Summary

Een methode voor het evalueren van Insecticide werkzaamheid tegen Bed Bug,<em> Cimex lectularius</em>, Eieren en First stadia

Published: March 15, 2017
doi:

Summary

Insecticide evaluaties zijn vaak gericht tegen volwassen insecten, in plaats van onvolwassen stadia. Hier presenteren we een protocol voor het evalueren van insecticiden tegen bed bug eieren met een vergelijking met de eerste nimfenstadium bedwants podium. Deze protocollen kunnen worden aangepast voor andere insecten insecticide werkzaamheid in niet-volwassen levensstadia evalueren.

Abstract

Standard toxiciteit evaluaties van insecticiden tegen schadelijke insecten worden voornamelijk uitgevoerd op volwassen insecten. Evaluatie op basis van een dosis-respons of concentratie-respons curve, de sterfte toeneemt naarmate de dosis of concentratie van een insecticide wordt verhoogd. Standaard letale concentratie (LC50) en letale dosis (LD50) tests die leiden tot 50% mortaliteit van een testpopulatie kan een uitdaging voor de evaluatie toxiciteit van insecticiden tegen insecten levensstadia niet voor volwassenen, zoals eieren en vroege instar of nimfenstadia . Echter, deze informatie is essentieel voor het begrijpen van insecticide werkzaamheid in alle bed bug levensfasen, die de controle en behandeling inspanningen beïnvloedt. Dit protocol maakt gebruik van een standaard dompelen bioassay aangepast voor bed bug eieren en een contact insecticide-test voor de behandeling van nymphal eerste stadia. Deze assays produceren een concentratie-respons curve verder kwantificeren LC 50 waarden voor insecticide evaluaties.

Introduction

Bed bugs zijn een belangrijke stedelijke plaag die bloedverlies, huidirritaties, slapeloosheid, depressie en angst bij de humane gastheer 1, 2, 3, 4, 5, 6 kunnen veroorzaken. De kosten van de verwijdering en het regelen van bed bugs zijn hoog en vaak vereisen meerdere bezoeken aan een huis door een ongediertebestrijding bedrijf 7. Meerdere bezoeken zijn meestal verplicht vanwege de cryptische gedrag van bed bugs en de problemen in verband met hen te doden. Vooral bed luizeneieren moeilijk te controleren vanwege hun kleine afmetingen en de bescherming van het embryo van de eierschaal.

Momenteel is een gangbare praktijk voor veel ongediertebestrijding bedrijven in de Verenigde Staten is om een ​​huis voor bed bugs met een chemisch insecticide te behandelen. Het is bekenddat de eieren moeilijk te controleren zijn zo veel bedrijven twee weken tijd voor herhalingsbehandelingen 8 uitgevoerd. Hiermee bed luizeneieren voldoende tijd om uit te komen, zodat het eerste instar-stadium zal ontstaan ​​en ogenschijnlijk makkelijker te doden met insecticiden. Er is echter een gebrek aan studies evalueren van de werkzaamheid van insecticiden tegen bedmijt eieren en eerste stadia.

Insecteneieren zijn gedocumenteerd de moeilijkste levensfase te beheersen stedelijke insectenplagen, behalve bed bugs zijn, naast vele landbouwongedierte. De meeste van deze problemen zijn toegeschreven aan de schalen, terwijl een paar studies insecticide resistentie gemeld. De weerstand in het ei stadium is gedocumenteerd in Triatoma infestans 9, Pediculus humanus capitis 10, Plutella xylostella 11, Rhyzopertha Dominica 12, <em> Cimex lectularius 13, en meerdere opgeslagen product kevers (dwz Oryzaephilus surinamensis, Tribolium castaneum, Cryptolestes ferrugineus pt Rhyzopertha Dominica). 14 De resistentie van de eistadium en onvolwassen stadia, en complicaties van insecticide penetratie door de eierschaal, vereist de noodzaak insecticide werkzaamheid bioassays tegen deze levensstadia.

Dit protocol wordt stap-voor-stap procedure voor het bepalen van de werkzaamheid van insecticiden in het ei en eerste instar fase van het gemeenschappelijk huismijten, Cimex lectularius. Beide protocollen concentratie-respons assays voor kwantificering van LC 50 waarden toe. Concentratie-respons testen worden vaak gebruikt voor toxicologisch onderzoek, maar dit protocol is aangepast voor het eenvoudig te behandelen groepen van bed bug eieren en de eerste stadia. Deze assays kunnen worden aangepastvoor eieren verschillende insectensoorten en onvolwassen levensfasen.

Protocol

NB: Dit protocol omvat twee insecticide assays voor het afzonderlijk behandelen van bed bug eieren en de eerste stadia. Beide protocollen werden uitgevoerd met dezelfde insecticiden had echter de protocollen worden aangepast om blootstelling insecticide waarborgen en gemakkelijk de specimens manipuleren. 1. Egg Dompelen insecticide Assay Pull gekoppeld, goed gevoede insecten volwassen vrouwelijke bed uit een kolonie en plaats de vrouwtjes (5-10) in een Petri schaal met filtreerpap…

Representative Results

De eieren werden ondergedompeld in 5 verschillende concentraties van imidacloprid / β-cyfluthrin (ul / ml). De eerste stadia werden op behandelde oppervlakken van vijf verschillende concentraties van imidacloprid / β-cyfluthrin (Figuur 2) geplaatst. We gebruikten drie verschillende populaties van C. lectularius: Harlan, Richmond, en epicentrum (tabel 1). The Harlan stam…

Discussion

A critical step in this assay is to ensure that no eggs that are removed from a surface are damaged prior to the assay. Many insects cement their eggs to a substrate, therefore, a preliminary test may be needed to ensure that removal does not cause mortality. This test can be conducted with several replications of a treated group (bed bugs removed from filter paper) compared to a control group (bed bugs not removed). Similar low rates of mortality (or no mortality) between the treated and control group will ensure that …

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Wij danken Molly een getrouw voor verdunning en pesticide formulering hulp. We danken ook Troy Anderson probitmethode begeleiding en Zachary Adelman voor hulp bij experimenteel design. Dit onderzoek werd mede ondersteund door een Entomologische Foundation Award en door Virginia gewasbescherming beurs fondsen.

Materials

Petri dishes Fisher Scientific Inc. 08-757-105 Plastic
Filter paper Whatman 1001-042
Featherweight forceps Fisher Scientific Inc. 4750
Temprid SC (imidacloprid/bifenthrin) Bayer CropScience
Transport GHP (acetamiprid/bifenthrin) FMC Corp.
Centrifuge tube 06-443-18 50 mL; flat-top threaded
Fine mesh 7250C
KimWipe 06-666A 11 cm X 21 cm
Small paint brush Any small paint brush
Hardboard panels Composite wood or tile would be sufficient from a home improvement store
Metal weights Any type of metal screw that will hold the weight of the Petri dish down onto a surface

Referências

  1. Sabou, M., et al. Bed bugs reproductive life cycle in the clothes of a patient suffering from Alzheimer’s disease results in iron deficiency anemia. Parasite. 20, (2013).
  2. Reinhardt, K., Kempke, D., Naylor, R. A., Siva-Jothy, M. T. Sensitivity to bites by the bedbug, Cimex lectularius. Med. Vet. Entomol. 23, 163-166 (2009).
  3. Leverkus, M., et al. Bullous allergic hypersensitivity to bed bug bites mediated by IgE against salivary nitrophorin. J. invest. entomol. 126, 91-96 (2006).
  4. Fletcher, C. L., Ardern-Jones, M. R., Hay, R. J. Widespread bullous eruption due to multiple bed bug bites. Clin. Exp. Dermatol. 27, 74-75 (2002).
  5. Pritchard, M. J., Hwang, S. W. Severe anemia from bedbugs. Can. Med. Assoc. J. 181, 287-288 (2009).
  6. Goddard, J., de Shazo, R. Psychological effects of bed bug attacks (Cimex lectularius L). Am. J. Med. 125, 101-103 (2012).
  7. Harlan, H. J. Bed bugs 101: the basics of Cimex lectularius. Am. Entomol. 52, 99-101 (2006).
  8. Pinto, L. J., Cooper, R., Kraft, S. K. . Bed Bug Handbook: The Complete Guide to Bed Bugs and Their Control. , (2007).
  9. Toloza, A. C., et al. Differential patterns of insecticide resistance in eggs and first instars of Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) from Argentina and Bolivia. J. Med. Entomol. 45, 421-426 (2008).
  10. Cueto, G. M., Zerba, E. N., Picollo, M. I. Evidence of pyrethroid resistance in eggs of Pediculus humanus capitis (Phthiraptera: Pediculidae) from Argentina. J. Med. Entomol. 45, 693-697 (2008).
  11. Ho, S. H., Goh, P. M. Deltamethrin as a potential ovicidal pyrethroid against Plutella xylostella L. Toxicol. let. 22, 161-164 (1984).
  12. Bell, C. H., Hole, B. D., Evans, P. H. The occurrence of resistance to phosphine in adult and egg stages of strains of Rhyzopertha dominica (F.)(Coleoptera: Bostrichidae). J. Stored Prod. Res. 13, 91-94 (1977).
  13. Campbell, B. E., Miller, D. M. Insecticide Resistance in Eggs and First Instars of the Bed Bug, Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae). Insects. 6, 122-132 (2015).
  14. Price, L. A., Mills, K. A. The toxicity of phosphine to the immature stages of resistant and susceptible strains of some common stored product beetles, and implications for their control. J. Stored Prod. Res. 24, 51-59 (1988).
  15. Robertson, J. L., Preisler, H. K., Russel, R. M. . PoloPlus: Probit and Logit Analysis User’s Guide. , (2003).
  16. Montes, C., Cuadrillero, C., Vilella, D. Maintenance of a laboratory colony of Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) using an artificial feeding technique. J. Med. Entomol. 39, 675-679 (2002).
  17. Brogdon, W. G., McAllister, J. C. Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles. J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).
  18. Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes. PLoS One. 8 (3), (2013).
  19. Outram, I. Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation. J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).
check_url/pt/55092?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Campbell, B. E., Miller, D. M. A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug, Cimex lectularius, Eggs and First Instars. J. Vis. Exp. (121), e55092, doi:10.3791/55092 (2017).

View Video