Summary

Effets de l’exposition de formaldéhyde à un modèle de Rat de la dermatite atopique induite par le traitement néonatale capsaïcine

Published: September 27, 2017
doi:

Summary

Nous décrivons ici des méthodes pour le traitement néonatal capsaïcine induire la dermatite atopique chez les rats et exposition de formaldéhyde vaporisé pour étudier les effets de l’inhalation du formaldéhyde sur la dermatite atopique.

Abstract

La dermatite atopique est chronique atrophiante eczéma prurigineuse et l’emporte dans le monde entier en particulier dans les pays développés. Des interactions complexes entre des facteurs génétiques et environnementaux sont connues pour jouer un rôle important dans la physiopathologie de la dermatite atopique. Cependant, il nous manque encore un tableau détaillé de la pathogenèse de cette maladie. Ainsi, il est important de développer des modèles animaux appropriés pour élucider la progression de la dermatite atopique. En outre, étudier l’effet des facteurs environnementaux tels que les polluants atmosphériques sur la dermatite atopique élargit la compréhension de la maladie. Nous décrivons ici une méthode pour induire la dermatite atopique chez les rats avec traitement de capsaïcine néonatale et un protocole pour l’exposition d’une concentration constante du formaldéhyde à des rats à révéler des effets sur le développement de la dermatite atopique chez enfantin et adolescent périodes. Ces protocoles ont été appliqués avec succès à plusieurs expériences et peuvent être utilisés pour d’autres substances.

Introduction

Pour interroger les effets de l’inhalation de formaldéhyde (FA) sur la progression de la dermatite atopique (DA), nous avons établi un protocole pour l’induction de l’AD et mis au point une chambre pratique conventionnelle pour une exposition chronique de FA.

AD est une maladie cutanée inflammatoire chronique attribuée aux interactions complexes entre les prédispositions génétiques et déclencheurs environnementaux1,2. Un modèle animal approprié est nécessaire pour étudier les AD de l’État préclinique. C’est plus important lorsque l’élucidation de la pathogenèse de l’AD sous l’influence de facteurs environnementaux. Par ailleurs, pour mieux étudier les effets des déclencheurs environnementaux sur la progression de l’AD, il est essentiel de séparer les différents facteurs environnementaux et de quantifier le degré d’exposition.

Nous avons démontré un modèle de rat roman de AD induite par le traitement néonatale de la capsaïcine. Ce modèle AD3 a quelques avantages par rapport aux autres modèles AD tels que les modèles AD induites par épicutanée sensibilisation, les modèles AD par génie génétique et les modèles de souris spontanée de AD4. Tout d’abord, ce modèle développe AD-comme des symptômes à l’âge de 3 semaines, ce qui correspond au nourrisson AD et est plus tôt que les autres modèles de souris spontanée des AD comme la souris NC/Nga. Dans certains cas, contrairement aux modèles AD par génie génétique, les symptômes des modèles AD se calmer et de rechutent spontanément sur une période de 20 semaines. En outre, le processus d’induction de AD-comme des symptômes dans le modèle est plus facile que celle du modèle épicutanée sensibilisation, qui est plus semblable à la dermatite allergique de contact dans la perspective du processus d’induction.

Nous avons introduit le protocole novateur pour l’exposition de FA à un modèle animal à l’aide d’une chambre de verre acrylique et un oxygène thérapeutique classique régulateur5 pour étudier les effets de l’inhalation de FA sur le développement de la ma en périodes enfantin et adolescents. Le régulateur nous a permis d’exposer les animaux à une concentration constante de gaz en ajustant le débit et la concentration de la solution. Des études antérieures ont signalé plusieurs voies d’exposition de FA à des modèles animaux. Xu et al. décrit la méthode d’exposition dans lequel FA la solution a été appliquée directement sur la peau6. Une autre étude récente adressée le protocole de l’exposition de gaz de FA à l’aide d’un générateur de solvants volatils spécialisées, modèle 49127. Par rapport aux méthodes d’études précédentes, la nouvelle méthode est équipée plus facilement et peut être appliquée pour d’autres solutions en plus de la FA.

Protocol

toutes les méthodes décrites ici ont été approuvées par l’International animalier et utilisation Comité (IACUC) de Corée University College of Medicine. 6 semaines après la naissance, les expérimentateurs peuvent induire des enthansasia et de recueillir des échantillons variés tels que la peau et le sérum de rat. 1. induction de la pub de traitement néonatal de capsaïcine pour préparer 5 mg/mL solution de capsaïcine, ajouter 50 mg de capsaïcine à 1 mL de Tween 8…

Representative Results

L’inflammation de la peau AD-comme le modèle de rat AD imprégnées de capsaïcine à 7 semaines d’âge est présentée dans la Figure 1 a. Des comportements se gratter robustes du modèle rat imprégnées de capsaïcine AD apparaît en vidéo 1. Traitement de capsaïcine néonatale a suscité la dermatite et aggravée de gratter des comportements chez les rats âgés de 3 semaines, et AD-comme des symptômes ont persisté pendant plusie…

Discussion

Le protocole décrit ici pour l’induction de l’AD-comme des symptômes chez les rats peut être adapté pour étudier la physiopathologie de l’AD et utilisé comme un outil de dépistage pour le test de dépistage. L’instrument pour l’exposition des FA gazeux aux rats traités à la capsaïcine peut être appliquée pour évaluer les effets de l’exposition à divers gaz sur divers modèles animaux.

Le modèle de AD imprégnées de capsaïcine néonatal s’appuie sur une procédure…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Cette recherche a été financée par le bien-être Public & programme de recherche de sécurité grâce à la Fondation de recherche National de Corée (NRF) financé par le ministère de l’éducation, la Science et la technologie (FRO-2014M3C8A5030612) et soutenue par The Chung Yang, Cha Young Soleil, M.D. Jang Salut Memorial Joo Yeu Sa caisse.

Materials

Medical Oxygen Regulator Yuyao Jiahua Medical manufacturer will not affect results
Tube manufacturer will not affect results
Acrylic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Plastic Chamber Taejin Acryl manufacturer will not affect results
Paraformaldehyde, powder Sigma 158127 manufacturer will not affect results
Wrap filme Uniwrap manufacturer will not affect results
Capsaicin Sigma M2028 manufacturer will not affect results
Tween80 Sigma P4780 manufacturer will not affect results
Digital Video Camera Sony HDR-CX380y manufacturer will not affect results
Isoflurane JW pharmaceutical manufacturer will not affect results

Referências

  1. Geha, R. S. Allergy and hypersensitivity. Nature versus nurture in allergy and hypersensitivity. Curr Opin Immunol. 15 (6), 603-608 (2003).
  2. Novak, N., Bieber, T., Leung, D. Y. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. The J Allergy Clin Immunol. 112 (Suppl 6), S128-S139 (2003).
  3. Back, S. K., et al. Chronically relapsing pruritic dermatitis in the rats treated as neonate with capsaicin; a potential rat model of human atopic dermatitis. J Dermatol Sci. 67 (2), 111-119 (2012).
  4. Jin, H., He, R., Oyoshi, M., Geha, R. S. Animal models of atopic dermatitis. J Invest Dermatol. 129 (1), 31-40 (2009).
  5. Han, R. T., et al. Formaldehyde-Induced Aggravation of Pruritus and Dermatitis Is Associated with the Elevated Expression of Th1 Cytokines in a Rat Model of Atopic Dermatitis. PLOS ONE. 11 (12), e0168466 (2016).
  6. Xu, B., Aoyama, K., Takeuchi, M., Matsushita, T., Takeuchi, T. Expression of cytokine mRNAs in mice cutaneously exposed to formaldehyde. Immunol Lett. 84 (1), 49-55 (2002).
  7. Kim, J. Y., Jeong, M. S., Park, K. Y., Seo, S. J. Aggravation of atopic dermatitis-like symptoms by consecutive low concentration of formaldehyde exposure in NC/Nga mice. Exp Dermatol. 22 (3), 219-221 (2013).
  8. Laske, N., Niggemann, B. Does the severity of atopic dermatitis correlate with serum IgE levels?. Pediatr Allergy Immunol. 15 (1), 86-88 (2004).
  9. Fujii, Y., Takeuchi, H., Sakuma, S., Sengoku, T., Takakura, S. Characterization of a 2,4-dinitrochlorobenzene-induced chronic dermatitis model in rats. Skin Pharmacol Physiol. 22 (5), 240-247 (2009).
  10. Sugimoto, T., Xiao, C., Ichikawa, H. Neonatal primary neuronal death induced by capsaicin and axotomy involves an apoptotic mechanism. Brain Res. 807 (1-2), 147-154 (1998).
  11. Saito, A., et al. Characterization of skin inflammation induced by repeated exposure of toluene, xylene, and formaldehyde in mice. Environ Toxicol. 26 (3), 224-232 (2011).
  12. Jung, W. W., et al. Formaldehyde exposure induces airway inflammation by increasing eosinophil infiltrations through the regulation of reactive oxygen species production. Environ Toixcol Pharmacol. 24 (2), 174-182 (2007).

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Citar este artigo
Han, R. T., Back, S. K., Lee, J., Kim, H. y., Kim, H. J., Na, H. S. Effects of Exposure of Formaldehyde to a Rat Model of Atopic Dermatitis Induced by Neonatal Capsaicin Treatment. J. Vis. Exp. (127), e55987, doi:10.3791/55987 (2017).

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