Summary

Auswirkungen der Exposition von Formaldehyd zu einem Rattenmodell der Neurodermitis durch Behandlung der Neugeborenen Capsaicin induziert

Published: September 27, 2017
doi:

Summary

Wir beschreiben hier Methoden für neonatale Capsaicin Behandlung atopischen Dermatitis bei Ratten und Exposition von verdampftem Formaldehyd zu untersuchen, die Wirkungen von Formaldehyd Inhalation auf atopische Dermatitis zu induzieren.

Abstract

Atopischer Dermatitis ist chronisch rezidivierend juckende Ekzeme und auf der ganzen Welt, vor allem in den Industrieländern herrscht. Komplexe Wechselwirkungen zwischen genetischen und umweltbedingten Faktoren sind dafür bekannt, eine wichtige Rolle in der Pathophysiologie der atopischen Dermatitis. Allerdings fehlt uns noch ein detailliertes Bild über die Pathogenese dieser Krankheit. Daher ist es wichtig, geeignete Tiermodelle für die Aufklärung des Fortschreitens der Neurodermitis zu entwickeln. Darüber hinaus erweitert die Untersuchung der Wirkung von Umweltfaktoren wie Luftschadstoffe auf atopische Dermatitis Verständnis der Krankheit. Hier beschreiben wir eine Methode zur Induktion von atopischer Dermatitis bei Ratten mit Neugeborenen Capsaicin Behandlung und ein Protokoll für eine konstante Konzentration von Formaldehyd ausgesetzt Ratten, die Auswirkungen auf die Entwicklung von Neurodermitis im kindlichen und Jugendlichen enthüllen Perioden. Diese Protokolle erfolgreich angewandt worden, um verschiedene Experimente und können für andere Substanzen verwendet werden.

Introduction

Um die Wirkungen von Formaldehyd (FA) Inhalation auf atopische Dermatitis (AD) Fortschreiten zu befragen, wir ein Protokoll für AD Induktion gegründet und entwickelt eine herkömmliche Zirkulation Kammer für chronische Exposition der FA.

AD ist eine chronische entzündliche Hautkrankheit zurückzuführen auf die komplexen Wechselwirkungen zwischen genetischen Prädisposition und umweltbedingte Auslöser1,2. Eine ordnungsgemäße Tiermodell ist erforderlich, um AD in der präklinischen Staat zu studieren. Dies ist am wichtigsten bei die Pathogenese von AD unter dem Einfluss von Umweltfaktoren Aufklärung. Darüber, um die Auswirkungen der umweltbedingte Auslöser auf den AD-Verlauf besser zu untersuchen, ist es wichtig zu trennen die einzelnen Umweltfaktoren und den Grad der Exposition zu quantifizieren.

Wir haben eine neuartige Rattenmodell Ad induziert durch Neugeborenen Capsaicin Behandlung gezeigt. Dieses AD-Modell3 hat einige Vorteile über anderen AD-Modelle wie die AD-Modelle durch Epicutan Sensibilisierung, die gentechnisch AD-Modelle und die spontane Mausmodellen AD4induziert. Erstens entwickelt dieses Modell AD-ähnliche Symptome im Alter von 3 Wochen, Kleinkind AD entspricht und ist früher als andere spontane Mausmodelle der AD wie der NC/Nga-Maus. In einigen Fällen, im Gegensatz zu den gentechnisch AD-Modellen die Symptome der AD Modelle nachlassen und Rückfall spontan über einen Zeitraum von 20 Wochen. Darüber hinaus ist der Einführungsprozess von AD-ähnliche Symptome im Modell leichter als das des Modells Epicutan Sensibilisierung, die allergische Kontaktdermatitis im Hinblick auf die Induktion-Prozess mehr ähnelt.

Wir haben das neue Protokoll für FA Exposition gegenüber einem Tiermodell mithilfe einer Acryl-Glas-Kammer und eine konventionelle medizinische Sauerstoff Regler5 Studie zu den Auswirkungen der FA Inhalation auf die Entwicklung von AD in kindlichen und Jugendlichen Zeiten eingeführt. Der Regler ermöglichte uns, die Tiere auf eine konstante Konzentration des Gases durch eine Anpassung der Volumenströme und die Lösungskonzentration verfügbar zu machen. Frühere Studien haben mehrere Möglichkeiten der Exposition der FA an Tiermodellen berichtet. Xu Et Al. beschrieben die Belichtungsmethode in welcher, die FA Lösung direkt auf die Haut6angewandt wurde. Eine weitere aktuelle Studie behandelt das Protokoll der FA Gas Exposition mit einem spezialisierten flüchtige Lösungsmittel-Generator Modell 49127. Im Vergleich zu früheren Studien, die neue Methode ist einfacher ausgestattet und kann für andere Lösungen neben FA angewendet werden.

Protocol

alle hier beschriebene Methoden wurden von der International Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) der Korea University College of Medizin. 6 Wochen nach der Geburt genehmigt, Experimentatoren können Enthansasia zu induzieren und sammeln verschiedene Proben wie die Haut und das Serum von Ratten. 1. Induktion von AD von Neugeborenen Capsaicin Behandlung um 5 mg/mL Capsaicin Lösung vorzubereiten, 50 mg Capsaicin hinzufügen 1 mL Tween 80 und 1 mL 100 % Ethanol in einem 15 mL ko…

Representative Results

Die AD-wie Hautentzündung der Capsaicin-behandelten AD Rattenmodell 7 Wochen alt ist in Figur 1Apräsentiert. Robuste kratzende Verhaltensweisen von Capsaicin behandelt AD Rattenmodell ist in Video 1dargestellt. Neonatale Capsaicin Behandlung Dermatitis ausgelöst und verschlimmert kratzen Verhaltensweisen bei Ratten 3 Wochen alt, und AD-ähnliche Symptome blieb für mehrere Wochen (Abbildung 1 b, C</str…

Discussion

Das Protokoll für die Induktion von AD-ähnliche Symptome bei Ratten hier beschrieben kann angepasst für das Studium AD Pathophysiologie und als Screening-Instrument für Drogen-Test verwendet werden. Das Instrument für die Exposition des gasförmigen FA Capsaicin behandelten Ratten kann angewendet werden, um die Auswirkungen der Exposition gegenüber verschiedenen Gase auf verschiedenen Tiermodellen zu bewerten.

Die neonatale Capsaicin behandelt-AD-Modell stützt sich auf eine einfachere V…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Forschung wurde unterstützt durch das öffentliche wohl & Sicherheit Forschungsprogramm durch National Research Foundation of Korea (NRF) gefördert durch das Ministerium für Bildung, Wissenschaft und Technologie (NRF-2014M3C8A5030612) und unterstützt durch die Chung Yang, Cha Young Sonne, M.D. und Jang Hallo Joo Yeu Sa Memorial Fund.

Materials

Medical Oxygen Regulator Yuyao Jiahua Medical manufacturer will not affect results
Tube manufacturer will not affect results
Acrylic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Plastic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Paraformaldehyde, powder Sigma 158127 manufacturer will not affect results
Wrap filme Uniwrap manufacturer will not affect results
Capsaicin Sigma M2028 manufacturer will not affect results
Tween80 Sigma P4780 manufacturer will not affect results
Digital Video Camera Sony HDR-CX380y manufacturer will not affect results
Isoflurane JW pharmaceutical manufacturer will not affect results

Referências

  1. Geha, R. S. Allergy and hypersensitivity. Nature versus nurture in allergy and hypersensitivity. Curr Opin Immunol. 15 (6), 603-608 (2003).
  2. Novak, N., Bieber, T., Leung, D. Y. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. The J Allergy Clin Immunol. 112 (Suppl 6), S128-S139 (2003).
  3. Back, S. K., et al. Chronically relapsing pruritic dermatitis in the rats treated as neonate with capsaicin; a potential rat model of human atopic dermatitis. J Dermatol Sci. 67 (2), 111-119 (2012).
  4. Jin, H., He, R., Oyoshi, M., Geha, R. S. Animal models of atopic dermatitis. J Invest Dermatol. 129 (1), 31-40 (2009).
  5. Han, R. T., et al. Formaldehyde-Induced Aggravation of Pruritus and Dermatitis Is Associated with the Elevated Expression of Th1 Cytokines in a Rat Model of Atopic Dermatitis. PLOS ONE. 11 (12), e0168466 (2016).
  6. Xu, B., Aoyama, K., Takeuchi, M., Matsushita, T., Takeuchi, T. Expression of cytokine mRNAs in mice cutaneously exposed to formaldehyde. Immunol Lett. 84 (1), 49-55 (2002).
  7. Kim, J. Y., Jeong, M. S., Park, K. Y., Seo, S. J. Aggravation of atopic dermatitis-like symptoms by consecutive low concentration of formaldehyde exposure in NC/Nga mice. Exp Dermatol. 22 (3), 219-221 (2013).
  8. Laske, N., Niggemann, B. Does the severity of atopic dermatitis correlate with serum IgE levels?. Pediatr Allergy Immunol. 15 (1), 86-88 (2004).
  9. Fujii, Y., Takeuchi, H., Sakuma, S., Sengoku, T., Takakura, S. Characterization of a 2,4-dinitrochlorobenzene-induced chronic dermatitis model in rats. Skin Pharmacol Physiol. 22 (5), 240-247 (2009).
  10. Sugimoto, T., Xiao, C., Ichikawa, H. Neonatal primary neuronal death induced by capsaicin and axotomy involves an apoptotic mechanism. Brain Res. 807 (1-2), 147-154 (1998).
  11. Saito, A., et al. Characterization of skin inflammation induced by repeated exposure of toluene, xylene, and formaldehyde in mice. Environ Toxicol. 26 (3), 224-232 (2011).
  12. Jung, W. W., et al. Formaldehyde exposure induces airway inflammation by increasing eosinophil infiltrations through the regulation of reactive oxygen species production. Environ Toixcol Pharmacol. 24 (2), 174-182 (2007).

Play Video

Citar este artigo
Han, R. T., Back, S. K., Lee, J., Kim, H. y., Kim, H. J., Na, H. S. Effects of Exposure of Formaldehyde to a Rat Model of Atopic Dermatitis Induced by Neonatal Capsaicin Treatment. J. Vis. Exp. (127), e55987, doi:10.3791/55987 (2017).

View Video