이 절차의 전반적인 목표는 비보에 허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌혈관 장애의 평가 대 한 높은 재현 기법을 제공 하는입니다.
허 혈 성 뇌졸중 vasogenic 대뇌 부 종 및 후속 기본 뇌 손상, 혈액-뇌 장벽 (BBB)의 파괴를 통해 중재 된다 이끌어 낸다. 유발 허 혈 성 뇌졸중 쥐 설립 되었고 BBB의 기능 무결성을 조사 하 비보에 모델로 사용. 허 혈 성 상해 두뇌 샘플에서 에반스 블루 (EB)의 spectrophotometric 감지 소설 치료 modalities의 개발과 연구에 대 한 신뢰할 수 있는 정당성을 제공할 수 있습니다. 이 방법은 재현성 결과 생성 하 고 특별 한 장비를 위한 필요 없이 어떤 실험실에 적용 됩니다. 여기, 선물이 쥐에서 허 혈 성 뇌졸중의 유도 따라 EB의 넘쳐 흐름의 검출에 시각 및 기술 지침.
Vasogenic 뇌 부 종 혈액-뇌 장벽 (BBB) 중단으로 인해 허 혈 성 뇌졸중의 중요 한 합병증 및 뇌졸중 환자1,2에서 생존 율의 주요 결정 요인이 남아 있다. 혈액-뇌 장벽 (BBB)는 뇌 모 세관 내 피 세포 (BCECs)에 의해 형성 된 뚜렷한 혈관 구성 요소 (예: BCECs, pericytes, astroglial, 및 신경 세포3중 꽉 접합)의 구성, 제공 하는 중앙 신경 조직 (CNS) 말 초 혈액 순환4,5사이의 특수 하 고 역동적인 인터페이스. 국 소 빈 혈 reperfusion 상해 등 모욕 BBB의 기능적 무결성을 방해 하 고 궁극적으로 트리거 대뇌 염증 및 기본 뇌 손상 뇌 실질에 순환 하는 백혈구의 침투를 후속으로 이어질 수 있습니다. 6 , 7. 뇌졸중의 발생에 따라 BBB의 부전의 정확한 검출을 위한 동물 모델 필요. 이러한 모델은 새로운 신경 보호 전략을 소개 하 고 기본 병 태 생리 기계 장치 공부에 대 한 매우 중요. 체 외에서 세포 문화 기반 모델 BBB의 높은 개발 하 고 되었습니다 BBB physiopathology8,,910의 분자 연구에 사용. 그럼에도 불구 하 고, vivo에서 동물 모델, 인간의 임상 조건에 비슷한 BBB의 허 혈 성 손상, 생산은 또한 매우 보람 이와. 에반스 블루 (EB)의 넘쳐 흐름의 정량적 검출은 잘 허용 하 고 민감한 기술 평가 BBB 무결성 및 신경 퇴행 성 질환, 허 혈 성 뇌졸중11, 를 포함 하 여 기능에 대 한 사용 되었습니다. 12 , 13 , 14.이 방법은 비용, 재현성, 및 완전히 적용 가능한 모든 실험 실험실에서. 그것의 구현 방사성 트레이 서15 또는 자기 공명 영상 (MRI)16다른 방법에 대 한 필수 구성 요소를 같은 고급 장비를 필요 하지 않습니다. 이 문서에서는, BBB 평가 EB 넘쳐 흐름을 사용 하 여 허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서의 기본적인 기술적 프로세스 포괄적으로 설명 합니다.
지금까지, autoradiography 방사성 추적기24,25, 면역 형광 검사 현미경 검사 법26,27, EB 넘쳐 흐름 기술은20, 의 검출 등 다양 한 방법 23 혈액-뇌 장벽 손상을 평가 하는 데 사용 되었습니다. EB 염료 강력 하 게 혈 청 알 부 민에 바인딩할 수 이며 혈관 누설을 감지 하 고 측?…
The authors have nothing to disclose.
저자는 재정 지원에 대 한 아르다 빌 대학 의료 과학 (아르다 빌, 이란)의 연구에 대 한 부 장관에 게 감사 (No를 부여: 9607).
Isoflurane | Piramal | AWN 34041100 | 20 – 25 °C |
2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride (TTC) | Molekula | 31216368 | 4 years |
Sprague–Dawley rats | Pasture Institute (Tehran, Iran) | 300-350g | |
Evans Blue | Sigma-Aldrich | 314-13-6 | |
Trichloroacetic acid | Sigma-Aldrich | 76-03-9 | 2 years |
Bupivacaine HCl (0.5%) | Delpharm Tours | below 25 °C | |
Bupernorphine | Exir (Iran) | ||
Sodium Carbonate | Sigma-Aldrich | 497-19-8 | |
Sodium chloride | Sigma-Aldrich | 7647-14-5 | |
Di- Sodium hydrogen phosphate | EMD Millipore | 231-448-7 | |
Potassium chloride | Sigma-Aldrich | 7447-40-7 | |
Ethanol | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | |
silicone(Xantopren) | Heraeus | EN ISO 4823 | |
Activator universal plus | Heraeus | 66037445 | |
Micro-Dissecting forceps | Stoelting | 52100-41 | |
Spring Scisors | Stoelting | 52130-00 | |
Operating Scissors | Roboz | 52140-70 | |
Brain matrix | Stoelting | 51390 | |
Anesthesia Machine for Small Animals | | Kent Scientific | SS-01 | |
Power Lab system | AD Instruments | ML880 | |
Laser Doppler flowmeter | AD Instruments | ML191 | |
Heating feed back system | Harvard Appratus | 72-7560 | |
Vascular micro clamp | FineScience Tools | 18055-03 | |
Silk 5-0 suture thread | Ethicon | 682G | |
Ethilon 4-0 suture thread | Ethicon | EH6740G |