非撹拌沈殿重合は、狭いサイズ分布の刺激応答性ポリ(N -isopropylacrylamide)ミクロゲルの合成への迅速な、再現性のプロトタイピング手法を提供します。このプロトコル合成では、光散乱特性評価および広視野顕微鏡のセットアップでこれらのミクロゲルの単一粒子蛍光追跡が実証されています。
刺激応答性ポリ(N -isopropylacrylamide)(PNIPAM)マイクロゲルは、様々な将来の実用的なアプリケーションを持っており、基礎研究に使用しています。本研究では、迅速な非撹拌沈殿重合法によってチューニングミクロゲルサイズのためのショーケースとしての蛍光標識したPNIPAMマイクロゲルを追跡する単一粒子を使用しています。このアプローチは、新しい反応組成物および条件を試作するため、または製品を大量に必要としないアプリケーションに適しています。動的および静的光散乱によってミクロゲル合成、粒子サイズ及び構造決意は、プロトコルに詳述されています。官能性コモノマーの添加は、粒子の核生成及び構造に大きな影響を持つことができることが示されています。広視野蛍光顕微鏡による単一粒子追跡を容易にすることによって調査されないシステム、非標識ミクロゲルの濃縮マトリックス中の標識トレーサーマイクロゲルの拡散の調査を可能にしますこのような動的光散乱などの他の方法。
刺激応答性ポリ(N -isopropylacrylamide)(PNIPAM)マイクロゲル1,2は、さまざまなスマートアプリケーションでの電位に起因する過去20年間連続の関心を集めています。実証されたユースケースは、低分子量化合物と他の生物医学的用途の12のために切り替え可能なエマルジ ョン安定剤3-8、マイクロレンズ9、細胞培養簡単細胞収穫10,11のための基質、およびスマート担体を含みます。ビューの基礎研究の観点から、これらの粒子は、コロイドの相互作用13-15およびポリマー-溶媒相互作用16-18として被験体を調査するために有用であることが証明されています。
任意のアプリケーションでPNIPAMミクロゲルおよびそれらの誘導体の使用の成功は、典型的には、粒度分布の平均粒径と幅に関する知識を必要とします。 PNIPAMマイクロを含む実験結果の正しい解釈のためのゲルは、官能性コモノマーの影響を受けることができる粒子構造は、知らなければなりません。動的および静的光散乱(DLSそれぞれSLSは、)は、これらの方法は、高速で使用するのが比較的容易であるため、この情報を取得するための一意に適しています。そして彼らは彼らのネイティブ環境(分散)で非侵襲的に粒子特性を調べます。 DLSおよびSLSはまた、顕微鏡法のための典型的な小さなサンプルサイズから生じるバイアスを回避する粒子の膨大な数のデータを収集します。したがって、この研究の最初の目的は、コロイド特性評価への新たな実務家のための光散乱に関するグッドプラクティスを導入することです。
一般的に、沈殿重合は、実験室規模で行われ、特定の粒子特性のための右の反応条件を見出すことは面倒であると合成の多くの繰り返しを必要とすることができます。大きなバッチ合成とは対照的に、非撹拌沈殿重合19,20は、ARであります異なる反応体組成物のバッチは、狭いサイズ分布の粒子を得、同時に重合することができるAPID手順。同時重合実験変動を最小限にし、大きな出力が正しい反応条件は、反応をアップスケーリングするための高速見つけることができることを意味します。したがって、私たちの第二の目的は、プロトタイピングで、製品を大量に必要としないアプリケーションで非撹拌沈殿重合の有用性を実証することです。
合成と特性評価のさまざまな側面は、コロイドの相互作用の研究における蛍光標識されたPNIPAMマイクロゲルの応用例で一緒に来ます。ここでは、広いマトリックス濃度範囲にわたって非標識行列ミクロゲルの分散液中の標識トレーサーのミクロゲルの拡散を調査し、濃縮コロイド分散液中のケージの効果を解決するために、高精度の単一粒子追跡を使用します。広視野蛍光顕微鏡法は、FO適していますrをそれとして、この目的は、潜在的に異なるマトリックス種の多数の中から、いくつかのトレーサー分子の特定の動作を特徴づけることができます。これは、システムのアンサンブル平均特性を測定するため、大規模なシステムでは、プローブ粒子の数が少ないの問題を解決することができないようなDLS、SLSおよびレオロジーなどの技術とは対照的です。また、この具体例では、従来の光散乱法は、任意の標準的な分析を無効に強い多重散乱をもたらす高粒子濃度に起因利用することができません。自動データ処理及び統計的方法の使用は、大きなサンプルサイズにわたって平均単一粒子追跡のために、全体的なシステム挙動の分析を可能にします。
官能性コモノマーの少量の添加は、PNIPAMミクロゲル由来の粒子サイズおよび構造に大きな影響を持つことができます。同時小規模試験管重合は、このような変化を考慮するための良い方法であり、急速に必要に応じて反応をアップスケーリングするための目標粒径のための右の反応組成物を見つけるのに役立ちます。粒子の質量?…
The authors have nothing to disclose.
The Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) is acknowledged for financial support within the Sonderforschungsbereich SFB 985 “Functional Microgels and Microgel Systems”.
Acetone | VWR Chemicals | KRAF13455 | |
Bisacrylamid | AppliChem | A3636 | |
n-Hexane | Merck | 104374 | |
N-Isopropylacrylamide | Fisher Scientific | AC412785000 | recrystallized from n-hexane |
Methacryloxyethyl thiocarbamoyl rhodamine B | Polysciences | 23591 | |
Potassium peroxodisulfate | Merck | 105091 | |
Silicone oil 47 V 350 | VWR Chemicals | 83851 | |
Toluene | Sigma Aldrich | 244511 | |
F12 Refrigerated/heating circulator | Julabo | 9116612 | |
Microscope | Olympus | IX83 | |
XY(Z) Piezo System | Physik Instrumente | P-545.3R7 | |
100x Oil immersion objective | Olympus | UPLSAPO | |
QuadLine Beamsplitter | AHF Analysentechnik | F68-556T | |
Cobolt Jive 150 laser | Cobolt | 0561-04-01-0150-300 | |
Multimode Fiber | Thorlabs | UM22-600 | |
iXON Ultra 897 EMCCD camera | Andor | DU-897U-CS0-BV | |
Laser goniometer | SLS Systemtechnik | Mark III | |
CF40 Cryo-compact circulator | Julabo | 9400340 | |
Laser goniometer system | ALV GmbH | ALV / CGS-8F | |
Multi-tau corretator | ALV GmbH | ALV-7004 | |
Light scattering electronics | ALV GmbH | ALV / LSE 5004 | |
Photon counting module | PerkinElmer | SPCM-CD2969 | 2 units in pseudo cross-correlation mode |
633 nm HeNe Laser | JDS Uniphase | 1145P | |
F32 Refrigerated/heating circulator | Julabo | 9312632 |