Summary

Medición activa y pasiva mansedumbre por separado en ratones

Published: August 10, 2018
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Summary

Mansedumbre de los animales incluye una reducción de las respuestas de evitación a los seres humanos (mansedumbre pasiva) y un aumento en enfoques activos a los seres humanos (mansedumbre activo). Aquí, describimos protocolos detallados para tres pruebas conductuales (mansedumbre activa pasiva mansedumbre y pruebas de estancia-la-mano) para medir por separado la mansedumbre activa y pasiva de los ratones.

Abstract

Animales domésticos como perros y ratones de laboratorio demuestran un alto nivel de mansedumbre, que es importante para los seres humanos manipularlos fácilmente. Mansedumbre tiene dos componentes conductuales: renuencia a evitar los seres humanos (mansedumbre pasiva) y una motivación a los seres humanos de enfoque (mansedumbre activo). Para cuantificar estos componentes en los ratones, previamente desarrollamos pruebas de comportamiento para mansedumbre activa, pasiva mansedumbre, y la voluntad de permanecer en una mano humana, cada uno diseñado para completarse en 3 minutos. Los datos obtenidos fueron utilizados para la cría selectiva, con un gran número de ratones analizados por generación. La prueba de mansedumbre activo mide el movimiento del ratón a una mano humana y el contacto a que se dedica. La prueba de mansedumbre pasiva mide la duración de tiempo que un ratón tolera el toque humano. En la prueba de la estancia-la-mano, un ratón se coloca en una mano y tocó lentamente usando el pulgar de la mano; se mide la duración de tiempo que el animal permanece en la mano. Aquí, describimos la prueba instalación y aparatos, explicar los procedimientos y discutir el análisis de datos apropiado. Por último, explicamos cómo interpretar los resultados.

Introduction

Cría selectiva durante la domesticación ha cambiado las características de los animales domesticados que estén mejor adaptadas para vivir con los seres humanos1,2,3. “Mansedumbre” es un rasgo común de comportamiento observado en animales domesticados. Los estudios de cría selectiva para mansedumbre en animales revelan cómo han cambiado sus fenotipos en el curso de domesticación. En un estudio famoso, zorros fueron criados selectivamente para la mansedumbre y un grupo de zorros que exhibió un alto nivel de mansedumbre fue establecido2. Los zorros también mostraron otros cambios del fenotipo entre morfología, reproducción, color de la capa y características fisiológicas. Mansedumbre en ratones de cría selectiva, un animal de laboratorio populares, puede ayudar a revelar el mecanismo subyacente del cambio en una variedad de fenotipos durante la domesticación.

Mansedumbre tiene dos componentes conductuales: enfoques activos a los seres humanos (mansedumbre activo) y una reducción de la evitación de los seres humanos (pasiva mansedumbre)4. En un estudio anterior, establecimos tres pruebas conductuales para caracterizar los niveles de mansedumbre en ratones: mansedumbre activa pasiva mansedumbre y estancia en mano las pruebas de5. La primera prueba fue diseñada para cuantificar mansedumbre activo del ratón mediante la medición de la latencia de su actitud espontánea hacia un ser humano y el tiempo de permanencia en contacto con una mano humana. La segunda prueba fue diseñada para cuantificar la mansedumbre pasiva midiendo cuánto tiempo un ratón tolerado ser tocado por una mano humana. La prueba de estancia en mano pretendía cuantificar la evitación conductual de ser acarició suavemente por una mano humana. Estas tres evaluaciones requieren sólo un aparato de campo abierto, una cámara digital y un par de grandes pinzas. Ellos pueden completarse secuencialmente dentro de 3 minutos, lo que permite una gran cantidad de datos a ser recogidos por día.

En el estudio anterior, caracteriza y compara conductas de mansedumbre utilizando una serie de cepas consanguíneas de ratón: 10 variedades silvestres, una japonesa lujo derivado de ratón cepa y laboratorio seis cepas5. Más domesticaron cepas mostraron una significativamente mayor mansedumbre pasiva de variedades silvestres, pero la mansedumbre activo no difirió entre los dos grupos. De estos resultados, se concluye que los ratones domésticos que son los fundadores de las cepas de laboratorio predominante fueron seleccionados por su mansedumbre pasiva, pero no para activo mansedumbre, en su historia de crianza.

A continuación realizamos una cría selectiva con ocho cepas de ratón salvaje para generar una población genéticamente heterogénea6. Elegimos los animales que anotaron alto en la prueba de mansedumbre activo y con éxito creciente su mansedumbre activo en generaciones sucesivas, en comparación con un grupo control. Este resultado indica que las pruebas medir fiablemente la mansedumbre en ratones.

Aquí, describimos el método integral para la medición de índices de comportamiento usando las tres pruebas de comportamiento. En primer lugar, se explican la instalación y aparatos necesarios. A continuación, detallamos el procedimiento paso a paso para el funcionamiento de los experimentos, recogida de datos a través de video y análisis de dichos datos utilizando el software gratuito que desarrollamos. Por último, mostramos resultados representativos, comparando el grupo de ratones criados selectivamente con un grupo control.

Protocol

Todos los experimentos fueron realizados siguiendo las directrices de los experimentos con animales del Instituto Nacional de genética (NIG), y todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité de NIG para cuidado de animales y el uso (homologación Nº 26-9). 1. los animales Cría selectiva Crear derivados salvajes heterogéneos stock (WHS)6 ratones, cruzando 8 cepas consanguíneas (MSM, HMI, BLG2, PGN2, KJR, CHD, NJL y BFM…

Representative Results

Previamente realizamos una cría selectiva para mansedumbre activo en miceandsuccessfully producida ratones que mostraron un alto nivel de mansedumbre activo6. Los resultados representativos de la mansedumbre en figura 4se muestran las pruebas para los grupos seleccionados y no seleccionados de ratones enla generación 15 (G15) . Ratones de grupo puntuaron más en la prueba de mansedumbre activo, exhibiendo una duración sig…

Discussion

Resultados representativos cubren nueve índices de comportamiento de la mansedumbre activa pasiva mansedumbre y pruebas de estancia-la-mano. Una comparación de las puntuaciones entre el seleccionado y los grupos de control revelaron claras diferencias en mansedumbre. Estos resultados muestran que las tres pruebas son válidas para medir la mansedumbre en ratones.

Niveles de mansedumbre en los animales pueden ser difíciles de cuantificar empíricamente. Varios métodos han sido desarrollados…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue financiado por subvenciones para la investigación científica (KAKENHI) como sigue: 15H 05724, 01491 de 16H y 15H 04289.

Materials

open-field apparatus O’Hara & Co. Ltd. OF-3102 400×400×400 mm, grayish polyvinylchloride
compact digital camera Ricoh Company, Ltd. CX-5 production in the company is over
latex pure gloves AS ONE BioLab, IKG-8002
stopwatch SEIKO SSBJ018
Iodophor sanitizer Ecolab G.K. (CLEA Japan) CL-4123 Mikro Klene

Referências

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Citar este artigo
Nagayama, H., Matsumoto, Y., Tanave, A., Nihei, M., Goto, T., Koide, T. Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice. J. Vis. Exp. (138), e58048, doi:10.3791/58048 (2018).

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