Francisella tularensis के साथ फिशर ३४४ चूहों का Intratracheal टीका
Summary
यह प्रोटोकॉल Francisella tularensis के साथ फिशर ३४४ चूहों के intratracheal टीकाकरण का वर्णन करता है । इस प्रक्रिया को इस संभावित खतरे के एजेंट के लिए मानव की फुफ्फुसीय जोखिम की नकल और वैक्सीन और फेफड़े के tularemia के खिलाफ चिकित्सीय प्रभावकारिता परीक्षण किया जा सकता है ।
Abstract
जीवाणु Francisella tularensis के साथ फुफ्फुसीय संक्रमण गंभीर और संभावित घातक बीमारी के लिए नेतृत्व कर सकते हैं, tularemia, मनुष्यों में । मानव के लिए एक अनुमोदित tularemia वैक्सीन की वर्तमान कमी के कारण, अनुसंधान टीके उचित पशु मॉडल का उपयोग विकास पर ध्यान केंद्रित है । फिशर ३४४ चूहा एक मॉडल है कि एफ tularensis संक्रमण के लिए मानव संवेदनशीलता को दर्शाता है के रूप में उभरा है, और इस प्रकार tularemia वैक्सीन विकास के लिए एक आकर्षक मॉडल है । Intratracheal टीका के साथ फिशर ३४४ चूहे की एफ tularensis मानव में फुफ्फुसीय जोखिम की नकल । चूहे श्वासनली में सफल प्रसव फेफड़े के वितरण के लिए महत्वपूर्ण है । दीप्ति के साथ एक laryngoscope anesthetized चूहों के tracheae को ठीक से intubate करने के लिए प्रयोग किया जाता है; श्वासनली के भीतर सही स्थान सांस लेने का पता लगाने के लिए एक सरल उपकरण द्वारा निर्धारित होता है । इंटुबैषेण के बाद, F. tularensis संस्कृति को सिरिंज के द्वारा मापा गया खुराक में दिया जाता है । इस तकनीक को मानकर चूहे के भीतर एफ tularensis के फेफड़े की डिलीवरी श्वासनली वैक्सीन प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने के लिए ।
Introduction
F. tularensis (Ft) मानव रोग, tularemia का कारण बनता है । जब जीवाणु फेफड़े के मार्ग के माध्यम से प्राप्त कर रहे हैं, यह फेफड़े tularemia की ओर जाता है, जिसमें उच्च रुग्णता और मृत्यु1है । एफ tularensis एक खतरा एयरोसोल रूपों के साथ जुड़े खतरे के कारण एजेंट माना जाता है, और वहां वर्तमान में कोई वैक्सीन अमेरिका में मानव उपयोग के लिए मंजूरी दे दी है इस जीवाणु के अवैध उपयोग के खिलाफ मानव आबादी को बचाने के लिए फेफड़े tularemia के खिलाफ टीके और चिकित्सीय उपायों को विकसित करने के लिए एक गहन प्रयास वर्तमान में चल रहा है ।
tularemia अनुसंधान के अधिकांश माउस मॉडल पर ध्यान केंद्रित किया है, चूहों की चरम संवेदनशीलता के कारण F. tularensis संक्रमण के लिए, और रिएजेंट की व्यापकता । हालांकि, चूहों वैक्सीन विकास के लिए एक मुश्किल मॉडल साबित हो गया है, इस मॉडल में वैक्सीन प्रभावकारिता का प्रदर्शन करने की कठिनाई के कारण2. हाल ही में, फिशर ३४४ चूहा tularemia वैक्सीन विकास के लिए एक मॉडल के रूप में विकसित किया गया है3। विभिंन एफ tularensis उपजाति के लिए फिशर ३४४ चूहे की संवेदनशीलता मानव संवेदनशीलता4नकल करती है, और चूहों के खिलाफ टीकाकरण द्वारा एफ tularensis फुफ्फुसीय चैलेंज के खिलाफ संरक्षित किया जा सकता है एक जीवित टीके की रक्षा के लिए जाना जाता है तनाव के साथ मनुष्य५,६,७. क्योंकि फिशर ३४४ चूहा मॉडल मनुष्यों के एफ tularensis संक्रमण के कुछ विशेषताएं, यह एक टीके के विकास के लिए एक अत्यंत उपयोगी मॉडल है कि फुफ्फुसीय एफ tularensis जोखिम के खिलाफ की रक्षा हो सकती है ।
एक प्रभावी टीके के लिए एफ tularensisके लिए फुफ्फुसीय जोखिम के खिलाफ मनुष्यों की रक्षा की जरूरत है । हथियार एफ tularensis से सबसे अधिक संभावना फुफ्फुसीय जोखिम एयरोसोल8फेफड़ों में सांस बैक्टीरिया होगा । हालांकि, एफ tularensis के एयरोसोल पीढ़ी दोनों खतरनाक और बोझिल है, और विशेष उपकरणों और रोकथाम की आवश्यकता है । चूहे में फुफ्फुसीय जोखिम का एक वैकल्पिक मार्ग है कि शायद अधिक कई प्रयोगशालाओं के लिए अनुकूलनीय विशेष उपकरणों की कमी है intratracheal टीका6के माध्यम से है । यह तकनीक एक anesthetized चूहे के श्वासनली के भीतर एक कैथेटर के सही स्थान के लिए एक laryngoscope का इस्तेमाल करता है । श्वासनली के भीतर स्थान, घेघा के बजाय, एक सरल उपकरण है कि फेफड़ों से airflow visualizes द्वारा सत्यापित है । F. tularensis बाद में एक सिरिंज के साथ प्रशासन द्वारा कैथेटर के माध्यम से फेफड़ों में दिया जाता है, कैथेटर में हवा की शुरूआत के बाद जीवाणुओं के फेफड़े के वितरण को सुनिश्चित करने के लिए. इसके विपरीत, Jemski5 पहले बताया कि एफ tularensis intranasal मार्ग के माध्यम से फिशर ३४४ चूहों में inoculated फेफड़ों से नहीं किया जा सकता है 3 दिनों के बाद जब तक संस्कृति-टीका, यह दर्शाता है कि चूहों में intranasal टीका फेफड़ों में बैक्टीरिया के प्रत्यक्ष वितरण में परिणाम नहीं है ।
का चयन करें agent forms of f. tularensis (f. tularensis subsp. tularensis, f. tularensis subsp. holarctica) आवश्यक है कि सुरक्षा स्तर 3 (BSL3) रोकथाम प्रक्रियाओं, जो वीडियोग्राफी को रोकने जाएगा । हालांकि, एफ novicida (एफ एन) का चयन एजेंट स्वस्थ मनुष्यों में अपनी avirulence के कारण स्थिति से मुक्त है, और सुरक्षा के तहत सुरक्षित स्तर 2 (BSL2) शर्तों9,10का उपयोग किया जा सकता है । इसके अलावा, एफ एन जी तनु टीके के लिए आधार के रूप में कार्य करता है कि एफ tularensis फुफ्फुसीय जोखिम के खिलाफ की रक्षा कर सकते है जब intratracheal टीका11,12,13के माध्यम से दिया । यहां प्रस्तुत तकनीक के अध्ययन के लिए अनुमति देता है संक्रमण है कि फेफड़े के मार्ग के माध्यम से होते है मनुष्यों के लिए एक मॉडल के रूप में चूहों का उपयोग । इस तकनीक विशेष एयरोसोल पैदा करने वाले उपकरणों के लिए आवश्यकता के बिना किया जा सकता है । एफ एन यहां फिल्माया तकनीक के लिए इस्तेमाल किया गया था ।
Protocol
यह काम स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों के प्रयोगशाला पशुओं की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड में सिफारिशों के साथ कड़ाई के अनुसार किया गया था । मूषक शामिल पशु प्रोटोकॉल सैन एंटोनियो संस्थागत पशु देखभ…
Representative Results
Discussion
फिशर ३४४ चूहा tularemia वैक्सीन विकास के लिए एक महत्वपूर्ण मॉडल3होता जा रहा है । फुफ्फुसीय मार्ग के माध्यम से एफ tularensis के लिए जोखिम एफ tularensisके हथियार रूपों के खिलाफ प्रभावकारिता का प्रदर्शन करने…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह अध्ययन अनुबंध HDTRA1-14-C-०११६ के अंतर्गत रक्षा खतरा न्यूनीकरण एजेंसी (DTRA) द्वारा समर्थित था, और संक्रमण जीनोमिक्स में उत्कृष्टता के लिए केंद्र (DOD #W911NF-11-1-0136).
Materials
| GreenLine fiber optic blade size 0 | Carefusion | 5-5231-00 | Macintosh American profile |
| GreenLight system laryngoscope handle | Carefusion | 4559GSP | |
| Exel International Safelet I.V. Catheter | EXEL INTERNATIONAL | 26743 | |
| Slip Tip Sterile Syringes 1ml | BD | 309659 | |
| Broad Point Dressing Thumb Forceps | Thermo Scientific | 76-302 | |
| 200ul barrier tip | GeneseeScientific | 24-142 | |
| 1000ul pipette tip | Olympus Plastics | 24-173 | |
| Dremel 3000-2/28 Rotary tool kit | Dremel | 3000228 | |
| Rodent Intubation Stand | Braintree Scientific | RIS 200 | |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-2 | |
| Rodent anesthesia machine | Surgivet | VTC302 Classic T3 | |
| Rodent Anesthesia chamber | Braintree Scientific | AB 1 |
Referências
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