ويصف هذا البروتوكول مجموعة العمليات جراحية لمآخذ توصيل قطب ابيكرانيال دائمة ومسرى صدر مزروع في القوارض. عن طريق وضع قطب ثاني في المقبس، يمكن تسليم أنواع مختلفة لتحفيز المخ الكهربائي transcranial للنظام المحرك في الحيوانات التنبيه عن طريق الجمجمة سليمة.
يمكن أن تعدل الدماغ الكهربائي Transcranial التحفيز استثارة القشرية واللدونه في البشر والقوارض. هو الشكل الأكثر شيوعاً للتحفيز في البشر transcranial التحفيز التيار المباشر (تدكس). أقل تواترا، transcranial التحفيز التيار المتردد (صيدها) أو transcranial التحفيز ضجيج عشوائي (ترنس)، شكلاً محدداً من صيدها باستخدام تيار كهربائي يطبق عشوائياً ضمن نطاق الترددات محددة مسبقاً، يتم استخدامه. قد أثمر زيادة البحوث تحفيز الدماغ الكهربائية موسع في البشر، سواء للأغراض التجريبية والسريرية، وازدياد حاجة إلى دراسات السلامة الأساسية، والميكانيكية، في الحيوانات. توضح هذه المقالة نموذج لتحفيز المخ الكهربائي transcranial (الامتحانات) عن طريق الجمجمة سليمة تستهدف النظام المحرك في القوارض التنبيه. ينص البروتوكول على إرشادات خطوة بخطوة لإنشاء العمليات الجراحية من مأخذ توصيل القطب ابيكرانيال الدائم جنبا إلى جنب مع قطب كهربائي عداد مزروع على صدره. عن طريق وضع قطب تحفيز بالمقبس ابيكرانيال، يمكن أن تقدم أنواع مختلفة من التحفيز الكهربائي، قابلة للمقارنة إلى تدكس وصيدها ترنس في البشر،. وعلاوة على ذلك، يتم عرض الخطوات العملية للامتحانات في القوارض التنبيه. ويمكن اختيار الكثافة الحالية المطبقة، ومدة التحفيز، وتحفيز نوع تبعاً للاحتياجات التجريبية. وتناقش المحاذير، ومزايا وعيوب هذا التشكيل، فضلا عن السلامة والجوانب قابلية التحمل.
وقد استخدمت الإدارة transcranial من التيارات الكهربائية في الدماغ (الامتحانات) لعقود لدراسة وظيفة المخ وتعديل السلوك. أكثر في الآونة الأخيرة، تطبيق مباشر التيارات، أو أقل تواترا التيارات المتردد (صيدها وترنس)، نونينفاسيفيلي عن طريق الجمجمة سليمة استخدام أقطاب اثنين أو أكثر (anode(s) و cathode(s)) وقد اكتسب الاهتمام العلمي والسريري. على وجه الخصوص، قد استخدمت في الدورات أكثر من 33,200 في الأصحاء والمرضى الذين يعانون من الأمراض العصبية تدكس وقد برز كآمنة وسهلة، تطبيق السرير فعالة من حيث التكلفة، مع الإمكانيات العلاجية الممكنة، فضلا عن فترة طويلة 1من الآثار السلوكية. وضوح هذا أسفر عن ازدياد الحاجة والاهتمام العلمي في الدراسات الميكانيكية، بما في ذلك الجوانب المتعلقة بالسلامة. تركز هذه المقالة على النموذج الأكثر استخداماً من التحفيز، تدكس.
عبر الأنواع، ينظم تدكس استثارة القشرية واللدونه متشابك. أفيد عن استثارة التغييرات كتغيير القطبية تعتمد على معدل إطلاق العصبية عفوية في الجرذان والقطط2،،من34أو التغييرات في موتور مقولة ستريك المحتملة (الهندسة الكهربائية والميكانيكية) في البشر والفئران ( زاد بعد أنودال وانخفض بعد تدكس كاثودال:6من البشرية5،؛ 7من الماوس). وحدات تحكم المجال DC أنودال زيادة كفاءة المحركات القشرية متشابك أو هيبوكامبال synapses في المختبر لعدة ساعات بعد التحفيز أو طويلة الأجل التقوية (الكمونية)، عندما تطبق يشترك مع أحد مدخلات متشابك ضعيفة محددة، أو عندما تعطي قبل اللدونة حمل التحفيز8،،من910،،من1112. ، وفقا غالباً ما يتم كشف فوائد التحفيز على نجاح التدريب الحركي أو المعرفي إلا إذا تدكس التطبيقية يشترك مع التدريب8،13،،من1415. في حين أن هذه النتائج السابقة تعزى أساسا إلى وظائف الخلايا العصبية، تجدر الإشارة إلى أن الخلايا غير العصبية (إطلاق) قد يسهم أيضا في الآثار الفنية من تدكس. على سبيل المثال، زيادة مستويات الكالسيوم داخل الخلايا أستروسيتيك أثناء تدكس أنودال في الفئران تنبيه16. وبالمثل، تدكس أنودال في الكثافة الحالية عن عتبة نيوروديجينيريشن التي يسببها تنشيط تعتمد جرعة microglia17. ومع ذلك، تحوير العصبية-إطلاق التفاعل تدكس يحتاج إلى مزيد من التحقيق المحددة.
البحوث الحيوانية معا، واتخذت متقدمة وضوح فهمنا لتأثير تدكس مودولاتوري على استثارة واللدونه. ومع ذلك، هناك ملاحظ “فجوة عكسية متعدية الجنسيات” في الزيادة المطردة في منشورات الدراسات تدكس البشرية على عكس البطيئة وزيادة طفيفة في التحقيقات المتعلقة بالآليات الكامنة للامتحانات في المختبر و الحية نماذج حيوانية. بالإضافة إلى ذلك، يتم تنفيذ نماذج الامتحانات القوارض مع تقلب عالية عبر مختبرات البحوث (تتراوح عبر الجلد لتحفيز ابيكرانيال)، وإجراءات حفز عنها غالباً ما لا تتسم بالشفافية الكاملة التي تعوق إمكانية المقارنة بين و تكرار البيانات البحثية الأساسية، فضلا عن تفسير النتائج.
هنا، نحن تصف بالتفصيل تنفيذ العمليات الجراحية لهيكل تحفيز الدماغ transcranial استهداف القشرة الحركية الأولية، الذي يسمح الترجمة إلى شرط تدكس البشرية مع التقليل من التباين، ويسمح للتحفيز المتكرر دون يعيق السلوك. يتوفر بروتوكول خطوة بخطوة للامتحانات اللاحقة في الفئران التنبيه. وتناقش الجوانب المنهجية والمفاهيمية للاستخدام الأمن للامتحانات في القوارض التنبيه.
ويصف هذا البروتوكول مواد نموذجية والخطوات الإجرائية للأعمال الجراحية لهيكل دائم قسم التدريب والامتحانات، فضلا عن حفز اللاحقة في القوارض التنبيه. أثناء إعداد القوارض تجربة قسم التدريب والامتحانات، العديد من الجوانب المنهجية (السلامة وقابلية التحمل لقسم التدريب والامتحانات، نتائج المع?…
The authors have nothing to disclose.
وأيد هذا العمل “مؤسسة البحوث الألمانية” (DFG RE 2740/3-1). ونشكر هايتي فرانك وتوماس غونتر لإنتاج داخلي لإنشاء قسم التدريب والامتحانات مصنوعة خصيصا ومشجعا DC.
Softasept N | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Deutschland |
3887138 | antiseptic agent |
Ethanol 70 % | Carl Roth GmbH & Co. KG, Karlsruhe, Deutschland | T913.1 | |
arched tip forceps | FST Fine science tools, Heidelberg, Deutschland | 11071-10 | |
Iris Forceps, 10cm, Straight, Serrated | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA, Inc, Sarasota, FL, USA | 15914 | |
Scalpel Handle #3, 13cm | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA, Inc, Sarasota, FL, USA | 500236 | |
Standard Scalpel Blade #10 | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA, Inc, Sarasota, FL, USA | 500239 | |
Zelletten cellulose swabs | Lohmann und Rauscher, Neuwied, Deutschland | 13349 | 5 x 4 cm |
Isoflurane | AbbVie Deutschland GmbH & Co | N01AB06 | |
Iris Scissors, 11.5cm, Straight | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA, Inc, Sarasota, FL, USA | 501758 | small scissors |
cotton swab/cotton buds | Carl Roth GmbH & Co. KG, Karlsruhe, Deutschland | EH12.1 | Rotilabo |
Kelly Hemostatic Forceps, 14cm, Straight | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA, Inc, Sarasota, FL, USA | 501241 | surgical clamp |
electrode plate (platinum) | custom made | Wissenschaftliche Werkstatt Neurozentrum Uniklinik Freiburg, Deutschland | 10×6 mm, 0.15 mm thickness |
insulated copper strands (~1 mm diameter) | Reichelt elektronik GmbH & Co. KG, Sande, Germany | LITZE BL | electrode cable |
Weller EC 2002 M soldering station | Weller Tools GmbH, Besigheim, Germany | EC2002M1D | |
Iso-Core EL 0,5 mm | FELDER GMBH Löttechnik, Oberhausen, Deutschland | 20970510 | lead free solder |
MERSILENE Polyester Fiber Suture | Johnson & Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany | R871H | nonabsorbable braided suture, 4-0 |
Histoacryl | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Deutschland |
9381104 | cyanoacrylate |
Ketamin 10% | Medistar GmbH, Germany | n/a | anesthetics |
Rompun 2% (Xylazine) | Bayer GmbH, Germany | n/a | anesthetics |