Электронные сигареты (e-cig) пользователей растет во всем мире. Мало, однако, известно о воздействии на здоровье, вызванных ингаляционных e-cig аэрозолей. Эта статья описывает e-cig аэрозоля поколение техника подходит для животных воздействия и последующего токсикологических исследований. Такие протоколы должны установить экспериментально воспроизводимость и стандартизированных e-cig воздействия систем.
Электронные сигареты (e-cig) устройства используют тепло производить ингаляции аэрозолей от жидкости (e жидкость) состоит в основном из увлажнители, никотин и вкусовые добавки химических веществ. Аэрозоль производства включает в себя тонкодисперсных и ультрадисперсных частиц и потенциально никотина и альдегиды, которые могут быть вредными для здоровья человека. E-cig пользователи вдыхать эти аэрозоли и с третьего поколения устройств, e-cig, контролировать конструктивных особенностей (сопротивление и напряжения) в дополнение к выбору e жидкости и Пыхтящий профиль. Они являются ключевыми факторами, которые могут существенно повлиять на токсичность ингаляции аэрозолей. E-cig исследования, однако, является трудной и сложной главным образом из-за отсутствия стандартизированной оценки и многочисленных разновидностей e-cig моделей и брендов, а также вкус e жидкость и растворители, которые доступны на рынке. Эти соображения подчеркивают настоятельную необходимость согласования протоколов исследований e-cig, начиная с e-cig аэрозоля поколения и характеристика методов. Настоящее исследование фокусируется на этот вызов, описывая метод поколения аэрозоля подробные пошаговые e-cig с конкретными параметрами экспериментальной, которые считаются реалистичными и представитель сценариев воздействия в реальной жизни. Методология делится на четыре секции: подготовка, воздействия, анализ постконтактная, плюс очистка и техническое обслуживание устройства. С помощью двух типов e-жидкости и различных напряжений представителя результаты с точки зрения массовой концентрации, распределение частиц по размеру, химический состав и уровни котинина в мышах. Эти данные демонстрируют универсальность e-cig воздействия системы, помимо его значение для токсикологических исследований, как это позволяет для широкого круга сценариев воздействия компьютерным управлением, включая автоматизированные представитель vaping топографии профили.
Безопасность, связанные с использованием электронной сигареты (e-cigs) является одним из активных дебатов в научном сообществе. С одной стороны производители и торговцы рекламировать потенциальные преимущества e-cigs как продукт снижения вреда для курильщиков, за счет ликвидации многих вредных веществ, присутствующих в обычных сигарет, хотя решения директивных органов общественного здравоохранения являются опасения по поводу отсутствия данных о долгосрочных здоровье человека воздействия1,2. E-CIGS служат по крайней мере двух различных целей, 1) в качестве замены транспортного средства для доставки никотина и 2) как для некурящих прекращение устройства3. По данным центров по контролю и профилактике болезней (ЦББ), в 2014 году более чем 9 миллионов взрослых американцев использовать e-cigs на регулярной основе. С 2013 по 2014, e-cig использования среди учащихся средних школ увеличилось более чем на 300%4. Учитывая рост использования e-cigs среди молодежи, также как и взрослых1,2,4и учитывая популярный, но недоказанной, претензии о e-cigs как безопасные альтернативы некурящих ключевых научных вопросов необходимо решать в определить, является ли использование e-cig создает потенциальные риски для здоровья человека, особенно в1,дыхательной системы2. Хотя e-cigs были впервые коммерциализации в США в 2007 году, лишь весьма ограниченные исследования были проведены вне влияния e-cig аэрозольных воздействий в пробирке и легких структуры, функций и общего состояния здоровья5,6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11. Таким образом, в пробирке, в естественных условиях и эпидемиологических данных имеют важное значение для содействия созданию государственной политики и положений, связанных с потреблением e-cigs. Однако надежных и воспроизводимых научных доказательств в этой новой области сначала требует создание стандартизированных e-cig Пыхтящий режимов и создания воспроизводимых воздействия среды в лабораторных параметров, которые являются Светоотражающая человеческого потребления.
Третьего поколения e-cig устройств, доступных на рынке, состоят из по крайней мере один Отопление катушки (распылитель) плюс литиевой батареей. Контроллер питания e-cig устройства могут работать на различных напряжений. Эти устройства e-cig также имеют резервуар, в который вводится жидкость e сигареты (e жидкость). E жидкость, также известный как e сок, состоит главным образом из никотина, вкусов и перевозчик растворителей (увлажнители), часто пропиленгликоля (PG), глицерин растительного (VG) и воды. Поскольку, согласно США продовольствия и медикаментов (FDA), e жидкости состоят из смеси «обычно рассматривается как Сейф» (GRAS) пищевые добавки вкусовые добавки химических веществ и увлажнители, плюс никотина, они могут рассматриваться как безопасные в пищу. Однако когда эти жидкие составы использовать через устройство e-cig, они отапливаются распылитель, который изменяет физико химические свойства e жидкость и производит аэрозоль или паров, содержащих карбонилы, более конкретно альдегид соединений12,13. Эти альдегиды образуются путем термической деструкции и окисления гликолей, которые также дают образование гидроксильных радикалов14,,1516,17. Альдегиды, которые присутствуют в e-cig аэрозоля когда использовать под конкретные условия13, включают формальдегида, ацетальдегид, acetol, Акролеин, glycidol и Диацетил, все из которых известны своими мощными негативное воздействие на здоровье человека, с Формальдегид является проверенным канцероген человека15,16,17. Кроме того, e-cig аэрозоля также состоит из изящных (250-950 Нм)18,19 и ультрадисперсных частиц20 (44-97 Нм), которые известны привести к легочной токсичностью через воспаления и окислительного стресса механизмы 17. Основываясь на составе e жидкость, т.е., доля отдельных компонентов присутствует в разработке, а также напряжения устройства e-cig, который влияет температура, используемый для vape e жидкость, всего твердых частиц (TPM) концентрация аэрозоля будет варьироваться и привести к различных уровней частиц, а также концентрации альдегидов, которые показали выпускаться под конкретные vaping условий19,21 . Эти аэрозоли вдыхании, e-cig пользователи, кто контролирует напряжения их устройства e-cig. Выбор напряжения на основе личных предпочтений скорость доставки никотина, производства аэрозолей и сжигание ощущение12. Таким образом важно, чтобы лучше понять характеристики этих аэрозолей для обеспечения научных доказательств для адекватных положений, регулирующих e-cig и политики в области производства и потребления e жидкость.
В контексте научных исследований, есть несколько вопросов, которые должны быть рассмотрены относящиеся к 1) различных конфигураций устройства e-cig и параметры операции, от которой e-cig пользователи могут выбрать; 2) отсутствие стандартизированных представитель человеческого vaping топографии профилей для использования в экспериментальных параметры22. Это подчеркивает настоятельную необходимость согласования протоколов исследований e-cig, начиная с e-cig аэрозоля поколения и характеристика методов22. Настоящее исследование фокусируется на этот вызов, описывая техника генерации аэрозоля подробные пошаговые e-cig, с конкретными параметрами экспериментальной, считаются реалистичными и представитель сценариев воздействия в реальной жизни. Это исследование также стремится оценить влияние напряжения на e-cig аэрозоля TPM концентрации, как с помощью устройства третьего поколения vaping интегрированы в систему коммерческого воздействия, управляемая компьютером, настроенные для мышей всего тела ингаляции исследования. Описание этот экспериментальный протокол, включая поколения и характеристик аэрозолей, e-cig, может внести вклад в создание представитель стандартизированных e-cig Пыхтящий режимов в лаборатории установки для последующего токсикологические исследования.
Основной вопрос без ответа является ли долгосрочного воздействия аэрозолей e-cig приводит легочной токсичностью. Кроме того общая безопасность e-cigs относительно здоровья человека по-прежнему вызывает споры. В августе 2016 FDA США расширил ее регулирующего органа на всех табачных изделий, включая e-cigs. E-CIG исследования, однако, является трудной и сложной из-за главным образом к 1) отсутствие стандартизированных оценок; 2) широкий спектр устройств (~ 2,800 различных моделей от 466 определенных марок) e-cig24; 3) более 7700 уникальный вкус e жидкость24; 4) различные возможные комбинации увлажнитель соотношений. Учитывая сложность поля, важно, чтобы принять вызов и генерировать звук научных доказательств, что тщательный соображения в экспериментальных условиях и воспроизводимый процессы работают. В настоящем исследовании основное внимание было уделено описание поколения e-cig аэрозоля технику, которая может позволить следователям получить уникальные наборы данных, относящиеся к реалистичного и всеобъемлющего e-cig аэрозоля эффект воздействия сознания. Это могут быть своевременно отношение к безопасности связанных с e-cig адрес или токсичности вопросы для создания правил на e-cig конструктивных особенностей, которые потенциально могут оказывать непосредственное воздействие на политику в области общественного здравоохранения.
В настоящей статье значимого воздействия среды были созданы с помощью компьютеризированной системы возможность интегрировать последнего поколения устройств, e-cig, а также позволяет для стандартных или пользовательских автоматизированных Пыхтящий профилей и множество действующих условия (например., Постоянная мощность источника, стандартные значения сопротивления, напряжения или температур). Эти автоматизированные Пыхтящий профили включают стандартные условия: 55 мл слоеного объем, 3 s слоеного продолжительность, 30 s слоеного интервал и площади слоеного профиля, от «обычной аналитической машины для e сигареты аэрозоля генерации и сбора – определений и стандартов условия «предоставляемые Coresta рекомендуется метод (CRM) N ° 8125 (Таблица 2). Так как система может генерировать различные автоматизированные Пыхтящий профили, также соответствует ISO 20768 (паров продукции – обычные аналитические vaping машина – определения и стандартных условиях)26 -Пыхтящий требования режима. Как ожидается, e-cig Пыхтящий режим стандартных условий контраст с теми из ISO 330827, который определяет стандартные условия для курения сигарет машин (объем слоеного 35 мл, 2 s слоеного продолжительность, 60 s слоеного интервал и Белл слоеного профиль). Эти различия между моделей курения сигарет и e-cig vaping моделей среди пользователей являются хорошо организованной28. В настоящем исследовании, примеры и данные показывают, что аэрозолей, образующихся из этой системы и устройства третьего поколения e-cig с регулируемым напряжением производят высокие концентрации TPM достигнув до 0,27 и 0,82 мг на 55 и 70 мл слоеного, соответственно. E-cig аэрозолей на эти концентрации были собраны сразу после экспозиции камеры (Таблица 1-2, рис. 5). Результаты также показывают, что есть больше чем 160-fold разница в массы твердых частиц на слоеное производится с напряжение колеблется от 1,8 до 4.8 V (Таблица 1). Этот диапазон напряжения является характеристикой параметры работы e-cig устройств на рынке США, которые позволяют для приложения напряжения от 2,9 до 5,2 V29. Результаты также согласуются с ранее опубликованных данных18,21 , где высокий уровень TPM, собранных на выходе генератора e-cig поступили аналогичные топографии профилей (1,4 до 5,8 мг/слоеные). Важнейшие шаги в рамках Протокола включают в себя добавление нескольких капель э-жидкости до атомайзера до начала каждой сессии воздействия для обеспечения) что производится не сухой ожогов; b) e жидкость доступен в цистерне в течение всей продолжительности воздействия; и убедитесь, что e-cig аэрозоля генерируется, как ожидалось, регулярные замеры на устройство измерения в реальном времени концентрации. Хорошо известно, что e-cig пользователи пытаются избежать сухих затяжек, которые происходят в условиях сухого сжечь. Это условие vaping имеет отношение к формированию высоких уровней альдегидов, включая формальдегид, известный канцероген и дыхательных токсиканта в13,30. Таким образом допуская это состояние во время воздействия имеет решающее значение. Наконец с точки зрения воздействия никотина, мышей подвергается e-cig аэрозолей из 36 мг/мл никотина содержащих e жидкость для 2 ч в день за 28 дней (уровни 0,12 мг/слоеные) представил концентрации котинина в сыворотке 91 нг/мл (рис. 8); уровень аналогичен сигарет курильщиков (> 100 нг/мл)31,32,33, которая даже ниже, чем у обычных e-cig пользователи (средний слюны котинина 252 нг/мл)34. В исследовании топографии vaping было сообщено, что 235 было максимальное количество затяжек в день, принятые e-cig пользователи35,36. Это очень похоже на нашей экспозиции профиль производства 1 слоеного каждые 30 сек для 2-х в день (в общей сложности 240 слойки). Таким образом этот профиль рельефа vaping модели, e-cig пользователи ежедневно слоеного потребления и поведение.
За последнее десятилетие e-cig устройства эволюционировали от первого поколения, сигарет как, одноразового использования, маломощных устройств, второе поколение съемных и многоразового танк стиль устройств и теперь устройства третьего поколения танк стиль с настраиваемым есть24 для сопротивление катушки 1 распылитель: элемент отвечает за Отопление e жидкость и 2 Регулятор мощности, которая) может работать на различных напряжений, b) влияет на температуру нагревательного элемента и c) определяет ли или не Температура кипения раствора достиг24,37. Во время использования e-cig e жидкость обычно нагревается на 200 ° C или более38, и это в форме аэрозоля, ее компоненты взаимодействуют с биологической матрицы. Таким образом характеристика e-cig аэрозолей чрезвычайно важна. E-жидкости растворителей отличаются неустойчивостью таким образом, что решения состоит в основном из PG (70%), которые являются менее вязкой и испаряются в нижней температуры37, создавать аэрозолей с относительно более мелкие частицы, которые увеличивают пользователей «горло хит» 20. С другой стороны, на основе VG е жидкостей aerosolize выше температуры37 и создавать аэрозолей с относительно более крупные частицы, которые, от пользователей, увеличивает флейвор и количество пара5, 17,39. Таким образом ранее было установлено, что соотношение PG/VG e-жидкости влияет на распределение по размерам частиц, присутствующих в e-cig аэрозоля19,20. Как показано на рисунке 5, используя e жидкость состоит из равного соотношения PG/VG, e-cig аэрозолей с средний диаметр ~ 100 Нм были получены. Эти результаты являются в том же диапазоне, как сообщает Baassiri, и др. 20. Это свидетельствует о том, что в дополнение к основанию e жидкость, параметры экспозиции, включая e-cig действующих параметров (сопротивление, напряжения и мощности) и пыхтя профиля, могут влиять на физические характеристики аэрозолей, производства. Кроме того никотина и вкусовые добавки химических веществ, добавленных к основанию e жидкость также может потенциально повлиять на физико-химических свойств аэрозолей e-cig. Ранее было показано, что e жидкость, которая менее вязкой производит аэрозоль состоит из тонких частиц, что приводит к менее плотной паров, уступая ниже концентрация TPM17. Используя такое же соотношение PG/VG для обоих е жидкостей испытания, e жидкость содержащая 36 мг/мл никотина и корица ароматизатор химических, подразумевая, что это более разбавленного чем только основанию e жидкость (PG/VG + никотина + Корица вкус по сравнению с PG/VG только), появился менее вязкая, чем e жидкость состоит исключительно из PG и VG. Очевидно, разница в вязкости между двумя e жидкости может объяснить различия в массы слоеного, полученные при равных e-cig vaping параметры (Таблица 2). Однако Нижняя TPM может не коррелируют с менее вредных аэрозолей, так как распределение частиц по размерам и химических характеристик аэрозолей необходимо также учитывать. Действительно термической деструкции VG и химического взаимодействия компонентов e жидкость производят выбросы вредных альдегидов, в том числе формальдегида и ацетальдегид, известный быть мощным угроз для здоровья человека15,17 ,40. Как указано в таблице 3, химический анализ, e-cig аэрозоля, здесь производится показал, что он также содержит акролеина, monochlorophenol и катехол бензотиазол. Известны все дыхательные раздражители, в то время как катехол дополнительно классифицируется как возможно канцерогенное для человека (группа 2B) по данным Международного агентства по исследованию рака (МАИР)41,42,43 . Это добавляет эффекты, связанные с химии вкусового вещества включены в e жидкость. К примеру Коричный альдегид и Диацетил, два вкус и извлечь ассоциации производителей высокоприоритетных ароматизатор химических веществ для дыхания опасности, при вдыхании работниками, показали нарушить функцию легких и вызвать необратимые легких повреждений ( облитерирующий бронхиолит, а именно «попкорн легких»)44. Коричный альдегид было показано, быть высоко цитотоксических в vitro45,46,47 и очень популярен в e жидкости48. В текущем исследовании присутствие оксима было определено в e-cig аэрозоля от Корица приправленный e жидкость (Таблица 3 и рис. 7). В целом это свидетельствует о необходимости анализа e-cig аэрозолей, физических и химических характеристик.
Как упоминалось выше, метод воздействия описанных здесь может быть весьма разносторонни. Это может позволить для изменения режима Пыхтящий (через программное обеспечение), особенностей эксплуатации устройства e-cig или даже тип экспозиции камеры (только для носа и всего тела) (через аппаратное обеспечение). Это обеспечивает следователь с гибкостью адаптировать или изменить экспериментальных условиях потребности каждого исследовательского проекта. Устранение неполадок Этот метод включает в себя обеспечение того, что связь между e-cig конденсатора, трубы, насосы и палат надлежащим образом защищены, и что все камеры правильно загерметизированы (для более подробной информации обратитесь к руководству пользователя). Как отметил и испытаны в этом исследовании, целый ряд факторов может влиять e-cig аэрозоля производства и состава22. Эти факторы связаны с соотношения и составляющих разработки e жидкость, которая воздействие химического компонента аэрозолей, а также выбранных e-cig характеристиками устройства и операции настройки, которые влияют на условия Отопление используется для aerosolize e жидкость и таким образом состав, а также физический компонент аэрозоля. E-жидкости состоят из гра пищевых добавок, однако, их безопасность, после Отопление и аэрозолизации установлено не было. Самое главное e-cig пользователи вдыхать эти аэрозоли и контролировать Пыхтящий профиль, а также выбор e жидкость и параметры (сопротивление и напряжения) работы их устройств e-cig. Они являются ключевыми факторами, которые могут существенно повлиять на выбросы аэрозолей e-cig и должны поэтому тщательно контролируется и сообщил в экспериментальных исследованиях.
Как наиболее экспериментальные методы метод воздействия нынешнего e-cig имеет преимущества и ограничения. В то время как универсальный и хорошо подходит для токсикологических исследований, он также известен что мышей нос дренажные и что облучения всего тела может также предусматривать дермы и устные поглощения помимо ингаляционного воздействия маршрут. Преимущества и недостатки использования всего тела и нос только ингаляционного воздействия были описаны подробно в другом месте5049,. В то время как только нос воздействия более тесно имитировать вдохновение/истечения шаблонов, определяющих переноса и осаждения частиц в дыхательных путях, этот режим экспозиции более напряженным для животных и не является адекватным для долгосрочного ингаляции исследования с использованием большого числа животных49. Кроме того исследования, которые сравнивали всего тела и нос только воздействия на грызунов, предоставляемые ингаляции же токсикант на тех же условиях воздействия (TiO2 наночастиц, сигаретный дым) нашли не статистическая разница между теми, кто два режима воздействия осаждения частиц легких и легких ответов50,51. Поскольку последствия, вызванные хронического воздействия аэрозолей e-cig основном недокументированный и под расследование, e-cig воздействия системы, описанной в этой рукописи полезен для преодоление этого разрыва в знаниях. Кроме того машина vaping устройства третьего поколения, используемые в данном исследовании ориентирован в горизонтальной конфигурации. Существует возможность, что ориентации устройства может иметь влияние на производстве аэрозолей; Однако в меру наших знаний, для устройств третьего поколения e-cig, ориентации переменная не проверены ранее. Горизонтальная ориентация является предпочтительной позиции для начинающих пользователей e-cig. Это способствует более влагу и минимизирует риски утечки e жидкость. Таким образом горизонтальной ориентации представитель vaping поведения населения, e-cig пользователей и был использован в других исследовательских группы21. Важно также отметить, что власти, отображается на устройстве e-cig может немного отличаться от фактического питания устройства22,52, и что поэтому она также может быть целесообразным для измерения значений мощности питания внешне или используйте проводные питания для стабильных поставок энергии.
Есть существенные исследования и разрыв в знаниях для биомаркеров токсичности, связанных с долгосрочным воздействием аэрозолей, e-cig. Эта система воздействия представляет собой шаг вперед в этой области, позволяя следователям для определения последствий долгосрочного воздействия ингаляции животных жидкость аэрозольных e-cig. Другие существующие методы воздействия e-cig также имеют возможность для изучения воздействия пыхтя режим управления и настройки устройств e-cig токсикологических19,20,22,53 . Эти воздействия системы будет способствовать созданию научных доказательств для будущих правил о новой альтернативной табачной продукции. В конечном счете, хорошо провели и подходящих токсикологические исследования помогут лучше информировать директивные органы, медики и 9 миллионов американцев, которые являются e-cig пользователи4. Самое главное следует избегать воздействия систем, которые не воспроизводить vaping реальных сценариев. E-жидкости обычно нагревается на 200 ° C или более температура38 в устройство e-cig, поэтому сценарии, где e жидкость просто распыляются, или нагревается до 37 ° C и затем распылению8, должен рассматриваться как представитель e-cig пользователи потребление. В настоящее время e-cig потребителей может достигать потенциально вредных e-cig составные уровни аэрозоля с помощью конструктивных особенностей устройства третьего поколения e-cig, которые позволяют для регулировки отличительные Отопление условий через изменения в Атомайзер катушки сопротивление и напряжения батареи. Таким образом более экспириментально исследования необходимы для определения здоровья эффекты связанные с хронического ингаляционного воздействия аэрозолей e-cig. Это начинается с создания воспроизводимых и стандартизированных e-cig воздействия систем25,26. Таким образом имея разносторонний e-cig воздействия системы, которая позволяет для широкого спектра сценариев воздействия, включая автоматические представитель vaping топографии профили, является активом для проведения экспериментальных исследований.
The authors have nothing to disclose.
Этот проект получил поддержку от губернатора Луизианы биотехнологии инициатива GBI-бор #013 Грант (AP), а также Университет штата Луизиана, школа ветеринарной медицины факультета начальных средств ().
inExpose complete solution – for electronic cigarette aerosol delivery to a 5L whole-body chamber, including eVic-VTC Mini (e-cig device, Joyetech) | SCIREQ Scientific Respiratory Equipment Inc. | ||
flexiWare software | SCIREQ Scientific Respiratory Equipment Inc. | FW8 | |
Computer | Dell | Core 2 Duo | |
Tygon | Tygon | R-3603 | |
MicroDust Pro | Cassella | 176000A | |
Personal sampling pump | Sensidyne | Gilian BDX II | |
Glass fiber filter | Millipore | AP4002500 | |
Sampling cassette | Made in house | ||
Flow meter | TSI Inc. | 4100 series | |
Electronic cigarette liquid (e-juice) | Local vape shop | ||
Scanning mobility particle sizer | TSI Inc. | 3080 | |
Microbalance | Sartorius | MC5 Micro Balance |