Préparation et évaluation des^99m Tc marquée tridenté chélates de pré-ciblage utilisant Bioorthogonal Chemistry

^99m Tc reste le radio – isotope dominant utilisé en médecine nucléaire diagnostique, avec plus de 50 millions de procédures d'imagerie effectuées par an dans le monde entier ^{1, 2, 3.} La majorité des agents ^99m Tc utilisés cliniquement sont radiopharmaceutiques de type perfusion. Il y a un nombre limité de composés activement ciblés dans lesquels ^99m Tc est dirigé pour lier un biomarqueur spécifique à travers la ligature à une construction de ciblage. La création de ^99m ciblée radiopharmaceutiques Tc est souvent entravée par l'influence de ^99m complexes Tc-ligand sur la capacité de la molécule de ciblage pour lier le biomarqueur d'intérêt, ou les isotopes demi-vie est pas assez long pour une utilisation avec des biomolécules de poids moléculaire élevé telles que des anticorps. Ce dernier nécessite généralement plusieurs jours avant que les images sont acquises pour que la biomolécule pour effacer de la non-cible tiss ues. Pré-ciblage propose une approche alternative pour surmonter ces défis.

Pré-ciblage combinée avec la chimie bioorthogonal a été montré pour être un moyen efficace de développer de nouvelles sondes d'imagerie moléculaire à la fois pour la fluorescence et la radio-imagerie ^{4, 5, 6, 7, 8.} La réaction de la demande d'électrons inverse de Diels-Alder (IEDDA) entre 1,2,4,5-tétrazine (Tz) et -cyclooctene trans (TCO) , ses dérivés, comme le montre la figure 1, a été montré comme étant particulièrement efficace ^6. La réaction IEDDA avec ces composants peut présenter une cinétique rapide dans du PBS (k ₂ ≈ 6.000 M ^-1 s ^-1) et une sélectivité élevée, le rendant idéal pour des applications in vivo pré-ciblage ^{9, 10.}

e_content "> L'approche la plus couramment utilisée consiste à administrer un vecteur de ciblage TCO dérivés et à la suite d' une période de retard suffisant, un tétrazine radiomarqué est administré. tétrazines radiomarqués sur la base de ¹¹ C, ¹⁸ F, ⁶⁴ Cu, ⁸⁹ Zr, et ¹¹¹ en ont été rapporté ^{11, 12, 13, 14, 15.} en revanche, il n'y a qu'un seul rapport d'une ^99mTc marqué Tz, qui a été préparé en utilisant un ligand de type HYNIC nécessitant l'utilisation de co-ligands pour éviter la liaison aux protéines et à la dégradation in vivo , ^16. a titre d'alternative, nous rapportons ici la synthèse de ^99mTc (I) marqué tétrazines en utilisant une famille de ligands qui forment des complexes stables avec un tridentate ^[99mTc (CO) _3] ⁺ noyau.

<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page = "1">
Figure 1: La réaction IEDDA bioorthogonal entre tétrazine et -cyclooctene trans. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

La famille de ligands préparés contiennent des chélates tridentés qui varient en polarité et de la nature du groupe de liaison entre la région de liaison métallique et la Tz (figure 2). L'objectif était d'identifier un ^99m Tc-tétrazine construire qui pourrait efficacement localiser et de réagir avec des sites TCO marqués in vivo et rapidement clair lorsqu'ils ne sont pas liés, afin de produire une valeur cible élevée à non-cible ratios. Pour tester les ligands, un TCO-dérivé d'un bisphosphonate (TCO-BP) a été utilisé ^17. Nous avons montré précédemment que le TCO-BP se localise dans les zones du métabolisme osseux actif et peut réagir avectétrazines radiomarqués in vivo ^18. Il est un réactif commode pour tester de nouveaux tétrazines, car il peut être préparé en une seule étape et les expériences peuvent être effectuées chez des souris normales lorsque la localisation a lieu principalement au niveau des articulations (genoux et des épaules).