神経変性疾患は毎年数百万人に影響を与えるし、高齢化人口¹の発生率が増加しています。各神経変性疾患では、ユニークな病因を持っているが、誤って折りたたまれたタンパク質の凝集およびプロテオステイシス ネットワークの内訳は、これらの疾患の多くの共通の病理学的特徴です。これらの基礎的かつ相互に関連するプロセスの中断がゆがんで行く方法を解明神経の機能不全や細胞の死に貢献する治療上の介在を導くと同様、神経変性疾患を理解することにとって重要です。蛍光ベースのイメージング ニューロンにおけるこれらの複雑で動的なプロセスの調査と神経細胞生物学の私達の理解に大きく貢献しています。蛍光付けられた蛋白質の分析は挑戦的な特に実験生体内で、コンパクトな組織、多様な細胞の種類、形態の多様性などを行った。手動でアシスト定量化手頃な価格と簡単な多くの場合時間がかかり、人間バイアスの対象です。したがって、イメージング研究から定量データを抽出するための公平な再現性のある、そしてアクセスのアプローチの必要性があります。

蛍光イメージング研究の実験モデルから定量的なデータを抽出する強力で自由にアクセスできる画像処理ソフトウェア^2,3, フィジー/ImageJ を使用してワークフローをシンプルかつ適応を概説しました。ショウジョウバエを用いた神経変性疾患。蛋白質の集合とオートファジーのフラックスを定量化するこのプロトコルに従うことによって-2 つのセルの神経変性病に関連性の高い生物学的特徴-感度と再現性このアプローチのデモンストレーションを行った。ショウジョウバエ視葉における蛍光タグ変異ハンチンチン (Htt) タンパク質の解析では、数、サイズ、およびタンパク質凝集体の強度を明らかにしました。⁴コンパートメント環境に応じて異なる発光信号を表示するショウジョウバエ視覚系オートファジー フラックスのタンデム蛍光レポーターを可視化。タンデム記者のレシオ メトリック解析オートファゴソーム形成、成熟およびトランスポート、リソソームで分解するオートファジー ・ リソソーム フラックスの定量的かつ包括的なビューの許可し、脆弱性をさらに強調神経変性条件で破壊のコンパートメント。重要なは、両方の分析我々 はし無意識のバイアスを最小限に抑えるため、サンプリング力を高める同様の研究との比較を容易にする標準プロトコル半自動閾値処理と領域分割の手順が実装されます。簡単なワークフローは強力なフィジー/ImageJ プラグイン (数学的アルゴリズムに基づくコンピューター科学者によって開発された) のためにかと生命科学コミュニティにアクセス可能。