Summary

Testes Animal ansiedade em ratos: efeitos de bordas de braço aberto e fechado do braço de parede transparência em elevados além de teste de labirinto

Published: June 29, 2018
doi:

Summary

Ansiedade-como o comportamento dos ratos testados da elevada mais labirinto altamente varia de acordo com o ambiente de teste. Aqui nós mostramos como configurações do aparelho, especialmente a estrutura de braço, afetam o comportamento no labirinto, e explicamos um protocolo confiável para detectar os efeitos dos ansiolíticos. Este relatório irá contribuir para a investigação de ansiedade.

Abstract

A elevada além de labirinto é um teste comportamental para avaliar ansiedade animal em roedores. Embora este teste é aplicado extensamente no campo da ciência comportamental, resultados conflitantes são fornecidos frequentemente de laboratórios diferentes. Para identificar razões para os diferentes resultados, enfocamos anteriormente características de braço, que diferem entre laboratórios, mais notavelmente a presença/ausência de bordas para os lados de braços abertos e a opacidade/transparência das paredes de braço fechado. Em um relatório anterior, usamos um contêiner personalizado projetado para comparar o comportamento de ratos em diferentes combinações de desenhos de braço abertos e fechados, em condições experimentais idênticas e mostrou diferenças de características de braço interferem experimental resultados. Em breve, bordas de braço aberto aumentaram significativamente comportamento de ansiedade em ratos, enquanto braços transparentes também podem ter diminuído esse comportamento. Além disso, verificamos uma maior sensibilidade de detecção do efeito de um medicamento ansiolítico em uma combinação de braço aberto não-ledged + opaco braço fechado murado em comparação com uma combinação de ledged braço aberto + braço fechado murado transparente. Neste relatório, nós apresentamos o nosso protocolo para a elevada plus teste de labirinto, juntamente com a discussão dos principais resultados do relatório anterior e nossa experiência experimental. Acreditamos que este relatório fornecerá informações úteis para pesquisadores que têm empregado ou quem planeja usar a elevada mais de labirinto em seus estudos.

Introduction

O número de pacientes que sofrem de transtornos do humor, incluindo transtorno de ansiedade e depressão, está aumentando. Embora o desenvolvimento destes transtornos envolve fatores genéticos e ambientais, os mecanismos de patogenicidade detalhados ainda não estão totalmente compreendidos1. Portanto, pesquisa deve centrar-se em desvendar os mecanismos subjacentes de transtornos do humor, bem como o desenvolvimento de medicamentos eficazes que têm menos efeitos colaterais.

Testes comportamentais para animais de laboratório são úteis para investigar a função superior do cérebro, incluindo a emoção. Como comportamento animal é altamente variável, resultados experimentais diferem frequentemente entre laboratórios, mesmo se uma estirpe de pura idêntica foi usado2. Assim, os pesquisadores também precisam entender as características básicas dos dispositivos experimentais adoptarem a fim de fornecer resultados fiáveis, precisos no laboratório.

A elevada além de teste de labirinto foi originalmente criado para examinar a reatividade emocional em roedores3,4. Todo o aparelho é normalmente localizado 500 mm acima do piso e consiste de dois abertos e dois braços fechados que fazem de uma forma mais. Medições de exploração do braço (incluindo a duração e a frequência de entradas em cada braço), distância viajados e especificados comportamentos como postura esticada-atendente de animais sujeitos são registados durante os períodos de observação. Por essas medidas, estima-se como um resultado experimental animal ansiedade.

A elevada além de teste de labirinto é usado em todo o mundo, mas nem todos os laboratórios usam o mesmo aparelho design5,6, e estas diferenças podem afectar os resultados experimentais. Por exemplo, diferenças incluem a presença ou ausência de saliências ao longo de braços abertos e/ou o uso de paredes transparentes ou opacos para braços fechados5,6. As bordas ao longo de braços abertos e o uso de paredes transparentes para braços fechados foram desenvolvidos para evitar animais cair o aparelho7e para facilitar as observações comportamentais dentro os braços fechados, respectivamente de8,9. Embora tenha havido alguns estudos que examinaram as diferenças de estrutura de braço como individuais podem afectar a capacidade de detectar animais ansiedade1,2,5,10,11 , os efeitos combinados de open (com/sem borda curta) e características de braço fechado (transparente/opaco paredes) sobre o comportamento do animal ainda não tenha sido investigada.

Num relatório recente, discutimos o efeito destas combinações de designs de braço no comportamento de ansiedade em ratos12. Em breve, bordas de braço aberto aumentaram significativamente comportamento de ansiedade em ratos, enquanto braços transparentes também podem ter diminuído esse comportamento. Além disso, verificamos a maior sensibilidade de detecção do efeito de um medicamento ansiolítico em uma combinação de braço aberto não-ledged + opaco braço fechado murado em comparação com uma combinação de ledged braço aberto + braço fechado murado transparente. Neste relatório, podemos apresentar nosso protocolo para a elevada mais labirinto teste, juntos com a discussão dos principais resultados do relatório anterior. Acreditamos que este relatório fornecerá informações úteis para aqueles que têm empregado ou quem planeja usar a elevada mais de labirinto em seus estudos.

Protocol

Todos os procedimentos experimentais descritos aqui foram aprovados pelo cuidado institucional do Animal e uso Comitê da Universidade de Meiji (IACUC 14-0002(1)). Animais utilizados nos resultados representativos foram preparados como segue: ratos machos Sprague-Dawley foram comprados de uma empresa de animais de laboratório e alojados em grupos de 4 animais por jaula de rato padrão (W200 × D410 × H250 mm) pelo menos uma semana antes do início da experimento comportamental. O quarto de alojamento dos animais foi m…

Representative Results

No estudo anterior, comparamos os efeitos combinados de bordas de braço aberto e transparência das paredes de braço fechado sobre os comportamentos exploratórios no labirinto12. Ratos, significativamente, gastou muito menos tempo em braços abertos sem bordas do que de braços abertos, com bordas (F [1, 60] = 13.49, P = 0,0005) (Figura 2A). Resultados semelhantes foram encontrados também para o número de entradas nos bra…

Discussion

À medida que aumenta o número de pacientes que sofrem de transtornos psiquiátricos, incluindo transtorno de ansiedade, é importante desenvolver estudos de ponta para melhorar a compreensão do mecanismo básico de ansiedade. Para conseguir isso, é também importante otimizar os procedimentos experimentais. Portanto, para melhorar a aplicação da elevada além de teste de labirinto, temos demonstrado o efeito das características de braço em resultados experimentais utilizando ratos.

A e…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Os autores desejam agradecer Sr. Akihiro Hirano por sua assistência em produzir o aparelho personalizado. Os autores gostaria de agradecer o Sr. Kosuke Takahashi e Sr. Shingo Nakajima para sua assistência técnica. Este trabalho foi apoiado pela pesquisa sobre o risco das substâncias químicas, saúde e bolsas de investigação do laboratório de Ciências, Ministério da saúde, trabalho e bem-estar, Japão (H25-KAGAKU-IPPANN-003) e A concessão do projeto de pesquisa por Instituto de ciência e tecnologia de Meiji University, Japão.

Materials

Customized container (W1500 × D1500 × H2000 mm) NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
LED lighting NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
Elevated plus maze apparatus NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
Digital video camera Watec WAT-250D2 Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles.
Hard disk recorder TOSHIBA RD-R200 Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera.
Sprague-Dawley rats Charles River Laboratories Japan, Inc. NA Any suitable rats can be used for your study
Standard rat cage Toyoriko TP-105 Any suitable rat cage be used for your study
Instrument to measure light intensity AS ONE 1-5818-02 Any suitable instrument to measure light intensity
EthoVision XT version 8.0 Noldus NA Any suitable software to measure animal behavior
Diazepam Taiyo Pharmaceutical Industry 1124402A2061 Any suitable drug can be used for your study
Tween 80 Wako Pure Chemical Industries 9005-65-6 Any suitable drug can be used for your study

Referências

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Citar este artigo
Horii, Y., McTaggart, I., Kawaguchi, M. Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test. J. Vis. Exp. (136), e56428, doi:10.3791/56428 (2018).

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