Тестирование животных тревожности крыс: последствия открытой руки выступами и Закрытая рука стены прозрачности в повышенные плюс лабиринт тест
Summary
Крыс тревоги подобное поведение проверены повышенный плюс лабиринт сильно зависит от среды тестирования. Здесь мы покажем, как параметры аппарата, особенно руки структуры, влияют на поведение на лабиринт, и мы объясняем надежный протокол для выявления воздействия анксиолитическое наркотиков. Этот доклад будет способствовать тревоги исследования.
Abstract
Повышенные плюс лабиринт тест является поведенческие оценки животных тревоги в грызунов. Хотя этот тест широко применяется в области поведенческих наук, противоречивые результаты часто предоставляются из различных лабораториях. Для выявления причины различных результатов, мы ранее сосредоточены на руку функций, которые отличаются между лабораториями, наиболее особенно наличие/отсутствие выступы по бокам распростертыми объятиями и прозрачность/непрозрачность закрытой руке стен. В предыдущем докладе мы использовали контейнер пользовательских разработана для сравнения поведения крыс на различных комбинаций конструкций открытых и закрытых руку в идентичных условиях эксперимента и показал, что различия в руку функции вмешиваться с экспериментальной результаты. В краткой открытые руки выступами значительно увеличили тревоги подобное поведение у крыс, в то время как прозрачный оружия также сократились это поведение. Кроме того мы проверяли выше чувствительность обнаружения эффекта анксиолитическое наркотиков в сочетании без уступчатая открытой руки + непрозрачными стенами закрытых руку, по сравнению с комбинацией уступчатая открытой руки + прозрачной стеной Закрытая рука. В настоящем докладе мы представляем наш протокол для повышенных плюс лабиринт тест, а также обсуждение ключевых результатов от предыдущего доклада и экспериментальный опыт. Мы считаем, что этот доклад предоставит полезную информацию для исследователей, которые работают или которые планируют использовать повышенные плюс лабиринт в их исследованиях.
Introduction
Количество пациентов, страдающих от расстройства настроения, включая разлада тревожности и депрессии, растет. Хотя развитие этих расстройств включает генетических и экологических факторов, подробные патогенетических механизмов еще не полностью понял1. Таким образом исследования необходимо сосредоточить внимание на выявлении основных механизмов аффективных расстройств, а также развитие эффективных лекарственных препаратов, которые имеют меньше побочных эффектов.
Поведенческие тесты для лабораторных животных являются полезными для расследования выше функции мозга, включая эмоции. Как поведение животных сильно варьирует, экспериментальные результаты часто отличаются между лабораториями, даже если используется2идентичных инбредных деформации. Таким образом исследователи также нужно понять основные особенности экспериментальных устройств, которые они принимают для того, чтобы обеспечить надежный, точные результаты в лаборатории.
Повышенные плюс лабиринт тест первоначально была учреждена для изучения эмоциональных реактивности у грызунов3,4. Весь аппарат обычно расположены 500 мм над уровнем пола и состоит из двух открытых и два закрытых вооружений, которые делают фигуру плюс. Измерения руку исследования (в том числе продолжительность и частота записей на каждой руке), расстояние ездил и заданного поведения, такие, как растягивается посещающих осанки подвергли животных записываются во время наблюдений периоды. Эти меры животных тревоги оценивается как экспериментальный результат.
Повышенные плюс лабиринт тест используется во всем мире, но не все лаборатории используют же аппарат дизайн-5,–6, и эти различия могут повлиять на экспериментальных результатов. Например различия включают в себя наличие или отсутствие выступов вдоль распростертыми объятиями и/или использования прозрачной или непрозрачной стен для закрытых оружия5,6. Выступы вдоль распростертыми объятиями и использование прозрачные стены для закрытых оружия были разработаны для предотвращения падения аппарат7животных и для облегчения поведенческие наблюдения внутри закрытой оружия, соответственно8,9. Хотя там были некоторые исследования, которые изучали как индивидуальные различия структуры рука может повлиять на способность обнаруживать животных тревоги1,2,5,10,11 , комбинированные эффекты открытым (с/без коротких уступа) и закрытые (прозрачный/непрозрачные стены) руку функции на поведение животных еще не исследовано.
В недавнем докладе мы обсудили влияние этих комбинаций конструкций руку на тревоги подобное поведение у крыс12. В краткой открытые руки выступами значительно увеличили тревоги подобное поведение у крыс, в то время как прозрачный оружия также сократились это поведение. Кроме того мы проверяли выше чувствительность обнаружения эффекта анксиолитическое наркотиков в сочетании без уступчатая открытой руки + непрозрачными стенами закрытых руку, по сравнению с комбинацией уступчатая открытой руки + прозрачной стеной Закрытая рука. В настоящем докладе мы будет ввести наш протокол для повышенных плюс лабиринт тест, вместе с обсуждения основных результатов от предыдущего доклада. Мы считаем, что этот доклад предоставит полезную информацию для тех, кто работает или кто планируете использовать повышенные плюс лабиринт в их исследованиях.
Protocol
Representative Results
Discussion
С увеличением числа пациентов, страдающих от психических расстройств, в том числе тревожное расстройство, важно развивать передовые исследования для улучшения понимания основных механизма тревоги. Для достижения этой цели, важно также оптимизировать экспериментальных процедур. Таки…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы хотели бы поблагодарить г-н Акихиро Hirano за его помощь в производстве настроить аппарат. Авторы хотели бы поблагодарить г-н Косукэ Такахаси и г-н Синго Накадзима за их технической помощи. Эта работа была поддержана исследования риска химических веществ, здравоохранения и лабораторных наук научно-исследовательских грантов, Министерство здравоохранения, труда и социального обеспечения, Япония (H25-KAGAKU-IPPANN-003) и A исследовательский проект Грант института науки и технологии Мэйдзи Университет, Япония.
Materials
| Customized container (W1500 × D1500 × H2000 mm) | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| LED lighting | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Elevated plus maze apparatus | NA | NA | Handmade by Mr. Akihiro Hirano |
| Digital video camera | Watec | WAT-250D2 | Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles. |
| Hard disk recorder | TOSHIBA | RD-R200 | Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera. |
| Sprague-Dawley rats | Charles River Laboratories Japan, Inc. | NA | Any suitable rats can be used for your study |
| Standard rat cage | Toyoriko | TP-105 | Any suitable rat cage be used for your study |
| Instrument to measure light intensity | AS ONE | 1-5818-02 | Any suitable instrument to measure light intensity |
| EthoVision XT version 8.0 | Noldus | NA | Any suitable software to measure animal behavior |
| Diazepam | Taiyo Pharmaceutical Industry | 1124402A2061 | Any suitable drug can be used for your study |
| Tween 80 | Wako Pure Chemical Industries | 9005-65-6 | Any suitable drug can be used for your study |
Referências
- Nestler, E. J. Role of the Brain’s Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms. Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).
- Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment. Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).
- Handley, S. L., Mithani, S. Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of ‘fear’-motivated behaviour. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).
- Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat. J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).
- Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze. Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).
- Hogg, S. A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety. Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).
- Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze. Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).
- Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze. Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).
- Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls. Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).
- Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam. Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).
- Fernandes, C., File, S. E. The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze. Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).
- Horii, Y., Kawaguchi, M. Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats. Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).
- Santos, R. O., et al. Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests. Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).
- Lynn, D. A., Brown, G. R. The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood. Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).
- Horii, Y., et al. Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats. Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).
- Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).
- Yang, Y., et al. Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze. Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).
- Albani, S. H., et al. Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age. Front Behav Neurosci. 9, 31 (2015).
