के माउस की जांच समय के लिए या स्मृति के खिलाफ सबूत के रूप में इस्तेमाल नहीं किया जा सकता है महत्वपूर्ण है । बल्कि, इन कार्यों में ऑब्जेक्ट स्थान या पहचान के लिए स्मृति केवल सांख्यिकीय रूप से किसी अन्य समूह के समग्र डेटा या निश्चित संभावना स्तरों (समय के लिए ५०%, 0 के लिए भेदभाव अनुपात) की तुलना में एकीकृत डेटा के आधार पर निष्कर्ष निकाला जा सकता है । नमूना आकार की जरूरत है एक विशेष हेरफेर और व्यवहार में परिवर्तनशीलता के प्रभाव के आकार पर भारी निर्भर करेगा, जो दोनों बारी में इस्तेमाल किया जा रहा चूहों पर निर्भर करेगा । उंर, सेक्स, और जोड़तोड़ सभी प्रभाव परिवर्तनशीलता । उदाहरण में चित्र 3 ए और 1 बीमें प्रस्तुत डेटा, n = 14 विषयों का उपयोग किया गया, ०.६८ और ०.६५ की शक्ति के एक युग्मित टी परीक्षण के लिए α = ०.०५ के साथ एक प्रभाव आकार उपज । यदि ०.८ की एक शक्ति इस तुलना के लिए वांछित थे, 18 का एक नमूना आकार की आवश्यकता होगी ।
यह चर्चा पी के आसपास फंसा-मूल्यों और महत्व कटऑफ क्योंकि इन उपायों और विश्लेषण सबसे आम तौर पर OLT और NORT डेटा के लिए रिपोर्ट कर रहे हैं, और इसलिए दोनों experimenters और समीक्षकों को परिचित होने की संभावना है । पी-मूल्यों पर यह निर्भरता भारी सांख्यिकीय26के रूप में की आलोचना की गई है । हालांकि, हालांकि वैकल्पिक विश्लेषण विधियों मौजूद है और कुछ पत्रिकाओं में27का समर्थन कर रहे हैं, कोई भी मोटे तौर पर मानक26के रूप में व्यवहार और बायोमेडिकल फील्ड द्वारा अपनाया गया है ।
संक्षेप में, इस प्रोटोकॉल प्रभावी रूप से कम से कम लागत पर चूहों में स्मृति परीक्षण । प्रोटोकॉल के लिए उपयुक्त संशोधनों के लिए सिफारिशों को किसी भी छोटे कुतर मॉडल के साथ सफल कार्यांवयन सुनिश्चित करने के लिए शामिल हैं । विशिष्ट चोट या चिकित्सीय हस्तक्षेप मॉडल के लिए इस प्रोटोकॉल के आवेदन मूल्यवान कार्यात्मक प्रासंगिकता है कि सेलुलर और आणविक तंत्र पूरक प्रकट कर सकते है अध्ययन किया जा रहा है ।
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम ओहियो राज्य विश्वविद्यालय में क्रोनिक मस्तिष्क चोट और खोज विषयों से EDK को NIH और बीज वित्त पोषण से R00 NS089938 द्वारा वित्त पोषित किया गया ।
Materials
| Sign White – 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast) | TAP Plastics | NA | 1/4" x 15.75" x 15.75" with Routed Edges |
| Sign White – 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast) | TAP Plastics | NA | 1/4" x 15.75" x 16.5" with Routed Edges |
| Sign White – 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast) | TAP Plastics | NA | 1/4" x 16.5" x 16.5" with Routed Edges |
| TAP Acryllic Cement (1 pt.) | TAP Plastics | NA | |
| 16 Gauge Hypo Applicator | TAP Plastics | NA | |
| Debut Video Capture Software Pro Edition | NCH Software | NA | |
| Stanely SAE/Metric Comb Square | Grainger | 6R171 | |
| Logitech Pro Stream Webcam C922x | CDW | 4429927 | |
| Belkin 16' USB 2.0 Active Extension Cable | CDW | 570691 | |
| Panduit Pan-Way LD Surface Raceway (8') | CDW | 300902 | |
| Spatial/Environmental Cues | Variable | NA | |
| Objects for testing | Variable | NA | |
| 70% ethanol | Variable | NA | |
| Double-sided tape | Variable | NA |
Referências
- Krakauer, J. W., Ghazanfar, A. A., Gomez-Marin, A., Maclver, M. A., Poeppel, D. Neuroscience Needs Behavior: Correcting a Reductionist Bias. Neuron. 93 (3), 480-490 (2017).
- Lange, F., Seer, C., Kopp, B. Cognitive flexibility in neurological disorders: Cognitive components and event-related potentials. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 83, 496-507 (2017).
- Barnett, J. H., Blackwell, A. D., Sahakian, B. J., Robbins, T. W. The Paired Associates Learning (PAL) Test: 30 Years of CANTAB Translational Neuroscience from Laboratory to Bedside in Dementia Research. Current Topics in Behavioral Neuroscience. 28, 449-474 (2016).
- Eichenbaum, H., Otto, T., Cohen, N. J. The hippocampus-what does it do?. Behavioral and Neural Biology. 57 (1), 2-36 (1992).
- Bartsch, T., Wulff, P. The hippocampus in aging and disease: From plasticity to vulnerability. Neurociência. 19 (309), 1-16 (2015).
- Smith, B. M., Yao, X., Chen, K. S., Kirby, E. D. A Larger Social Network Enhances Novel Object Location Memory and Reduces Hippocampal Microgliosis in Aged Mice. Frontiers in Aging Neuroscience. 10 (142), 1-16 (2018).
- Chieffi, S., et al. Exercise Influence on Hippocampal Function: Possible Involvement of Orexin-A. Frontiers in Physiology. 14 (8), 85 (2017).
- Garth, A., Roeder, I., Kempermann, G. Mice in an enriched environment learn more flexibly because of adult hippocampal neurogenesis. Hippocampus. 26 (2), 261-271 (2016).
- Brown, R. E., Stanford, L., Schellinck, H. M. Developing standardized behavioral tests for knockout and mutant mice. Institute for Laboratory Animal Research Journal. 41 (3), 163-174 (2000).
- Barker, G. R., Warburton, E. C. When is the hippocampus involved in recognition memory?. Journal of Neuroscience. 31 (29), 10721-10731 (2011).
- Savage, S., Ma, D. Animal behavior testing: memory. British Journal of Anaesthesia. 113 (1), 6-9 (2015).
- Fanselow, M. S., Dong, H. W. Are the dorsal and ventral hippocampus functionally distinct structures?. Neuron. 65 (1), 7-19 (2010).
- Vogel-Ciernia, A., Wood, M. A. Examining object location and object recognition memory in mice. Current Protocols in Neuroscience. 69, 1-17 (2014).
- Ammassari-Teule, M., Passino, E. The dorsal hippocampus is selectively involved in the processing of spatial information even in mice with a genetic hippocampal dysfunction. Psychobiology. 25 (2), 118-125 (1997).
- Le Merrer, J., Rezai, X., Scherrer, G., Becker, J. A., Kieffer, B. L. Impaired hippocampus-dependent and facilitated striatum-dependent behaviors in mice lacking the delta opioid receptor. Neuropsychopharmacology. 38 (6), 1050-1059 (2013).
- Hattiangady, B., et al. Object location and object recognition memory impairments, motivation deficits and depression in a model of Gulf War illness. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 8, 78 (2014).
- Oliveira, A. M., Hawk, J. D., Abel, T., Havekes, R. Post-training reversible inactivation of the hippocampus enhances novel object recognition memory. Learning and Memory. 17 (3), 155-160 (2010).
- Cohen, S. J., Stackman, R. W. Assessing rodent hippocampal involvement in the novel object recognition task. Behavioral Brain Research. 285, 105-117 (2014).
- Cohen, S. J., et al. The Rodent Hippocampus Is Essential for Nonspatial Object Memory. Current Biology. 23 (17), 1685-1690 (2013).
- Sorge, R. E., et al. Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents. Nature Methods. 11 (6), 629-632 (2014).
- Ennaceur, A., Delacour, J. A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats. 1: Behavioral data. Behavioral Brain Research. 31 (1), 47-49 (1988).
- Leger, M., et al. Object recognition test in mice. Nature Protocols. 8 (12), 2531-2537 (2013).
- Wolf, A., Bauer, B., Abner, E. L., Ashkenazy-Frolinger, T., Hartz, A. M. A Comprehensive Behavioral Test Battery to Assess Learning and Memory in 129S6/Tg2576 Mice. Public Library of Science ONE. 11 (1), e0147733 (2016).
- Ennaceur, A. One-trial object recognition in rats and mice: methodological and theoretical issues. Behavioural Brain Research. 215, 244-254 (2010).
- Lueptow, L. M. Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice. Journal of Visualized Experiments. (126), e55718 (2017).
- Wasserstein, R. L., Lazar, N. A. The ASA’s Statement on p-Values: Context, Process, and Purpose. The American Statistician. 70 (2), 129-133 (2016).
- Ranstam, J. Why the P-value culture is bad and confidence intervals a better alternative. Osteoarthritis and Cartilage. 20 (8), 805-808 (2012).
