Summary

हत्यारा कीड़े और अंय Heteropteran कीड़ों से विष विषाक्त पदार्थों की कटाई

Published: April 21, 2018
doi:

Summary

हालाँकि उपक्रमों में कई कीड़े Heteroptera (Insecta: Hemiptera) विषैला हैं, उनके विष की संरचना और उनके विष विषाक्त पदार्थों के कार्य अधिकांशतः अज्ञात हैं. इस प्रोटोकॉल आगे लक्षण वर्णन के लिए फसल heteropteran विष के लिए तरीकों का वर्णन, electrostimulation, उत्पीड़न का उपयोग कर, और ग्रंथि विच्छेदन ।

Abstract

हत्यारा कीड़े (Reduviidae) और विशाल पानी बग (Belostomatidae) के रूप में Heteropteran कीड़े एक आम predaceous और विषैला पूर्वज से उतरा, और वर्तमान heteropterans के बहुमत इस पौष्टिकता रणनीति बनाए रखने । कुछ heteropterans हड्डीवाला रक्त (जैसे चुंबन कीड़े, Triatominae के रूप में, और बिस्तर कीड़े, Cimicidae) पर खिलाने के लिए संक्रमण है, जबकि दूसरों को पौधों (सबसे Pentatomomorpha) पर खिलाने के लिए वापस आ गया है । हालांकि, रक्त खिलाने की सुविधा के लिए कीड़े चुंबन द्वारा इस्तेमाल लार के अपवाद के साथ, छोटे मकड़ियों, बिच्छू और सांप के विष की तुलना में heteropteran विष के बारे में जाना जाता है ।

heteropteran विष विषाक्त पदार्थों के लक्षण वर्णन करने के लिए एक बाधा संरचना और विष के समारोह/ओष्ठ ग्रंथियों, जो दोनों आकृति विज्ञान जटिल हैं और कई जैविक भूमिकाओं (रक्षा, शिकार पर कब्जा, और अतिरिक्त मौखिक पाचन) प्रदर्शन कर रहे हैं । इस अनुच्छेद में, हम हम सफलतापूर्वक heteropteran विष इकट्ठा करने के लिए उपयोग किया है तीन तरीकों का वर्णन । सबसे पहले, हम एक सुविधाजनक तरीका है विष है कि अक्सर घातक है जब शिकार जानवरों में इंजेक्शन इकट्ठा करने के रूप में प्रस्तुत electrostimulation, और जो ग्रंथियों ऊतक द्वारा obviates संदूषण । दूसरा, हम बताते है कि पशुओं की कोमल उत्पीड़न सूंड और/या heteropterans के कुछ समूहों में विष थूकना से विष बाहर निकालना उत्पादन करने के लिए पर्याप्त है । तीसरा, हम विष ग्रंथियों को प्राप्त करने के लिए anaesthetized पशुओं के विच्छेदन से विष विषाक्त पदार्थों को फसल के लिए तरीकों का वर्णन । यह विधि अन्य विधियों के पूरक है, क्योंकि यह taxa से विषाक्त पदार्थों की कटाई की अनुमति दे सकता है जिसमें electrostimulation और उत्पीड़न अप्रभावी हैं । इन प्रोटोकॉल शोधकर्ताओं संरचना के लिए heteropteran कीड़ों से विषाक्त पदार्थों की फसल के लिए सक्षम हो जाएगा-समारोह लक्षण वर्णन और चिकित्सा और कृषि में संभव अनुप्रयोगों ।

Introduction

Heteropteran विष प्रबल रूप से सक्रिय पदार्थ हैं1. उदाहरण के लिए, इस तरह के कीड़े चुंबन (Triatominae) और बिस्तर कीड़े (Cimicidae) के रूप में रक्त खिला Heteroptera के विष/लार स्राव रक्तस्तम्भन2को बाधित करके खिलाने की सुविधा । इन विष में विषाक्त पदार्थों जमावट, प्लेटलेट एकत्रीकरण और वाहिकासंकीर्णन, साथ ही दर्द और खुजली रास्ते सहित कई रास्ते लक्ष्य । अधिकांश अंय heteropteran प्रजातियों में से विष को predation की सुविधा के बजाय खून पिलाने के लिए अनुकूलित कर रहे हैं । उनके विष के कारण पक्षाघात, मृत्यु और ऊतक द्रवीकरण जब अकशेरूकीय3,4में इंजेक्शन । जब रीढ़ में इंजेक्ट किया जाता है, उनके विष भी कठोर प्रभाव हो सकता है । उदाहरण के लिए, हत्यारा बग से विष के इंजेक्शन रीढ़ में Holotrichius innesi का कारण बनता है दर्द, मांसपेशियों में पक्षाघात और नकसीर; चूहे इस बग से envenomated श्वसन पक्षाघात के कारण जल्दी मर जाते हैं5.

Transcriptomic और proteomic अध्ययनों से कुछ heteropteran विष की प्रोटीन रचना का पता चला है. predaceous प्रजातियों के विष को छेड़ने में अमीर हैं, अन्य एंजाइमों, और पेप्टाइड्स और अज्ञात संरचना और समारोह के प्रोटीन6,7,8. चुंबन बग विष triabin प्रोटीन परिवार में समृद्ध है, जिसके सदस्यों को जमावट, प्लेटलेट एकत्रीकरण, और वाहिकासंकीर्णन2,9को प्रभावित करता है । हालांकि, यह ज्ञात नहीं है जो विषाक्त पदार्थों आबाद विष की सबसे अधिक गतिविधियों । उदाहरण के लिए, चुंबन बग Triatoma infestans के विष के लिए एनाल्जेसिक और सोडियम चैनल10बाधित होने की सूचना दी गई है, लेकिन जिम्मेदार घटकों का आविर्भाव होने के लिए रहते हैं. इसी तरह, यह ज्ञात नहीं है क्या घटक (ओं) हत्यारा बग विष के कारण पक्षाघात या दर्द. विशेष रूप से विष की गतिविधियों के लिए जिंमेदार विषाक्त पदार्थों की पहचान के लिए एक शर्त है, और संरचना और उपंयास विष विषाक्त पदार्थों के समारोह निस्र्पक के लिए, विष प्राप्त है ।

विष electrostimulation द्वारा heteropterans से प्राप्त किया गया है5,6,7,8,11,12,13, रक्षात्मक का आव्हान प्रतिक्रियाएं4,8, यांत्रिक रूप से फैलाएंगे छाती12,14,15,16, बाहर विष ग्रंथियों को विदारक8,17 ,18,19,20,21,22, और मस्करीनिक acetylcholine रिसेप्टर के एगोनिस्ट का आवेदन23. संभावित फायदे और नुकसान को देखते हुए किसी भी विधि के heteropteran विष ग्रंथियों की आकृति विज्ञान द्वारा जटिल है, जो दो अलग लुमेन के साथ एक मुख्य ग्रंथि से मिलकर बनता है, पूर्वकाल मुख्य ग्रंथि (AMG) और पीछे मुख्य ग्रंथि (पीएमजी), के रूप में के रूप में अच्छी तरह से एक संबद्ध गौण ग्रंथि (एजी) । ये अलग ग्रंथि डिब्बों अलग प्रोटीन स्राव, जो शिकार कब्जा, रक्षा और अतिरिक्त मौखिक पाचन8,17सहित विभिंन जैविक कार्यों के लिए विशेष हो सकता है उत्पादन । peiratine और ectrichodiine हत्यारा कीड़े में, AMG शिकार पर कब्जा और अतिरिक्त मौखिक पाचन के साथ पीएमजी17के साथ जुड़ा हुआ है । हालांकि, harpactorine बग Pristhesancus plagipennis में पीएमजी शिकार पर कब्जा और पाचन के लिए विशेष है, जबकि AMG रक्षात्मक विष8स्रावित करने के लिए परिकल्पना है । एजी हत्यारा कीड़े में छोटे स्रावी समारोह8 या विशाल जल कीड़े23में छेड़ने के भंडारण के एक प्रमुख स्थल के रूप में होने के रूप में वर्णित किया गया है । जाहिर है, आगे काम के लिए विभिंन heteropteran उपसमूह के बीच प्रत्येक ग्रंथि डिब्बे के समारोह स्पष्ट की आवश्यकता है, और सबसे विष विषाक्त पदार्थों के समारोह का निर्धारण । इस रिपोर्ट में हम इस लक्ष्य की ओर heteropterans से विष विषाक्त पदार्थों की कटाई के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन ।

Protocol

इस प्रोटोकॉल के क्वींसलैंड की नीति के विश्वविद्यालय के साथ अनुपालन जिंमेदार देखभाल और शिक्षण और अनुसंधान में पशुओं के उपयोग (पीपीएल 4.20.11) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से राष्ट्रीय स्वास्थ्य और चि?…

Representative Results

कुछ heteropteran प्रजातियों, जैसे harpactorine P. plagipennis और reduviine Platymeris rhadamanthus, मज़बूती से µ (तालिका 1) के उत्तर में विष की बड़ी मात्रा (5-20 electrostimulation l) उपज । सामांय में, सबसे peiratine, reduviine, और harpactorine कीड़े उपज विष इस विधि …

Discussion

हत्यारा बग विष फसल में सबसे महत्वपूर्ण कदम अध्ययन के प्रयोजनों के आधार पर उपयुक्त विधि का चयन है । तीन heteropteran विष संचयन के लिए प्रस्तुत तरीकों में से प्रत्येक के बहाव अनुप्रयोगों के आधार पर फायदे और नुकस?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

हम ऑस्ट्रेलियाई अनुसंधान परिषद से वित्तीय सहायता स्वीकार करते है (अनुदान DP130103813 और LP140100832 को G.F.K., DECRA फैलोशिप DE160101142 को EABU), ऑस्ट्रेलियाई राष्ट्रीय स्वास्थ्य एवं चिकित्सा अनुसंधान परिषद (प्रिंसिपल रिसर्च फैलोशिप APP1044414 to G.F.K.), और ब् लैक यूनिवर्सिटी (Postdoctoral फेलोशिप टू A.A.W.) ।

Materials

Electostimulator Grass Technologies S48 Square Pulse Stimulator Electrostimulator allowing pulsed electrostimulation
Featherlight tweezers Australian Entomological Supplies E122B For handling live venomous insects
Protease inhibitor cocktail Sigma 4693124001 For preventing autoproteolytic digestion of venom
Dissection equipment Australian Entomological Supplies E152Micro For fine dissections
Insect pins Australian Entomological Supplies E162 For fine dissections

Referências

  1. Walker, A. A., Weirauch, C., Fry, B. G., King, G. F. Venoms of heteropteran insects: A treasure trove of diverse pharmacological toolkits. Toxins. 8 (2), 43 (2016).
  2. Ribeiro, J. M. C., Assumpção, T. C., Francischetti, I. M. B. An insight into the sialomes of bloodsucking Heteroptera. Psyche (Stuttg). 2012, 1-16 (2012).
  3. Ambrose, D. P., Maran, S. P. M. Quantification protein content and paralytic potential of saliva of fed and prey deprived reduviid Acanthaspis pedestris Stål (Heteroptera: Reduviidae: Reduviinae). Indian Journal of Environmental Science. 3 (1), 11-16 (1999).
  4. Edwards, J. S. The action and compostion of the saliva of an assassin bug Platymeris rhadamanthus Gaerst. (Hemiptera, Reduviidae). Journal of Experimental Biology. 38, 61-77 (1961).
  5. Zerachia, T., Bergmann, F., Shulov, A., Kaiser, E. . Animal and Plant Toxins. , 143-146 (1973).
  6. Walker, A. A., Hernández-Vargas, M. J., Corzo, G., Fry, B. G., King, G. F. Giant fish-killing water bug reveals ancient and dynamic venom evolution in Heteroptera. Cellular and Molecular Life Sciences. , (2018).
  7. Walker, A. A., et al. Giant fish-killing water bug reveals ancient and dynamic venom evolution in Heteroptera. Cell. Mol. Life Sci. , (2018).
  8. Walker, A. A., et al. The assassin bug Pristhesancus plagipennis produces two distinct venoms in separate gland lumens. Nature Communications. 9 (1), 755 (2018).
  9. Hernández-Vargas, M. J., Santibáñez-López, C. E., Corzo, G. An insight into the triabin protein family of American hematophagous reduviids: Functional, structural and phylogenetic analysis. Toxins. 8 (2), 44 (2016).
  10. Dan, A., Pereira, M. H., Pesquero, J. L., Diotaiuti, L., Beirao, P. S. Action of the saliva of Triatoma infestans (Heteroptera: Reduviidae) on sodium channels. Journal of Medical Entomology. 36 (6), 875-879 (1999).
  11. Corzo, G., Adachi-Akahane, S., Nagao, T., Kusui, Y., Nakajima, T. Novel peptides from assassin bugs (Hemiptera: Reduviidae): isolation, chemical and biological characterization. FEBS Letters. 499 (3), 256-261 (2001).
  12. Sahayaraj, K., Kumar, S. M., Anandh, G. P. Evaluation of milking and electric shocks for venom collection from hunter reduviids. Entomon. 31 (1), 65-68 (2006).
  13. Silva-Cardoso, L., et al. Paralytic activity of lysophosphatidylcholine from saliva of the waterbug Belostoma anurum. Journal of Experimental Biology. 213 (19), 3305-3310 (2010).
  14. Noeske-Jungblut, C., et al. Triabin, a highly potent exosite inhibitor of Thrombin. Journal of Biological Chemistry. 270 (48), 28629-28634 (1995).
  15. Noeske-Jungblut, C., et al. An inhibitor of collagen-induced platelet aggregation from the saliva of Triatoma pallidipennis. Journal of Biological Chemistry. 269 (7), 5050-5053 (1994).
  16. Sahayaraj, K., Borgio, J. F., Muthukumar, S., Anandh, G. P. Antibacterial activity of Rhynocoris marginatus (Fab.) and Catamirus brevipennis (Servile) (Hemiptera: Reduviidae) venoms against human pathogens. Journal of Venomous Animals and Toxins Including Tropical Diseases. 12 (3), 487-496 (2006).
  17. Haridass, E. T., Ananthakrishnan, T. N. Functional morphology of the salivary system in some reduviids (Insecta-Heteroptera-Reduviidae). Proceedings of the Indian Academy of Sciences. Animal Sciences. 90 (2), 145-160 (1981).
  18. Maran, S. P. M., Ambrose, D. P., Ignacimuth, A., Sen, A., Janarthanan, S. . Biotechnological Applications for Integrated Pest Management. , 125-131 (2000).
  19. Maran, S. P. M., Selvamuthu, K., Rajan, K., Kiruba, D. A., Ambrose, D. P., Ambrose, D. P. . Insect Pest Management, A Current Scenario. , 346-361 (2011).
  20. Pereira, M. H., et al. Anticoagulant activity of Triatoma infestans and Panstrongylus megistus saliva (Hemiptera/Triatominae). Acta Tropica. 61, 255-261 (1996).
  21. Ribeiro, J. M., Marinotti, O., Gonzales, R. A salivary vasodilator in the blood-sucking bug, Rhodnius prolixus. British Journal of Pharmacology. 101 (4), 932-936 (1990).
  22. Ribeiro, J. M., Schneider, M., Guimarães, J. A. Purification and characterization of prolixin-S (nitrophorin 2), the salivary anticoagulant of the blood-sucking bug Rhodnius prolixus. Biochem Journal. 308 (1), 243-249 (1995).
  23. Swart, C. C., Deaton, L. E., Felgenhauer, B. E. The salivary gland and salivary enzymes of the giant waterbugs (Heteroptera; Belostomatidae). Comparative Biochemistry and Physiology A Molecular & Integrative Physiology. 145 (1), 114-122 (2006).
  24. Rasmussen, S., Young, B., Krimm, H. On the ‘spitting’ behaviour in cobras (Serpentes: Elapidae). Journal of Zoology. 237 (1), 27-35 (1995).
  25. Fink, L. S. Venom spitting by the green lynx spider, Peucetia viridans (Araneae, Oxyopidae). Journal of Arachnology. 12, 372-373 (1984).
  26. Herzig, V. Ontogenesis, gender, molting influence the venom yield in the spider Coremiocnemis tropix (Araneae, Theraphosidae). Journal of Venomous Research. 1, 76-83 (2010).
  27. Sahayaraj, K., Subramanium, M., Rivers, D. Biochemical and electrophoretic analyses of saliva from the predatory reduviid species Rhynocoris marginatus (Fab). Acta Biochimica Polonica. 60 (1), 91-97 (2013).
check_url/pt/57729?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Walker, A. A., Rosenthal, M., Undheim, E. E. A., King, G. F. Harvesting Venom Toxins from Assassin Bugs and Other Heteropteran Insects. J. Vis. Exp. (134), e57729, doi:10.3791/57729 (2018).

View Video