S. Cerevisiae 에서 Nsa1의 구조화 되지 않은 영역을 모델링 하는 데 작은 각 x 선 산란 된 x-선 결정학을 결합

리보솜 큰 ribonucleoprotein 기계 모든 살아있는 세포에 있는 단백질으로 번역 하는 mRNA의 필수적인 역할을 수행 하는. 리보솜 속^1,2,,34나 복잡 한 과정에서 생산 되는 2 개의 소 단위 리보솜 구성 됩니다. 진 핵 리보솜 어셈블리 필수 ribosomal 어셈블리 요소^2,,35의 수백의 도움에 의존합니다. Nsa1 (Nop7 관련 1)⁶큰 ribosomal 소 단위 생산에는 진 핵 리보솜 어셈블리 요소 이며 WD-반복으로 알려진 74 (WDR74) 더 높은 유기 체⁷에 포함 된입니다. WDR74 쥐⁸에서 blastocyst 형성에 필요한 것을 보여줘 왔다 그리고 WDR74 발기인은 자주 암 세포⁹에 돌연변이. 그러나, 함수 및 리보솜 어셈블리에 Nsa1/WDR74의 정확한 메커니즘 여전히 크게 불명 하다. 진 핵 리보솜 성숙 하는 동안 Nsa1/WDR74의 역할을 밝히기 시작, 여러 구조 분석 x 선 결정학 및 작은 각 엑스레이 뿌리기 (SAXS)¹⁰를 포함 하 여 수행 했다.

엑스레이 결정학, 핵 자기 공명 (NMR) 분광학, 전자 현미경, 고 SAXS 고분자 구조 공부를 위한 모든 중요 한 기술이 있습니다. 그러나 크기, 모양, 가용성, 및 구조 생물학 메서드는 특정 고분자 최고의 될 것입니다 적합 한 고분자 영향의 안정성, 지 고는 소위 “잡종” 접근 방식을 통해 여러 기술을 결합 한 점점 더 유익한 도구¹¹. 특히 x 선 결정학 및 SAXS 고분자¹²의 구조 결정에 대 한 강력 하 고 상호 보완적인 방법이 있습니다.

결정학 고해상도 원자 구조 작은 분자에서 리보솜와 같은 큰 셀룰러 기계에 이르기까지 제공 하 고 단백질 등의 생물 학적 기능을 이해에서 수많은 혁신을 주도하 고 있다 고분자¹³. 또한, 구조 기반 약물 설계 약물 발견과 개발¹⁴에 중요 한 차원을 추가 하는 계산 방법으로 분자 도킹을 위한 크리스탈 구조의 힘을 하네스 랑. 그것의 광범위 한 적용에도 불구 하 고 유연 하 고 무질서 시스템은 결정학 크리스탈 패킹을 방해 수 있습니다 또는 전자 밀도 지도 완료 수 있습니다 이후 또는 품질의 평가에 도전. 반대로, SAXS 솔루션 기반 및 저해상도 구조적 접근 무질서 루프와 테르미니에서 본질적으로 무질서 단백질^12,,1516에 이르기까지 유연한 시스템을 설명 하 수 이다. 그것은 광범위 한 입자 크기¹²와 호환을 고려, SAXS 작업할 수 있습니다 synergistically 결정학 구조 연구에 의해 해결 될 수 있는 생물 학적 질문의 범위를 확장.

Nsa1는 기능, 하지만 유연한 C-말단 엑스레이 결정학 방법을 의무가 아니다 뒤 체계적인된 WD40 도메인을 포함 하기 때문에 혼합 구조 방식을 위해 적당 하다. 다음은 복제, 표현, 그리고 하이브리드 구조 결정 엑스레이 결정학에 의해에 대 한 S. cerevisiae Nsa1 및 SAXS의 정화에 대 한 프로토콜. 이 프로토콜 순서와 무질서 지역 조합 구성 하는 다른 단백질의 구조 연구에 적응 될 수 있다.