Summary

Prueba de ansiedad Animal en ratas: efectos de bordes de brazo abierto y cerrado brazo pared transparencia en elevado mas Test de laberinto

Published: June 29, 2018
doi:

Summary

Ansiedad-como comportamiento de ratas probadas por el elevado además de laberinto muy varía según el entorno de prueba. Aquí mostramos cómo ajustes del aparato, especialmente estructura del brazo, afectan el comportamiento en el laberinto, y explicamos un protocolo confiable para detectar efectos de las drogas ansiolíticas. Este informe contribuirá a la investigación de la ansiedad.

Abstract

El elevado además de laberinto es un examen de comportamiento para evaluar ansiedad animal en roedores. Aunque esta prueba se aplica extensamente en el campo de la Ciencias del comportamiento, los resultados contradictorios se proporcionan a menudo de diferentes laboratorios. Para identificar las razones de los diferentes resultados, anteriormente nos centramos en brazo características, que diferencian entre los laboratorios, más en particular la presencia/ausencia de repisas a los lados de los brazos abiertos y la transparencia/opacidad de las paredes del brazo cerrado. En un informe anterior, utiliza un contenedor personalizado diseñado para comparar el comportamiento de ratas en diferentes combinaciones de diseños de brazo abierto y cerrado bajo condiciones experimentales idénticos y demostró que las diferencias en características de brazo interfieran en experimental resultados. En breve, abra brazo bordes perceptiblemente creciente ansiedad-como comportamiento en ratas, mientras brazos transparentes también han disminuido este comportamiento. Además, verificó una mayor sensibilidad de detección del efecto de un fármaco ansiolítico en una combinación de brazo abierto no renegociados + brazo cerrada amurallada opaco en comparación con una combinación de brazo abierto renegociado + brazo cerrado pared transparente. En este informe, presentamos nuestro protocolo para el elevado más prueba del laberinto, junto con discusión de los resultados claves del informe anterior y nuestra experiencia experimental. Creemos que este informe proporcionará información útil para los investigadores que han utilizado o que planean usar el elevado además de laberinto en sus estudios.

Introduction

Está aumentando el número de pacientes que sufren de trastornos del ánimo, incluyendo trastorno de ansiedad y depresión. Aunque el desarrollo de estos trastornos intervienen factores genéticos y ambientales, los mecanismos patogénicos detallados aún no están completamente comprendidos1. Por lo tanto, la investigación debe centrarse en descubrir los mecanismos subyacentes de los trastornos del estado de ánimo, así como el desarrollo de medicamentos eficaces que tienen menos efectos secundarios.

Comportamiento de animales de laboratorio son útiles para investigar la función superior del cerebro, incluyendo la emoción. Comportamiento de los animales es muy variable, los resultados experimentales a menudo difieren entre laboratorios, aunque una cepa consanguínea idéntica fue utilizado2. Así, los investigadores también deben comprender las características básicas de los dispositivos experimentales que adoptan con el fin de proporcionar resultados fiables y precisos en el laboratorio.

El elevado plus prueba de laberinto fue establecido originalmente para examinar la reactividad emocional en roedores3,4. Todo el aparato es generalmente situado 500 mm sobre el piso y consiste en abrir dos y dos brazos cerrados que hacen de una forma más. Medidas de la exploración de brazo (incluyendo la duración y frecuencia de entradas en cada brazo), distancia comportamientos viajadas y especificados como postura de asistir se extendía de animales sometidos se registran durante los periodos de observación. Estas medidas, ansiedad animal se estima como un resultado experimental.

La elevada prueba de laberinto se utiliza en todo el mundo, pero no todos los laboratorios utilizan el mismo aparato diseño5,6, y estas diferencias pueden afectar los resultados experimentales. Por ejemplo, las diferencias son la presencia o ausencia de salientes a lo largo de los brazos abiertos y el uso de paredes transparentes u opacas para brazos cerrado5,6. Los bordes a lo largo de los brazos abiertos y el uso de paredes transparentes para brazos cerrados fueron desarrolladas para evitar caerse el aparato7animales y para facilitar observaciones conductuales dentro de los brazos cerrados, respectivamente8,9. Aunque ha habido algunos estudios que examinan las diferencias de estructura brazo cómo individuales pueden afectar la capacidad para detectar ansiedad animal1,2,5,10,11 , no se han investigado los efectos combinados de abiertas (con/sin repisa corta) y cerrado (transparente/opaco paredes) del brazo características sobre el comportamiento animal.

En un reciente informe, discutimos el efecto de estas combinaciones de diseños de brazo en ansiedad-como comportamiento en ratas12. En breve, abra brazo bordes perceptiblemente creciente ansiedad-como comportamiento en ratas, mientras brazos transparentes también han disminuido este comportamiento. Además, verificamos una mayor sensibilidad de detección del efecto de un fármaco ansiolítico en una combinación de brazo abierto no renegociados + brazo cerrada amurallada opaco en comparación con una combinación de brazo abierto renegociado + brazo cerrado pared transparente. En este informe, será introducir nuestro protocolo para el elevado más laberinto de prueba, junto con la discusión de los resultados claves del informe anterior. Creemos que este informe proporcionará información útil para aquellos que han empleado o que planean usar el elevado además de laberinto en sus estudios.

Protocol

Todos los procedimientos experimentales descritos aquí han sido aprobados por el cuidado de Animal institucional y Comité de uso de la Universidad de Meiji (IACUC 14-0002(1)). Animales utilizados en los resultados representativos se prepararon como sigue: ratas macho Sprague-Dawley fueron compradas a una empresa de animales de laboratorio y alojadas en grupos de 4 animales por jaula de la rata estándar (W200 × D410 × H250 mm) para al menos una semana antes del inicio de la experimento conductual. La sala de alojami…

Representative Results

En el estudio anterior, se compararon los efectos combinados de salientes de brazo abierto y la transparencia de las paredes brazo cerrado en los comportamientos exploratorios en el laberinto12. Las ratas significativamente pasaron menos tiempo en brazos abiertos sin salientes que a brazos abiertos con repisas (F [1, 60] = 13.49, P = 0.0005) (figura 2A). Resultados similares fueron también encontrados por el número de entrad…

Discussion

Como el número de pacientes que sufren de trastornos psiquiátricos, como trastorno de ansiedad, aumenta, es importante desarrollar estudios de vanguardia para mejorar el entendimiento del mecanismo básico de la ansiedad. Para lograr esto, también es importante optimizar los procedimientos experimentales. Por lo tanto, a mejorar la aplicación de la elevación además de prueba de laberinto, hemos demostrado el efecto del brazo características en los resultados experimentales con ratas.

El…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Los autores desean agradecer al Sr. Akihiro Hirano por su ayuda en la producción de aparatos modificados para requisitos particulares. Los autores desean agradecer al Sr. Kosuke Takahashi y Sr. Shingo Nakajima su asistencia técnica. Este trabajo fue apoyado por investigación de riesgo de sustancias químicas, salud y becas de investigación de Ciencias de laboratorio, Ministerio de salud, trabajo y bienestar, Japón (H25-KAGAKU-IPPANN-003) y beca de proyecto de investigación A cargo de Instituto de ciencia y tecnología de Meiji Universidad de Japón.

Materials

Customized container (W1500 × D1500 × H2000 mm) NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
LED lighting NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
Elevated plus maze apparatus NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
Digital video camera Watec WAT-250D2 Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles.
Hard disk recorder TOSHIBA RD-R200 Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera.
Sprague-Dawley rats Charles River Laboratories Japan, Inc. NA Any suitable rats can be used for your study
Standard rat cage Toyoriko TP-105 Any suitable rat cage be used for your study
Instrument to measure light intensity AS ONE 1-5818-02 Any suitable instrument to measure light intensity
EthoVision XT version 8.0 Noldus NA Any suitable software to measure animal behavior
Diazepam Taiyo Pharmaceutical Industry 1124402A2061 Any suitable drug can be used for your study
Tween 80 Wako Pure Chemical Industries 9005-65-6 Any suitable drug can be used for your study

Referências

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Citar este artigo
Horii, Y., McTaggart, I., Kawaguchi, M. Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test. J. Vis. Exp. (136), e56428, doi:10.3791/56428 (2018).

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